FERM -- Chapter 5: Sterilisatie Flashcards
Sterilisatie
- inactivering van alle levende microorganismen (zowel vegetatieve cellen als sporen)
keyword: ALLE
Pasteurisatie
Inactivering van micro-organismen die ziekte of (voedsel)bederf veroorzaken
Dit gebeurt vaak door een milde warmtebehandeling.
Let op dat dit niet alle micro-organismen zijn en dus niet hetzelfde is als sterilisatie.
Geef een voorbeeld dat het verschil tussen sterilisatie en pasteurisatie demonstreert
Bepaalde sporen zijn beter bestend tegen de hitte of andere extreme condities.
Om deze reden zijn ze bestend tegen pasteurisatie, Dus sterilisatie is nodig
Destructieve sterilisatie (2 manieren)
- Straling: hoge E straling wordt gebruikt om de micro organismen te vernietigen
- Thermisch: gecontrolleerde toevoeging van warmte om de hittegevoelige organismen kapot te maken
Verwijderingsterilisatie (1 manier)
Filtratie: scheiding op basis van deeltjesgrootte
Processterilisatie (2 manieren)
- batch: een heel volume wordt in 1 keergesteriliseerd gebruimakende van het “Heating-Holding-Cooling”-proces (gebeurt in de fermentor zelf)
- continue: een deel van het volume wordt maar gesteriliseerd per keer door het medium te gebruiken als warmtewisselaar en stoom als warmtebron (gebeurt in de toevoer)
Waarom moeten we steriliseren?
- Andere organismen kunnen het medium ook gebruiken om te groeien, wat resulteert in een lagere productiviteit
- Contaminant kan over-concurreren met het micro-organisme dat we willen
- Het eindproduct kan worden gecontamineerd
- Contaminant kan zorgen voor problemen in downstream processing
- Contaminant kan het gewenste product afbreken
- Contaminant kan de cultuur doden bv. bacteriofaag (virus dat bacteriën aanvalt) in bacteriemedium
Geef enkele voorbeelden van problemen door contaminatie.
- Penicilline is antibacterieel. Maar bepaalde bacterien zijn resistent hiertegen. Deze maken een bepaalde stof aan (beta lactamase) die penicilline afbreekt. Het is de een voorbeeld van contaminatie die het gewenste product afbreekt
- Bacteriofagen injecteren hun DNA of RNA in waardoor a. dit D/RNA in de cel zal vermenigvuldigen en nieuwe bacteriofagen vormen en uiteindelijk de cel doen openbarsten waardoor de virussen vrijkomen. Of b. Het DNA wordt geincorporeerd in het DNA van de cel waardoor het mee deelt met de cellen en onder bepaalde condities zal openbarsten en de virussen vrijkomen.
a = lytische cyclus b = lysogene cyclus
Is sterilisatie nodig bij alle fermentatieprocessen? Indien nee, geef een voorbeeld
Bij het brouwen van bier kunnen bepaalde harsen van hop toegevoegd worden die de groei van veel micro-organismen inhibieren
Bier moet dus net antiseptisch gebeuren
Fermentoren worden wel schoongemaakt maar niet gesteriliseerd
Wat is het meest nuttig voor sterilisatie d.m.v. warmte? Hoe gebeurt dit?
Stoom: Het medium wordt onder druk (2 atm) opgewarmd tot 121 graden C voor 15-20 min
Waarom wordt de druk verhoogd bij gebruik van stoom?
Doordat bij hogere druk het kookpunt verhoogd wordt en dus hogere temperaturen gehaald kunnen worden.
Hoe kunnen we sterilisatie door stoom beschrijven?
Als een chemische degradatiereactie. het zal dus een reactie rate (dN/dt) hebben die evenredig is met de hoeveelheid product die nog gedegradeerd moet worden (N). Met specifieke death-constante(k_d)
dN/dt = -k_d * N
k_d hang af van de temperatuur (T) volgens de arrheniusvergelijking. En hangt verder nog af van andere factoren zoals soort organisme.
k_d = A * exp(-E/RT)
Waarom zal er waarschijnlijk een afwijking zijn van de theoretisch berekende waarden?
k_d hangt af van: - soort [a] - fysiologische vorm (cel of spoor) [b] - temperatuur [c] De berekeningen nemen zuivere cultuur [a], 1 fysiologische vorm [b] en ideale condities [c] aan
[a] omdat de ene soort sneller zal sterven dan de andere soort
[b] omdat sporen resistenter zijn tegen extreme condities
[c] omdat bij hogere temperatuur verschillende processen sneller zullen gebeuren
Wat zijn endosporen?
DNA wordt gerepliceerd in een cel en daarrond wordt een soort mantel gemaakt die dan vrijgelaten wordt in het medium. Het bestaat uit de bacteriele chromosoom (Verzameling DNA) met daarrond een peptidoglycaanlaag en daarrond een spoormantel
Welke effecten kunnen stoom hebben op endosporen?
- vernietiging
- inductie van kieming in den beginne van het sterilisatieproces
Wat is de Nabla factor?
ln(N_0/N_t) = ∇
∇ = A * t * e^(-E/RT)
het is de daling van aantal levende cellen bij bepaalde temperatuur tijdens een bepaalde tijdsduur
We hebben verschillende combinaties van t en T om eenzelfde ∇ te bekomen