Enzimi Pelleg Flashcards
6 classi
Ossidoreduttasi
Transferasi
Idrolasi
Liasi
Isomerasi
Ligasi
Km nell equazione di Michaelis Menten
Concentrazione substrato necessaria affinché la reazione proceda ad una velocità di 50%Vmax
Fattori che influenzano la concentrazione enzimatica
Temperatura
Ph
Concentrazione substrati
Inibitori o attivatori presenti
Enzimi di secrezione sono presenti normalmente nel siero?
No
Diminuzioni enzimatiche nel siero sono legate a malattie genetiche ?
Si
Isoenzimi
Catalizzano le stesse reazioni ma hanno una catena aa diversa
Gli isoenzimi hanno una diversa regolazione, diversa cinetica di reazione è diversa distribuzione tissutale?
Si
Quanti e quali sono gli isoenzimi della LDH
5 isomeri indicati con i numeri dopo LDH
Forma H e forma M
Formano tetrameri
Forme di LDH
LDH1 4 monomeri di H1 si trova nel cuore e nei reni
LDH2 3 monomeri di H2 e 1 M eritrociti rene cuore cervello
LDH4 polmone e muscolo scheletrico
LDH 5 muscolo scheletrico e fegato
Creation chinasi ha varie isoforme ma quante combinazioni di dimeri possibili?
3
UNITA di attività enzimatica
Rappresenta la quantità di enzima che in 1 min trasforma una micro mole di substrato
Misurazione della velocità della reazioni le due tipologie
Continua e discontinua
La misurazione della velocità di reazione discontinua osserva solo la fase finale e iniziale ?
Si
I gruppi prostetici e gli attivatori metallici possono coadiuvare gli enzimi ?
Si
I due metodi per il dosaggio enzimatico
Spettrofotometrico e colorimetrico
Metodo spettrofotometrico per il dosaggio dei cofattori: a quale lunghezza d’onda assorbe maggiormente la forma ridotta del cofattore
340 nm
Dove si trova la CK
Muscolo striato cervello e t miocardico
La CK si trova nei reni e nel sangue?
No
CK è indice di danno miocardico ?
Si
CK1
BB
CK2
MB
CK3
MM
CK Mt
Mitocondriale
Macro CK1
CK1 combinata con immunoglobuline
Macro CK2
Mitocondriale oligomerizzata
Macro CK1 può interferire nel dosaggio delle CK?
Si
Intervalli di riferimento CK
34/46-145/171 Donna e uomo
Metodi misurazione CK
Spettrofotometria di NADP
Bioluminescenza (valuta luce in base a ATP)
CK aumenta per eccellenza nel…
Danno tessuto muscolare
Disordini neuromuscolari subclinici possono far aumentare CK?
Si
Le miopatie neurogene possono far aumentare CK?
No
Infarto del miocardio può far aumentare CK?
Si
Radmomiolisi acuta da lesione da schiacciamento può far aumentare CK?
Si
Mio siti e miopatie infiammatorie possono far aumentare CK?
Si
Aumenti di CK fisiologici
Interventi chirurgici
Neonato
Ipotiroidismo
Farmaci statine
Quali enzimi aumentano a seguito di un danno epatoduodenale
Transaminasi
Quali enzimi aumentano a seguito di colestasi (ostruzione dotti biliari)
GGT gamma glutamiltrasferasi
ALT alaninatrasferasi anche detta…
Glutammato piruvato transaminasi
AST aspartato transaminasi anche detta…
GOT glutammato ossalacetato transaminasi
Quale è la transaminasi con concentrazione massima maggiore ?
ALT 59U/L uomo 41 U/L femmina contro
AST 34 U/L
Attenzione eccezione neonati in cui AST è 70 U/L e in condizioni di danno epatico grave
In condizioni di danno epatico aumentano le transaminasi, quale ha un aumento maggiore in condizioni molto gravi?
AST
AST/ALT>1 indica
Danno epatico grave
GOT/GPT>1 indica
Danno epatico grave
Reazione catalizzata da ALT/GPT
Alanina+alfachetoglutatato->piruvato+glutammato
La quantità di NADH ossidato è direttamente proporzionale all’azione della ALT/GPT?
Si
Perché il piruvato prodotto nella reazione della ALT/GPT viene trasformato in lattato dalla LDH con ossidazione di NADH. Per questo la quantità di NADH ossidato è proporzionale alla concentrazione di piruvato prodotto che è proporzionale alla attività della ALP/GPT
Reazione della AST/GOT
Aspartato+alfachetoglutarato->ossalacetato+glutammato
Ossalacetato si decompone in co2 e piruvato
Come si valuta L attività della AST/GOT
Si misura la concentrazione di piruvato e quindi del NADH (derivante dall ossalacetato che è prodotto della reazione della AST/GOT)
Si misura il malato prodotto a partire dal ossalacetato dalla malato deidrogenasi sempre ossidando NADH
Lettura spettrofotometrica in 340 nm
ALP fosfatasi alcalina viene liberata dal fegato in risposta a..
Ostruzione dotti
Colestasi
Azione ALP fosfatasi alcalina
Idrolizza substrati Fosforilati liberando acido fosforico
Situazioni in cui c’è aumento di ALP fosfatasi alcalina
Danno al fegato
Riarrangiamento osseo (osteoblasti)
Per distingue tra un aumento di ALP del fegato e ALP ossea andiamo a dosare GGT, perché?
Quando ritroviamo un aumento di ALP epatico si ritrova anche un aumento di GGT
Come si distingue tra aumento di ALT epatico e ALT osseo?
Misurando GGT se aumenta anche questo allora è epatica
Fosfatasi acida ACP da quale cellula deriva
Osteoclasti
Se c’è un riarrangiamneto osseo a seguito di un trauma (o di metastasi) quale/i enzimi aumenta(no)
Le fosfatasi ossee ALP e ACP
ACP fosfatasi acida (osteoclasti) può indicare un danno di origine prostatico?
Si
ACP provenienti dalla prostata sono individuate tramite…
Tartrato che le inibisce
Un tumore prostatico con metastasi ossee presenterà un aumento di…
Forme tartrato resistenti di ALP e ACP
ALP e ACP lavorano allo stesso ph?
No
ALP ph=10
ACP ph=5
Tra le fosfatasi quella acida è la più concentrata?
No
ALP 33/43-98/115 U/mL differenza uomo donna
ACP 1,5-4,5 U/L
Nelle malattie del fegato e delle ossa aumenta ALP?
Vero
ALP lavora a ph=10
Vero
ACP lavora a ph=10
No ph=5
Spiegare L utilizzo di nitrofenolo in un metodo colorimetrico per le fosfatasi
Il metodo colorimetrico che prevede di usare il nitrofenolo per produrre una colorazione gialla in presenta di fosfatasi acida cioè di ph=acido e colore rosso in presenza di ph=basico con fosfatasi alcalina
È L enzima fondamentale per il metabolismo del glutatione (e detossificazione xenobiotici)
GGT gamma glutammiltransferasi
Concentrazione di 68U/L M e 40U/L F che enzima è?
GGT
Aumento di GGT si da diagnosi di disturbi epatici e biliari ma anche muscolari?
No solo epatici e biliari
Quali enzimi del pancreas si vanno a dosare più spesso?
Amilasi e lipasi (prima lipasi)
Funzione lipasi epatica
Idrolizza trigliceridi
Metodo tritimetrico si usa per misurare le amilasi o le lipasi?
Lipasi
Le due diverse forme della amilasi
Salivare S2
Pancreatica P2
È più concentrata la amilasi salivare di quella pancreatica
No
0,1 contro 51 U/L
Per separare la amilasi salivare dalla pancreatic si usa..
Separazione elettroforetica
P3 nella pancreatine acuta
Conferma di malattia associata a amilasi pancreatica
Le amilasi digeriscono i legami glucidici alfa-1,4?
Vero
Azione della LDH
Trasferisce un gruppo idrogeno che catalizza L ossidazione dell L lattato a piruvato con mediazione del NAD+
La LDH è un tetramero?
Vero con catene di due forme M e H che si combinano in 5 isoforme diverse
1) LDH1 LDH2. 2) LDH3,4,5
a)Miocardio reni emazie
b) fegato e muscolo striato
Abbina numeri alle lettere
1 a
2 b
Il dosaggio di LDH avviene con misurazione ossidazione del NADH a 440nm?
No 340nm
Aumento di LDH sopra la norma indica…
Possibile tumore sangue o anemie
HPLC cromatografia liquida ad alta permormanza è utile per valutare le varie isoforme di LDH?
Si secondo rapporto di massa/carica
Quale è la forma prevalente di LDH nel siero ?
LDH2
Nell anossia epatica aumenta LDH5 maggiormente mentre nell’ infarto miocardico LDH1,2,3 vero?
Si
Un aumento della CK si può riscontrare anche in donne portatrici della sindrome di Duchenne ?
Vero
Enzimi epatici di interesse
transaminasi
fosfatasi
GGT
Isoforme e isoenzimi differenze e somiglianze
Differenza di base: isoforme derivano dallo stesso gene, isoenzimi da geni diversi
Somiglianze legate al rapporto con le altre isoforme/isoenzimi: catalizzano le stesse reazioni, diversità di regolazione e velocità di reazione
Enzimi plasmatici e non plasmatici
P: Coagulazione e colinesterasi sierica
Non: ubiquitari o organo specifici
Per poter rilevare determinati enzimi contenuti in organelli citoplasmatici possono servire anche 24/48 ore
Vero es mitocondri infarto miocardico
Misurazione indiretta
Non misuro la concentrazione ma L indice di attività (U)
UNITA di attività enzimatica (U)
Quantità di enzima necessaria a trasformare 1 micromole di substrato in prodotto in 1 min a ph e T standard
In biochimica su predilige il metodo di studio dell attività enzimatica di tipo discontinuo?
Si sì prende il punto iniziale e finale
In biochimica clinica si predilige il metodo di studio dell attività enzimatica di tipo continuo?
No è più difficile
Indice di colestasi, che tipo di danno indica
Danno vie biliari
Transaminasi cosa sono
Enzimi che trasferiscono gruppi amminici tra aa e alfachetoacidi
ALT si trova nel citosol
Vero
AST dove si localizza
Si trova nel citosol e nei mitocondri
Macro-AST
AST legata alle immunoglobuline
AST mitocondriale alto compare in lesioni epatiche
Vero
ACP fosfatasi acida indica un danno ad un organo specifico diverso da quelli di ALP, quale
Prostata
Il tartrato inibisce la fosfatasi acida o alcalina?
Acida
GGT funzione normale
Trasferire gruppi glutamil importanti per il metabolismo del glutatione e detossificazione farmaci
Con p nitrofenolo il ph basico ha un picco di assorbanza di 400 nm e il ph acido di 310 nm?
Vero 400 è rosso e 310 è giallo
Le amilasi S2 e P2 sono isoenzimi quindi…
Sono sintetizzate a partire da geni diversi
Svolgono la stessa funzione con caratteristiche diverse
Funzione amilasi
Rompere legame glucidici alfa 1-4
Le subunita H delle LDH si trovano principalmente in un organo quale?
Cuore
H=heart
Le subunità M delle LDH si trovano soprattuto a livello
Muscolare
M=muscolo
Le LDH 1 sono espresse a livello cardiaco e contengono 4 subunita H
Vero
Le LDH 5 contengono tutte subunità H e sono espresse a livello cardiaco
Falso contengono subunita M e sono espresse nel muscolo
Le LDH 2,3,4 sono forme intermedie delle LDH 1 (tutto H) e 5 (tutto M)
Vero
I valori normali di LDH
125 200 U/L
Reazione LDH
Piruvato in lattato con cofattori NADH/NAD+
CK2 necrosi tessuto cardiaco specifico
Vero
Paziente con infarto appena arrivato avrà CK1 e 2 alte e solo dopo 18 ore avrà un secondo picco quali sono le due frazioni?
La prima è la frazione citosolica la seconda quella mitocondriale
Ipotiroidismo avrà una diminuzione della CK
Falso avrà un aumento
