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MCB-1908 > Examen microscopique > Flashcards

Examen microscopique Flashcards

1
Q

Quel type de source lumineuse est utilisée dans le microscope confocal à balayage laser?

A

Un laser UV

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Q

Comment appelle-t-on les colorants en microscopie à fluorescence?

A

Des fluorochromes

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3
Q

À quoi sert le cône de Abbe dans la microscopie à fond noir?

A

À s’assurer que seule la lumière réfléchie ou réfractée par l’échantillon forme une image

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4
Q

Quels 3 microscopes peuvent être intégrés dans le même instrument?

A
  • À fond clair
  • À fond noir
  • À contraste de phase
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Q

Quelle est la différence principale entre le microscope à effet tunnel et à force atomique?

A

Le microscope à force atomique permet d’étudier des surfaces qui ne conduisent pas bien l’électricité

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6
Q

Quelles sont les coloration différentielles les plus fréquentes?

A
  • Coloration de Gram

- Coloration alcoolo-acido-résistance

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7
Q

La longueur d’onde de la lumière émise par l’échantillon suite à l’excitation sera-t-elle plus grande ou plus petite que celle de la lumière excitatrice?

A

Plus grande (donc de plus faible énergie)

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8
Q

Les cellules sont-elles vivantes ou mortes en microscopie à contraste d’interférence différentielle?

A

Vivantes, car ni fixation ni coloration

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9
Q

À quel facteur est directement proportionnel le contraste?

A

À la différence de quantité de lumière absorbée par l’échantillon et l’environnement (plus l’échantillon absorbe, plus le contraste est bon)

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10
Q

Qu’est-ce que la coloration simple?

A

Un seul colorant chargé positivement se fixera sur les organismes chargés négativement, il y aura coloration uniforme

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11
Q

Quelles structures cellulaires sont souvent mises en évidence par les colorations différentielles?

A
  • Endospores
  • Capsules
  • Flagelles
  • Corps d’inclusion
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12
Q

En microscopie à fond clair, quel est le meilleur moyen d’augmenter le contraste?

A

L’utilisation de coloration

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13
Q

Quels sont les 2 types de microscopes à balayage de sonde?

A
  • À effet tunnel

- À force atomique

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14
Q

Sur quel principe est basé la coloration de Gram?

A

Rétention du violet de cristal

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15
Q

Quel colorant est souvent utilisé en coloration simple?

A

Bleu de méthylène

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16
Q

Pourquoi la coloration alcoolo-acido-résistance est-elle surtout utilisée pour mettre en évidence les mycobactéries?

A

Car les mycobactéries ont des parois cellulaires qui possèdent de l’acide mycolique qui retient le carbol funchsine

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17
Q

Quel est le principe du microscope à force atomique?

A

Déplacement d’une sonde effilée à la surface de l’échantillon tout en maintenant constante la distance entre la pointe de la sonde et cette surface

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18
Q

Que devrait-on faire avec la longueur d’onde afin de diminuer la limite de résolution?

A

Nous devrions la diminuer

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19
Q

Quels sont les 3 inconvénients d’utiliser les UV (faible longueur d’onde) comme source lumineuse?

A
  • Le verre est opaque aux UV, on devrait donc utiliser du quartz ce qui est très couteux
  • Comme le UV est à l’extérieur du visible, on devrait faire une transformation optique pour le rendre visible
  • Ça pose des problèmes de sécurité car les UV sont dommageables pour l’oeil
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20
Q

Quel est l’effet de la préparation à l’état frais sur le contraste?

A

Diminution du contraste

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21
Q

Dans un microscope intégré, quelle pièce est mobile?

A

Le condensateur

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22
Q

Que doit on faire face à la limite suivante: Les électrons voyagent dans le vide?

A

L’intérieur du microscope doit être sous vide

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23
Q

Pourquoi la coloration n’est pas possible pour observer la motilité en microscopie à fond clair?

A

Car il existe peu de colorants vitaux, donc les organismes sont souvent morts après la coloration

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24
Q

L’image en microscopie à contraste de phase est-elle sombre ou claire?

A

Image sombre sur fond clair

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25
Q

Quel est le principe de l’immuno-localisation cellulaire?

A

On couple des anticorps et des billes (Fe ou Au), on observe l’accumulation de billes à l’endroit où l’anticorps a reconnu la protéine

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26
Q

Qu’est-ce que la cryotomographie électronique?

A

Technique qui permet de faire des strates de l’échantillon sans production de coupe, fait dans la glace vitreuse.

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27
Q

Que doit on faire face à la limite suivante: Les électrons sont non-pénétrants?

A

On doit utiliser des coupes ultra-fines

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28
Q

Sur quoi peut être récolté l’image en microscopie électronique?

A
  • Écran fluorescent
  • Plaque photographique
  • Détecteur numérique
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29
Q

Quels sont les 3 facteurs sur lesquels on peut intervenir en

A
  • Longueur d’onde
  • Indice de réfraction du milieu
  • Angle du cône de lumière
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30
Q

Que doit on faire face à la limite suivante: Le matériel vivant est non électron-dense?

A

On doit colorer par des matériaux imperméables aux électrons (métaux, acide phosphotungstique)

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31
Q

Sur quel principe est basé la microscopie à contraste de phase?

A

En ayant des structures de densités différentes, il y a des réfractions différentes et donc des intensités lumineuses différentes

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32
Q

Quels sont les 2 grands types de microscopes?

A
  • Photonique

- Électronique

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33
Q

En quoi consiste la technique de l’ombrage?

A

On vaporise des métaux qui absorbent des électrons, et il y a une ombre dans les portions où il n’y a pas accumulation de métaux

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34
Q

Que permet d’observer la coloration négative?

A
  • Relief

- Structure des virus

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35
Q

Quels facteurs forment l’agrandissement?

A

Objectif x oculaire

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36
Q

Vrai ou faux. Le contraste sera élevé lorsque l’échantillon est placé dans beaucoup d’eau.

A

Faux, il sera faible car l’eau absorbe une grande quantité de lumière

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37
Q

L’augmentation du contraste en microscopie à contraste de phase altère-t-elle l’organisme observé?

A

Non, car on joue seulement avec l’intensité de la lumière et il n’y a ni coloration ni fixation

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38
Q

Quelle est la principale limite du microscope à contraste d’interférence différentielle?

A

Les préparations doivent être transparentes, car on doit pouvoir modifier la polarisation de la lumière

39
Q

Quelle est la limite de résolution du microscope électronique?

A

0,05 nm

40
Q

À quel microscope ressemble le microscope à contraste de phase (vu de l’extérieur)?

A

Microscope à fond clair

41
Q

Quel agrandissement peut-on atteindre avec un microscope à effet tunnel?

A

Jusqu’à 10*8 (100 millions)

42
Q

Quelle est la meilleure limite de résolution du meilleur microscope photonique?

A

0,1 micron (u) ou 100 nm

43
Q

Qu’est-ce que la limite de résolution?

A

Distance minimale entre 2 points qui peuvent être perçus comme étant distincts

44
Q

Quel est le principe du microscope électronique à transmission?

A

Les électrons traversent l’échantillon (détecteur sous l’échantillon)

45
Q

Quel est le principe du microscope électronique à balayage?

A

Balayage de la surface de l’échantillon (détecteur latéral)

46
Q

En quoi consiste la technique de cryodécapage?

A

L’échantillon est congelé rapidement à -180 C. On fait ensuite une coupe transversale et l’échantillon casse aux zones de faiblesse (souvent membrane). Si on fait la technique de l’ombrage, on peut observer les structures et l’intérieur de la cellule.

47
Q

Vrai ou faux. Les virus peuvent être vus autant en microscopie photonique qu’électronique.

A

Faux, ils sont trop petits pour être vus en microscopie optique

48
Q

Quel est le principe du microscope à balayage de sonde?

A

Une sonde balaie la surface et mesure le déplacement vertical/horizontal et le courant entre les nuages électroniques

49
Q

À quel groupe de microscope appartient le microscope à balayage de sonde?

A

Ni photonique, ni électronique (classe à part)

50
Q

Qu’est-ce qui explique la limite de résolution aussi basse du microscope électronique?

A

La longueur d’onde extrêmement petite des électrons (5 x 10-12) comparé à celle des photons (5 x 10-7)

51
Q

Vrai ou faux. La microscopie à fond noir requiert une coloration et une fixation.

A

Faux, elle n’en requiert pas et il est donc possible d’observer des échantillons vivants

52
Q

Qu’est-ce qui remplace la lumière en microscopie électronique?

A

Les électrons

53
Q

Quelles sont 2 applications en microscopie à fluorescence?

A
  • Fluorochromes vitaux (proportion de cellules vivantes et mortes)
  • Immunofluorescence (diagnostique en détectant des pathogènes)
  • FISH (quantification de proportions)
54
Q

Qu’est-ce que la réfraction?

A

Déviation d’un rayon lumineux passant d’un milieu à un autre

55
Q

Quel microscope donne une impression de pseudo-relief 3d?

A

Microscope à contraste d’interférence différentielle

56
Q

La préparation à l’état frais est adéquate pour observer quels éléments?

A
  • Morphologie
  • Motilité
  • Axe de division cellulaire (protozoaires)
  • Corps d’inclusion cytoplasmique (pour microorganismes de grande taille)
57
Q

Qu’est-ce que l’hybridation fluorescente in situ (FISH)?

A

Des sondes ADN fluorescentes sont mis dans l’échantillon. S’il la sonde reconnait une séquence, il y a hybridation et fluorescence

58
Q

Quel est le grossissement maximal en microscopie optique?

A

1000x

59
Q

Qu’est-ce que la préparation à l’état frais?

A

Aucune intervention, on ne fait que déposer l’échantillon sur la lame et on referme la lamelle

60
Q

Que devrait-on faire avec l’indice de réfraction du milieu afin de diminuer la limite de résolution?

A

L’augmenter

61
Q

Quelle est la relation entre la puissance d’une lentille et la distance focale?

A

Plus la distance focale est courte, meilleur l’agrandissement sera

62
Q

Quelle différence observe-t-on dans le condensateur du microscope à contraste d’interférence différentielle?

A

Il est composé d’un système de lentilles polarisantes contrôlées par informatique

63
Q

À quoi servent les billes témoins dans la technique de l’ombrage?

A

Comme elles ont une taille prédéfinie, on peut comparer avec les ombres et déterminer l’élévation

64
Q

Par quoi sont remplacés les condensateurs, objectifs et oculaires en microscopie électronique?

A

Par des électro-aimants et des lentilles magnétiques

65
Q

Quelles sont les 4 techniques de préparation en microscopie électronique?

A
  • Coloration négative
  • Ombrage
  • Cryodécapage
  • Immuno-localisation cellulaire
66
Q

Quel est le principe du microscope à contraste d’interférence différentielle?

A

Les milieux de réfractions différents modifient la polarisation de la lumière et produisent des intensités lumineuses différentes

67
Q

Vrai ou faux. Le microscope à contraste de phase est plus récent que le microscope à fond noir.

A

Vrai

68
Q

Quel est le grossissement maximal en microscopie électronique?

A

400 000x

69
Q

Quel type de lumière sert de lumière excitatrice en microscopie à fluorescence?

A

Une lumière UV

70
Q

Qu’est-ce que le contraste?

A

Capacité de distinguer une structure de son environnement

71
Q

À quoi sert l’immuno-localisation cellulaire?

A

À localiser une protéine dans une cellule

72
Q

Vrai ou faux. Toute la fluorescence est détectée dans le microscope confocal à balayage laser.

A

Faux, la seule fluorescence détectée est celle du p;an au foyer

73
Q

Que devrait-on faire avec l’angle du cône de lumière entrant dans l’objectif afin de diminuer la limite de résolution?

A

On devrait rapprocher l’angle de 90 degrés

74
Q

Quelle limite est imposée sur le changement de l’angle du cône de lumière?

A

Une limite imposée par le fabriquant (on ne peut pas le moduler comme on veut)

75
Q

Comment peut-on qualifier la limite de résolution du microscope électronique à transmission comparée à celle du microscope électronique à balayage?

A

À transmission = très petite

À balayage = un peu plus grande

76
Q

Entre le microscope à contraste de phase et le microscope à contraste d’interférence différentielle, quel produit un halo de diffraction?

A

Contraste de phase

77
Q

Nommer quelques applications du microscope confocal à balayage laser.

A
  • Détection ou localisation d’une structure dans une cellule/tissu
  • Développement d’un biofilm en fonction du temps
  • Quantification et position de cellules vivantes et mortes
78
Q

Que peut-on ajouter dans le microscope à contraste de phase pour améliorer l’image?

A

Des filtres colorés

79
Q

Quelle étape supplémentaire est nécéssaire à la coloration en microscopie à fond clair?

A

Une fixation de l’organisme

80
Q

Où sont situés les anneaux de phase dans le microscope à contraste de phase?

A

Dans le condensateur et l’objectif

81
Q

Dans quels 2 domaines le microscope à force atomique peut-il servir?

A
  • Nanotechnologies

- Biomatériaux

82
Q

À quoi servent les fluorochromes vitaux et comment fonctionnent-ils?

A

Servent à distinguer les cellules vivantes des cellules mortes. Il y a énumération différentielle par un logiciel d’analyse d’image

83
Q

Quel type de microscope permet de faire des observations en milieu aqueux?

A

Microscope à balayage de sonde

84
Q

Quelle substance peut être ajoutée sur la lame de verre pour augmenter l’indice de réfraction du milieu?

A

De l’huile à immersion

85
Q

En quel matériel doit être fait l’objectif du microscope à fluorescence et pourquoi?

A

En quartz, pour pouvoir laisser passer les rayons UV

86
Q

Qu’est-ce que l’ouverture numérique?

A

n sin(angle)

87
Q

Le microscope confocal à balayage laser fait partie de quel type de groupe de microscopes?

A

Photonique

88
Q

De quoi est composé le microscope à fond clair et quel est le rôle de chaque partie?

A
  • Condensateur: concentre les faisceaux lumineux vers la lame
  • Objectif: 1er agrandissement
  • Oculaire: 2e agrandissement
89
Q

En quoi consiste la coloration négative?

A

On vaporise de l’acide phosphotungstique qui ne pénètre pas dans l’échantillon et est électron-dense. Les creux sont donc sombres et les protubérances claires.

90
Q

Quels sont les 2 types de microscopes électroniques?

A
  • Microscope à transmission

- Microscope à balayage

91
Q

Qu’est-ce que la cryo-électromicroscopie?

A

Technique de congélation rapide par éthane et azote liquide, entraîne une vitrification de l’eau et l’intégrité des structures est conservée sous vide

92
Q

À quel microscope ressemble le microscope à fond noir (vu de l’extérieur)?

A

Microscope à fond clair

93
Q

Selon quels plans le laser du microscope confocal à balayage laser peut-il être balayé?

A
  • Horizontal
  • Vertical
  • Temporel
94
Q

Quelles sont limites du microscope électronique (3)?

A
  • Les électrons voyagent dans le vide
  • Les électrons sont non-pénétrants
  • Le matériel vivant est non électron-dense

MCB-1908 (11 decks)

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