Fisiologia Flashcards
Il terreno di coltura per le cellule di mammifero contiene:
- FBS come miscela di fattori di crescita
- DMEM come miscela di fattori di crescita
- FBS come miscela di antibiotici
- HCO3- come anione principale
FBS cioè siero bovino fetale estremamente ricco di fattori di crescita embrionali
Una cappa laminare a flusso verticale:
- La parte sterile è quella anteriore
- La parte sterile è quella posteriore
- Offre la maggior protezione per le cellule
- Offre la maggior protezione sia per le cellule che per l’operatore
Offre la maggior protezione sia per le cellule che per l’operatore
Cosa deve contenere il terreno di coltura utilizzato in laboratorio per far crescere le cellule di mammifero?
- Siero con fattori di crescita, amminoacidi essenziali e antibiotici
- Sali minerali
- Antibiotici
- Amminoacidi essenziali e antibiotici
Siero bovino fetale contenente fattori di crescita FBS, amminoacidi essenziali come glutammato e antibiotici
Per mantenere condizioni di sterilità nelle colture cellulari, è necessario:
- Utilizzare sempre antibiotici
- Nessuna risposta corretta
- Sterilizzare i terreni di coltura mediante UV
- Filtrare i terreni di coltura prima di ogni utilizzo
Nessuna risposta è corretta; la risposta sarebbe lavorare costantemente sotto la cappa
Qual è l’andamento tipico della curva di crescita delle cellule di mammifero coltivate in vitro?
- Esponenziale, seguito da fase stazionaria e eventualmente fase di declino
- Lineare
- Stazionario
- Dipende dal tipo di cellule
Esponenziale, seguito da fase stazionaria e eventualmente fase di declino
Quale concentrazione di Sali contiene la soluzione fisiologica extracellulare per le cellule di mammifero?
- Ca 50mM di KCl
- Ca 50mM di NaCl
- Nessuna delle risposte
- Ca 10mM di CaCl2
Nessuna delle risposte
Il differenziamento neuronale:
- È un processo che avviene in vivo e che non può essere riprodotto in vitro
- Può essere indotto in coltura mantenendo le cellule in terreno con fattori di crescita
- Nessuna delle risposte è corretta
- Si verifica quando le cellule crescono a confluenza
Nessuna delle risposte è corretta.
—> affinchè la differenziazione avvenga, il siero contenente i fattori di crescita viene quasi del tutto eliminato.
La concentrazione di Ca intracellulare:
- Si mantiene costante durante il ciclo cellulare
- Non è mai superiore alla concentrazione di 100nM
- Diminuisce in risposta alla stimolazione dei recettori purinergici
- Non supera mai quella extracellulare
Non supera mai quella extracellulare
—> concentrazione interna pari a 10-100 nM; può raggiungere i 1-2 microM
Qual è la formula corretta da applicare per effettuare la conta delle cellule contenute in 5ml di terreno di coltura mediante una cameretta conta cellule?
- N° medio delle cell presenti in 4 quadrati x 5 x 10^4
- N° di cell contenute nell’intera griglia della cameretta conta cellule
- N° medio delle cell presenti in 4 quadrati x 10^4
- N° di cell in 1 quadrato x 5 x 10^4
N° medio di cellule presenti in 4 quadranti x 5 mL x10^4
I recettori purinergici:
- 2APB è il loro antagonista recettoriale
- Possono inibire la PLC tramite proteina G
- Mediano ingresso di Ca dall’ambiente extracell attraverso l’isoforma P2X
- Bloccano la fuoriuscita di Ca dal reticolo, attraverso i recettori dell’IP3
Mediano ingresso di calcio dall’ambiente extracellulare attraverso l’iOS forma P2X
Il colorante FLUO-4:
- Ha una Kd di circa 50microM
- È un colorante a singola lunghezza d’onda (non raziometrico)
- È un colorante specifico per la misura di livelli di Ca nucleari
- Compartimentalizza selettivamente nel RE
È un colorante a singola lunghezza d’onda
—> fluoroforo che è in grado di eccitarsi a 488 nm e emette una singola lunghezza d’onda
Il colorante FLUO-4:
- Viene eccitato a 488nm
- Il valore della fluorescenza assoluta è proporzionale solo alla quantità di Ca legata al colorante stesso
- È una molecola che lega in modo aspecifico i cationi intracellulari
- Presenta uno spettro di emissione con fluorescenza massima a 488nm
Viene eccitato a 488 nm
Il colorante FLUO-4:
- Entra nel nucleo
- È in grado di attraversare la membrana plasmatica se dotato di un gruppo AM
- È utile per misurare la concentrazione di Ca extracellulare
- Si lega a recettori dell’IP3
È in grado di attraversare la membrana plasmatica se dotato di un gruppo am
Quale delle seguenti affermazioni riguardanti FLUO-4 è vera?
- Viene eccitato a lunghezza d’onda nel visibile
- Si usa per misurare le concentrazioni di sodio nelle cellule viventi
- Emette a 488nm
- Non viene internalizzato, ma si lega a recettori di membrana
Viene eccitato a lunghezza d’onda nel visibile (488 nm)
Quali sono le principali vie di ingresso di Ca nell’ambiente extracell nelle cell in stato indifferenziato?
- Canali Ca voltaggio-dipendenti
- Nessuna delle risposte è corretta
- Recettori della rianodina
- Recettori dell’IP3
Nessuna delle risposte è corretta
Quale di queste funzioni del sistema FLUOstar Omega è vera?
- Nessuna di quelle indicate
- Si può lavorare sia a T° che a CO2 controllata
- È possibile creare appositi protocolli per effettuare analisi di fluorescenza a diverse lunghezze d’onda
- Lavora solo con campioni di cellule in sospensione
possibile creare appositi protocolli per effettuare analisi di fluorescenza a diverse lunghezze d’onda
SOCE indica:
- Ingresso di Ca mediato da canali voltaggio-dipendenti
- Ingresso di Ca mediato da recettori metabotropici
- Rilascio di Ca dal RE indotto dall’ingresso di Ca esterno
- Ingresso di Ca dall’esterno dipendente dai livelli di Ca nel RE
Ingresso di Ca2+ dall’esterno dipendente dai livelli di calcio nel RE
Il lettore di piastre FLUOstar Omega è uno strumento di lab che permette:
- Di effettuare misure in fluorescenza solo su micro piastre da 96 pozzetti
- Di effettuare esperimenti iniettando contemporaneamente fino a 3 farmaci
- Di analizzare le proprietà elettriche delle cellule
- L’analisi della fluorescenza delle cellule in adesione a T° controllata
L’analisi della fluorescenza delle cellule in adesione a T° controllata.
Quale delle seguenti affermazioni su FLUO-4 è corretta?
- È usato per misurare la concentrazione di sodio nelle cell viventi
- Viene eccitato a una lunghezza d’onda nel visibile
- Emette a 488nm
- Non viene internalizzato ma si lega a rec di membrana
Viene eccitato a una lunghezza d’onda nel visibile
Un plate reader come quello utilizzato in laboratorio permette di:
- Fare analisi di singola cellula
- Fare misure di A e fluorescenza
- Analizzare la morfologia cellulare
- Separare le cellule in base alle loro dimensioni
Fare misure di assorbanza e fluorescenza.
L’incubatore usato per le colture cellulari:
- È un ambiente sterile
- Mantiene costante l’umidità
- Mantiene costante T° e pH
- Mantiene Co2 uguale a quella atmosferica
Mantiene costante temperatura e pH
L’acido retinoico:
- È un derivato della vitamina C
- È un derivato della vitamina A
- È un enzima
- È in grado di attraversare la membrana plasmatica ma non quella nucleare
È un derivato della vitamina A
Una curva di risposta dell’azione di un composto (es. ATP inc ell F-11):
- Può essere generata usando solo 2 concentrazioni di composto
- Può essere stimata usando una funzione lineare
- Nessuna delle precedenti è corretta
- Segue un andamento previsto dall’equazione di Michaelis e Menten
segue andamento di Michaelis e menten
Per procedere alla conta delle cellule di mammifero:
- Serve seminare le cellule nella cameretta conta cellule
- Serve staccare le cellule dalla piastra e trasferirle nella cameretta conta cellule
- Nessuna delle risposte
- Si usa uno spettrofotometro
Serve staccare le cellule dalla piastra e trasferirle nella cameretta conta cellule
La mobilizzazione di Ca indotta da ATP è caratterizzata da:
- Attivazione dei recettori P2X ma non del P2Y
- Inibizione del pathway PLC-IP3
- Aumento transiente di Ca in assenza di Ca nella soluzione extracellulare
- Inibizione dell’uptake di Ca nel RE
Aumento transiente di Ca in assenza di Ca nella soluzione extracellulare
In un grafico che mostra la variazione del Ca indotta dall’ATP in funzione del tempo, F/F0 cosa rappresenta?
- La normalizzazione dei valori di fluorescenza rispetto a quello basale di una popolazione cellulare
- L’effetto dell’ATP su una singola cellula
- La concentrazione di Ca nel RE
- Il rapporto tra lo spettro di eccitazione e quello di emissione del FLUO
La normalizzazione dei valori di fluorescenza rispetto a quello basale di una popolazione cellulare.
La capseicina è:
- un attivatore specifico dei recettori P2Y
- principale inibitore di TRPV1
- principale attivatore dei recettori trpv4
- nessuna delle altre risposte è corretta
Nessuna delle altre risposte è corretta
Una curva dose risposta dell’azione di un composto (es. azione dell’ATP in cellule F11):
- può essere generata utilizzando solo 2 concentrazioni di composto
- nessuna delle precedenti è corretta
- segue un andamento previsto dall’equazione di Michaelis Menten
- può essere stimata utilizzando una funzione liberare
Segue un andamento previsto dall’equazione di Michaelis e Menten
Se in una traccia di fluorescenza il segnale torna alla linea di base dopo il picco indotto dall’iniezione con l’ATP, in quali condizioni si è probabilmente effettuata la registrazione?
- soluzione extracellulare senza calcio
- soluzione intracellulare con un’alta concentrazione di calcio
- soluzione extracellulare con un’alta concentrazione di calcio
- soluzione extracellulare senza calcio e con aggiunta di EGTA
Soluzione extracellulare senza calcio e con aggiunta di EGTA
Il canale transient receptor potential vanilloid 1 (TRPV1) si attiva:
- In presenza della Capsazepina
- In presenza di Capsaicina
- a temperature attorno ai 25° C
- Nessuna delle risposte è corretta
In presenza di Capsaicina
