hc w3 Flashcards
Systematische toxicologische analyse
screening, identificatie en conformatie, kwantificatie, interpretatie
Stappen methodologie
beoordeling materiaal - waar kan je wat uithalen
extractie - enkelvoudig voor rendement, terugextractie voor zuiverheid
Aanlevering van bloed
wordt door arts afgenomen, in buizen of urinepotje
manieren om biologische vloeistoffen aan te leveren
koeling - remt vorming en ontleding
conserveermiddel - remt vorming stoffen | natriumfluoride en kaliumoxalaat
antistollingsmiddel - heparine
Extractie methodes
Headspace - vluchtigheid, vluchtige componenten en redelijk schoon
LLE - oplosbaarheid, verdere analyse met GC
SPE - interactie met SPE - kolom
Vast matrixen onderzoeken (haar en nagels)
mechanisch klein maken - kogeltjes en schudden
methanol toevoegen
Wat doet een interne standaard
Het is een sterkgelijkende substantie als dat van het analiet en wordt in gelijke hoeveelheden toegevoegd aan sample(s), blanco en standaarden. corrigeert voor verlies van analiet bij de extractie of bij de sample invoer
eisen interne standaard
sterk gelijkend aan anliet
effecten van de samplevoorbewerking moeten voor analiet en IS vergelijkbaar zijn
structuuranaloog of gedeutereerde analoog van analiet
monstervoorbewerking
indampen - bij lage concentraties van extractie. Stikstofgas want gaat geen reactie aan met analiet.
monstervoorbereiding - niet geschikt voor extractie
1 geconjugeerde vorm
2 stof gebonden eiwitten gaan niet naar andere fase - niet geschikt exxtractie
oplossing, deconjugatie en eiwitten neerslaan
deconjugatie
geconjugeerde groep aan het molecuul verwijderen door enzymen toe te voegen
eiwitprecipitatie
eiwitten neerslaan:
organisch oplosmiddel, zinksulfaat + methanol, trichloroazijnsuur, 5-sulfosalicylzuur, perchloorzuur, uitzouten (meeste sturing)
voor en nadeel eiwitten neerslaan
oplosbaarheid van eiwitten wordt verlaagd
forensische interessante eiwitten worden verwijderd (insuline) - hiervoor kun je dus een IS gebruiken.
inorganische componenten moeten verteerd worden met zuren of enzumen : specimen digestion
screening
immunoassays (EMIT | ELISA | FPIA)- biochemische testen gebaseerd op het binden van een antilichaam aan een antigeen. Hoge gevoeligheid lage selectiviteit. Beste is urine in verdunde vorm,
immunoassays
homogene assay
geen scheiding (EMIT)
basis van competitie tussen stof in monster en stof - enzym conjugaat voor een beperkt aantal bindplekken op een voorgecoate microplaat (ELISA)
