Gentherapien voor spierziekten Flashcards
Wat is de genetische oorzaak van de ziekte van Pompe en welke effecten heeft deze aandoening op het lichaam?
De ziekte van Pompe is een autosomaal recessieve aandoening veroorzaakt door een tekort aan acid alfa-glucosidase (GAA), wat resulteert in lysosomale stapelingsziekte. Dit heeft voornamelijk invloed op de spieren en kent een spectrum van ernst, afhankelijk van de restactiviteit van GAA in vergelijking met gezonde individuen.
Hoe wordt gentherapie gebruikt als behandeling voor de ziekte van Pompe en wat zijn de twee belangrijkste virale vectoren die hiervoor worden toegepast?
Gentherapie met virale vectoren wordt toegepast voor de ziekte van Pompe, waarbij twee belangrijke vectoren worden gebruikt: AAV- en lentivirale vectoren. Deze therapieën richten zich op het herstellen van het tekort aan GAA door het virus te gebruiken om het ontbrekende enzym tot expressie te brengen.
Wat zijn de voordelen van AAV-gebaseerde gentherapie voor de ziekte van Pompe?
Laag risico op integratie in het DNA van de cel (insertionele mutagenese), semi-langdurige werking (1x in 10 jaar toedienen), en de mogelijkheid om te gebruiken als een GAA-fabriek in de lever.
Wat zijn de nadelen van AAV-gebaseerde gentherapie voor de ziekte van Pompe?
Moeilijk te produceren, natuurlijke immuniteit tegen AAV, beperkte capaciteit voor genetische lading, uitdagingen bij het richten op spierweefsel.
Hoe werkt de lentivirale gentherapie bij de ziekte van Pompe?
Het lentivirale gentherapieconcept omvat de verzameling van hematopoëtische stamcellen (HSC), gevolgd door celuitbreiding waar het virus aan wordt toegevoegd. Na transductie en integratie van het virus in de cel, kan controle plaatsvinden om te bevestigen of de cellen correct functioneren.
Welke voordelen heeft lentivirale gentherapie bij de ziekte van Pompe?
Voordelen zijn onder andere een enkele injectie, robuuste expressie van het gen, geschiktheid voor ex-vivo gen-correctie en een grotere beschikbare genetische lading.
Wat zijn de nadelen van het lentivirale gentherapieconcept bij de ziekte van Pompe?
Nadelen omvatten uitdagingen in de productie, mogelijk genotoxiciteit en moeilijkheden bij specifieke targeting naar spierweefsel.
Hoe worden fibroblasten omgezet naar myogenic progenitors en wat is hun potentieel bij de behandeling van spierziekten?
Fibroblasten worden omgezet in induced pluripotent stem (IPS) cellen en vervolgens naar myogenic progenitors. Deze cellen hebben een groot vermeerderingspotentieel en kunnen differentiëren tot echte spiervezels, zelfs in 2D-organoiden en 3D-systemen. Ze kunnen een rol spelen bij de behandeling van spierziekten door differentiatie tot spiervezels.
Hoe worden IPS-afgeleide spierstamcellen gebruikt in de context van spierziekten?
Deze cellen dienen als waardevol model voor het onderzoeken van spierziekten. Ze helpen bij het monitoren van de moleculaire pathologie van deze ziekten en kunnen worden ingezet voor het controleren van isogene controles.
Welke toekomstige toepassingen zijn er voor CRISPR-Cas9-technologie en welke verschillende methoden worden gebruikt?
CRISPR-Cas9 biedt mogelijkheden zoals het induceren van een DNA-breuk op een specifieke plaats, directe base-editing en manipulatie van genexpressie, RNA-manipulatie, en meer. Het maakt gebruik van verschillende methoden, waaronder NHEJ voor het maken van knockouts en HDR voor knock-ins.
Wat zijn enkele voordelen van CRISPR-Cas-technologie?
Voordelen zijn de zeer specifieke targeting, de diversiteit van de toolset en de brede implicaties voor toekomstig onderzoek en therapieën.
Wat zijn enkele nadelen van CRISPR-Cas-technologie?
Nadelen omvatten mogelijke genotoxiciteit, niet volledig uitsluiten van off-target effecten, de grootte van Cas9 die integratie in huidige virale vectoren bemoeilijkt, en ethische vraagstukken rondom toepassing.
