Histology Flashcards
Tissu nucléaire = pos/neg? Acide/basique? , ❤aime colorant basique/acidique? et acidophilie ou basophilie?
Negatif, acide, aime colorant basique, donc basophilie
Tissu non-nucléaire = pos/neg? Acide/basique? , aime colorant basique/acidique? et acidophile ou basophilie
Positif, basique, aime colorant acide , donc acidophile
Colorant positif = basique , est un colorant…..
Colorant cationique
Colorant negatif = acide , est un colorant…..
Colorant anionique
Colorant + mordant =
Laque
- Coloration non nucléaires, du principalement au protéine : ont un groupement terminal….
- Cette charge dépend du pH
1.Protéine peut être soit + (aminé NH2+) ou - (carboxyle COO-) ou les deux (amphotère)
- pH 6 = Neutre pour les protéines
pH plus 6 = protéine - = aime colorant cationique
pH moins 6 = protéine + = aime colorant basique
Comment ralentir suroxydation (HE)
L’ajout HCl
- Hématoxyline oxydé =
2. Suroxydé =
- Hématéine
2. Oxyhématéine
*RT
Avantage et désavantage d’un paraffine avec point fusion bas
Point de fusion bas
- avantage: plus facile a faire des rubans
- désavantage: mauvais support pout des tissus dur et sections minces plus difficile à obtenir
*RT
Avantage et désavantage d’un paraffine avec point fusion élevé
Point de fusion élevé
- avantage: meilleur support pour tissu dur et plus facile à obtenir des sections minces
- désavantage: plus difficile a faire des rubans
Durcissement de la paraffine, Pour une cristallisation uniforme on doit…
Attendre que la plaque réfrigérante soit bien froid ~4oC
Comment oriente une pièce avec l’encre de chine?
Tu veux voir la partie avec l’encre et sans l’encre en même temps
Erreur plus fréquente lors enrobage
Orientation du spécimen
Tissu trop froid cause lors enrobage cause
Formation d’un halo autour la pièce, le tissu ce détache de la paraffine pendant la coupe
Refroidissement trop vite du bloc cause.. lors enrobage
Bloc à surface concave
Refroidissement trop lent cause.. lors enrobage
Cristallisation irrégulière
Tissu d’apparence molle, morceau sent comme le xylène
- cause
- précention
- retrait/correction
Cause: trop épais ou le tissu est compresser par le cassette
Prévention: coupe plus mince, assure bien fixé, fair sur le circulateur fonctionne bien
Retrait/correction:
- coupe plus mince et remettre cassete à traiter ( xylène, tetrahydrofurane, xylene, paraffine/imprégnation et renrober)
- Fixation incomplète: fondre parraffine, circulateur, demarre nettoyage, passer manuellement 95 et 70%, mettre formol et recirculer
enrobage ,Contamination:
Cause
Prévention
Cause: transfert de fragments de tissu d’un autre spécimen
Prévention: nettoyer pinces et ouvrir une seule cassette à la fois
enrobage Morceaux de tissu manquants:
Cause
Prévention
Cause: manque attention ou erreur à la salle de coupe
Prévention: noter # de fragments sur cassette, vérifier sur le couvercle de la cassette avant la jeter
Et attention de l’utilisation lens paper ou tea bag
Pourquoi congeler?
STAT, le patient est dans la salle d’opération
*RT
Comment on maintien le tout? cryostat
- Décongeler le cryostat
- Nettoyer
- Lubrifie les partie mécaniques
- Si le mécanisme devient raide= traiter avec alcool 100%, assécher puis lubrifier
*RT maybe Troubleshoot 1. Section adhère à la plaque 2. Section frottent la plaque 3. Section avec égratignures 4. Section ne glisse pas entre plaque et couteau
- Plaque trop chaud
- plaque trop avancé par rapport au couteau
- Plaque endommagé
- Plaque trop éloignée
circulation
Étapes (3)
- Dèshydratation (alcool)
- Éclaircissement (xylène)
- Imprégnation (paraffine)
Bains déshydration
Éthanol : 70%, 95%, 100%, 100%, 100%
Tissu fragile ex cerveau ou embryon : 30% et non 70%
*RT
Quoi on peut ajouter dans le dernier bain d’alcool pour verifié si il y a de l’eau?
Sulfate de cuivre anhydre, bleu=présence d’eau
*RT
Agents déshydratant qui est un solvant universel
Tétrahydrofurane (THF), très utile lorsqu’on reprend déshydratation et éclairssement
Présence de précipités dans la chambre et les tubulures du circulateur
-cause
RT *-prévention
RT *-retrait/correction
Cause: formol-zinc ou tamponné
Prévention: débute déshydratation 60% et pH moins de 7
Retrait/correction: rinçant chambre et tubulures avec acide acétique 5%
ciruclation, Déshydratant excessive
- apparence
- cause
- prévention
Apparence: microchatter
Cause: trop longtemps en déshydratation
Prévention: diminuer le temps en déshydratation
Circulation inadéquate
- Apparence
- Cause
- Prévention
- Apparence: pauvre coloration
- Cause: l’eau dans le tissu lors éclaircissement ou présence d’agent éclaircissement (dilué), trop chaud et problème mécanique
- prévention: assurer l’alcool 100% est pur, chaleur seulement pour paraffine…
circulation, Dessiccation (assèchement)
- cause
- prévention
Cause : tissu laissé dans l’air libre
Correction: enlever plus de paraffine possible et placer le tissu dans la solution réhydratante
microtome, Angle de dégagement trop grand cause…(6)
Grattage du bloc Pas de ruban Coupe s'enroule Coupe se déchire Chattering Ondulation
microtome, Angle de dégagement trop petit cause… (4)
- Coupe comprimées
- Coupes plissées
- Coupe décollent du rasoir et adhèrent au bloc
- Coupe d’épaisseur inégale(mince à épais)
microtome, Ruban de section est incurvé, 4 causes et correction
Cause
- Bords du bloc ne sont pas parallèles
- Bord du bloc et pas parallèle au couteau
- Surplus paraffine sur côté du bloc
- Couteau émoussé
Correction
- Aligner le bloc
- S’assurer le bloc est parallèle du couteau
- Enlever surplus paraffine
- Déplacer/remplacer couteau
microtome, La surface du bloc n’est pas sectionnée également
1 cause et correction
Cause
1. Le porte-bloc/bloc pas parallèle au couteau
Correction
1. Assurer la surface du bloc est parallèle avec le couteau
microtome, Troues dans la section
4 causes et correction
Cause
- Attaque de bloc trop aggressive
- Déshydratation excessive
- Air dans le tissu lors l’imprégnation
- Imprégnation incomplète du tissu ou mauvais circulation
Correction
- Rabotage plus douce, et trempé bloc dans l’eau glacée
- Tremper le bloc dans l’eau glacé
- Reimprégner
- Reimprégner ou recirculer
microtome, Aucun formation de ruban
5 cause et correction
Cause
- Couteau émoussé
- Paraffine trop dure
- Angle de dégagement trop grand
- Température trop bas
- Débris sur le couteau
Correction
- Déplacer/remplacer couteau
- Remplacer avec la paraffine avec point fusion plus bas
- ajuster l’angle de dégagement (diminue)
- Ajuster la température
- Nettoyer la lane avec un peu de xylène