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microbiologie > Examen de lab > Flashcards

Examen de lab Flashcards

1
Q

À quoi sert l’ensemencement par épuisement?

A

obtenir des colonies pures distinctes, une souche pure

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Q

Vrai ou faux? l’ensemencement par épuisement donne autant de colonies différentes que de microorganismes différents

A

vrai

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3
Q

On épuise un inoculum en faisant des étalements sous forme de stries. Quelle technique?

A

ensemencement par épuisement

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4
Q

S’il y a l’absence de zone d’inhibition après la méthode de diffusion sur gélose, ca veut dire quoi?

A

que l’agent antimicrobien n’est pas efficace contre la bactérie

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5
Q

dans la méthode de diffusion sur gélose, que permet de déterminer le diamètre de la zone d’hinibition?

A

si la bactérie est résistance ou sensible à l’agent antimicrobien

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6
Q

dans la diffusion sur gélose, plus la zone d’ihnibition est grande, plus l’agent antimicrobien est..

A

efficace

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7
Q

pour la combinaison de deux agents antimicrobiens, deux zone d’inhibition qui se chevauchent=…

A

la combinaison est synergique (somme+ élevée que effet individuel)

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8
Q

pour la combinaison de deux agents antimicrobiens, deux zone d’inhibition distinctes=…

A

effet indifférent (additif)

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9
Q

on mesure le __ d’une zone d’hinibition

A

diamètre

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10
Q

Quelles sont les étapes de la coloration Gram?

A

1) Coloration par le violet de cristal
2)Mordançage au Lugol(iode)
3)Décoloration(alcool)
4)Recoloration(à la safranine ou fuchsine)

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11
Q

explique la coloration simple

A

un seul colorant (bleu de méthyle en général) colore toutes les bactéries de manière NON SPÉCIFIQUE et nous renseigne sur la TAILLE et la FORME (+ mode de regroupement)

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12
Q

explique la coloration différentielle (coloration de Gram)

A

Utilise plusieurs réactifs qui réagissent avec certaines structures et permettent de différencier les bactéries en groupes (apporte des éléments d’identification supplémentaires)

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13
Q

Qu’est-ce qui est préparé avant de faire une coloration?

A

un frottis bactérien

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14
Q

explique la coloration négative

A

-permet de colorer le fond de la lame avec un agent de coloration.
-permet de distinguer TAILLE et la FORME (+ mode de regroupement, arrangement)
-nécessite un colorant acide chargé négativement (encre de Chine ou nigrosine), qui sera repoussé par la surface négative des cellules bactérienne

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15
Q

différence entre CMI et CMB (concentrations)

A

CMI: qt d’agent antimicrobien qui diminue d’au moins 80% la croissance par rapport au témoin
CMB: qt maximale inhibitrice. élimine au moins 99.9% des bactéries

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16
Q

À quoi servent les microdilutions sur une plaque de 96 puits

A
  • À Trouver si la combinaison d’agent antimicrobiens est synergie, additif (indifférente) ou antagoniste en calculant l’indice d’inhibition fractionnaire(ICIF)
    -Aussi, déterminer la CMI
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17
Q

Quel est le principe général d’identification bactérienne par des galeries API?

A

ensemble de techniques biochimiques pour identifier une bactérie
-on inocule des suspensions bactérienne dans des microtubules contenant des substrats déshydratés. Après l’incubation, on observe le changement de couleur (ajoute parfois réactifs). Nous permet de trv un profil numérique pour identifier bactérie dans logiciel.

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18
Q

revoit différentes formes et regroupements de bactéries

A

**forme: cocci, bacille ou spiralés
**regroupement:
cocci: , diplocoque, streptocoque, staphylocoque
bacille: simple, double, streptobacille
spiralés:
vibrion
spirille
spirochète

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19
Q

Utilité de la galerie API 20-E et API Staph?

A

API 20-E: identifier les Enterobacteriacea (ex: e.coli)

API Staph: identifier staphylococcus, micrococcus ou Kocuria

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20
Q

précaution a prendre au lab?

A

-TJRS TRAVAILLER DANS ZONE STÉRILE
-sarrau obligatoire en tt temps
-obbjet personnel dans casier
-cheveux longs attachés
-bijou non couvert par sarrau interdits (bagues, montres)
-vêtements recouverts par le sarrau
-revêtements tête interdits sauf voile en coton
-chaussures non glissantes bout fermé
- lunettes obligatoires et lentilles non recommandées
-masque porté si risque d’infection par muqueuses
-gants qd danger cutané
-éviter porter les doigts aux orifices du visage, pipetage a la bouche interdit
-avertir prof en cas d’accident
-STÉRILISER MATÉRIEL AU FLAMBAGE (attention, pas flamber alcool après, juste avant)
-tt mettre dans sacs oranges sauf papier du lavage main
-laver les mains
-laver la table a l’eau de javel a la fin
-parfois couvercle renversé pour éviter condensation de l’eau
-s’assurer d’avoir des colonies fraiches pour les test enzymatiques
-pas faire le test oxydase sur des milieu avec de glucose ou des colorants (MacConkey, EMB… )

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21
Q

techniques utilisées pour la mesure de la croissance bactérienne?

A

ceux dans le cahier de lab:
-dénombrement des colonies
-mesure de la biomasse bactérienne (TURBIDITÉ ou DO).
* ceux des ndc en plus au cas ou*
-mesure de la masse
-dénombrement de cellules
-NPP
-mesure de l’activité métabolique

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22
Q

explique dénombrement de colonies

A

on dilue une culture bactérienne en faisant des dilutions en série, puis on ensemence sur des boites de pétri et finalement on compte les colonies (pr boîte entre 30 et 300). une colonie=une bactérie

23
Q

explique mesure de la biomasse bactérienne (TURBIDITÉ ou DO)

A

échantillon de culture bactérienne transférée dans spectrophotomètre dans lequel l’absorption de lumière (600nm) est observée. dépend de taille forme et densité des cellules. + de cellules, + absorption élevée - transmittance

24
Q

Vrai ou Faux? L’échantillon doit être dilué pour les deux méthodes de mesure de croissance suivantes: turbidimétrie et dénombrement de colonies

A

vrai

25
Q

Caractéristiques du milieu TSA

A

-milieu général, ni selectif, ni différentiel
-toutes les bactéries (aérobie ET anaérobie) peuvent se développer

26
Q

Caractéristiques du milieu MacConkey

A

-milieu SÉLECTIF (inhibe gram + par sel biliaire et cristal violet) ET DIFFÉRENTIEL (lactose)
- groupe pouvant s’y multiplier: GRAM - (exemple: E. coli, enterobacter, pseudomonas)

27
Q

Caractéristiques du milieu MSA (mannitol-sel)

A

-milieu SÉLECTIF et DIFFÉRENTIEL
-permet la croissance des germes halotolérants (ex: staphylococcus et Micrococcus)

28
Q

Caractéristiques du milieu sang

A

-milieu DIFFÉRENTIEL (selon type d’hémolyse: hémolyse complète zone claire=Beta, hémolyse incomplète, vert=alpha, absence d’hémolyse=gamma)
-les streptocoques s’y développent bien

29
Q

Caractéristiques du milieu EMB (éosine bleu de méthyl)

A

SÉLECTIF (bleu de méthylène inhibe gram +) et DIFFÉRENTIEL(lactose)
-si lactose +, le milieu devient acide et l’éosine fait changer la couleur au violet
-permet identification de gram-

30
Q

voir p 11 pour étapes de l’ensemencement par épuisement

A
31
Q

test catalase utilisé pour différencier ___

A

utilisé pour différencier les grams + (entre-eux)
ex: staphylococcus +, streptococcus -
-si formation de bulles de gaz, positif

32
Q

comment on peut savoir que le test est positif avec le test catalase

A

-si formation de bulles de gaz, positif

33
Q

test oxydase pour quelles bactéries

A

pour bactéries aérobie cytochrome C
-permet identification des bacilles grams -.Par exemple Pseudomonas (ox +) et Enterobacteriacea (ox -)

34
Q

explique test oxydase

A

**met en évidence l’enzyme phénylène diamine oxydase. si +, donne violet
** place solution de tétra… sur papier filtre, puis étale bactéries avec cure dent

35
Q

quel bactérie le test coagulase permet de mettre en évidence

A

staphylococcus aureus
il l’a distingue des autres staphylocoques

36
Q

explique le test coagulase

A

on émulsifie des bactéries dans une goute de plasma, puis si coagulation=+, si pas de coagulation, -

37
Q

a quoi servent les tests IMVIC?
(indole-rouge de méthyle-vogues-prokauer-citrate)

A

identifier les gram -, différencier les membres de la famille des enterobacter

38
Q

explique le test indole (fait parti d’IMVIC)

A

-utilisé pour différencier les enterobacteriacea
- détermine capacité à convertir le tryptophane en indole
-ajoute reactif Kovac
-zone rouge à la surface=test positif

39
Q

test MR permet de déterminer quoi? différencier quoi?

A

déterminer capacité a fermenter glucose et prod. acide

E. coli et enterobacter aerogenes

40
Q

pour le test MR, quelle bactérie garde un ph acide, et laquelle provoque augmentation de ph

A

E.coli garde acide
E. aerogenes monte ph

41
Q

Vrai ou Faux? le même bouillon est utilisé pour les test MR et VP, mais on ajoute un réactif différent pr chaque

A

vrai

42
Q

que permet le test VP

A

de déterminer la capacité de bactéries a produire des produits non-acides qui résultent de métabolisme glucidiques

43
Q

les tests catalase, oxydase, coagulase et IMViC sont des tests____

A

biochimiques

44
Q

objectif des test biochimiques?

A

comparer les activités métaboliques de certaines bactéries, différencier entre elles des espèces du même gram

45
Q

comment on fait le test catalase

A

goutte de H2O2 sur lame, étale bactéries avec cure-dent

46
Q

a quoi ressemble un resultat positif au test indole

A

zone rouge

47
Q

quels 2 test on fait pour MRVP?

A

rouge de méthyl (MR)
Test VP=ajout de VPA (15 gouttes) et VPB (5 gouttes)
positif=rouge
négatif=jaune

48
Q

que permet le test de citrate

A

de différencier les organisme par rapport à si ils peuvent fermenter le citrate

49
Q

comment on fait le test citrate?

A

on inocule en zig zag une gélose citrate avec une colonie de 24h (PAS par épuisement). Utiliser une gélose non inoculée comme témoin

50
Q

comment on sait qu’un test citrate est positif ou négatif?

A

positif: bleu
négatif: reste vert

51
Q

Quel bouillon est utilisé pour mettre en évidence la fermentation des sucres (oxydatif ou fermentation)?

A

le bouillon rouge de phénol

52
Q

différence entre métabolisme oxydatif et fermentation

A

métabolisme oxydatif=aérobie, produit PEU d’acidité
fermentation=anaérobie, BCP d’acidité

53
Q

Par quel résultat on met en évidence la fermentation des sucres?

A

changement de couleur du rouge au jaune = fermentation.
Donc
jaune=positif(fermentation=oui)
rouge=négatif (PAS fermentation)
(on peut voir du gaz)
(dans les autres tests, c’est souvent le rouge=positif et jaune=négatif, mais ici, contraire)

microbiologie (5 decks)

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