ELISA y citometría de flujo

Question 1

Sistema inmune innato

Answer 1

rápido e inespecífico → fagos

Question 2

Sistema inmune adaptativo

Answer 2

lento y específico → respuesta celular y humoral

Question 3

Linfocito B

Answer 3

• Reconocimiento del antígeno
• Activación de linfocitos B por linfocitos T CD4
• Cx. B prolifera → cx. plasmática
• Cx. plasmática produce anticuerpo (Ig)

Question 4

Función ELISA (clínica)

Answer 4

• patógenos
• medición de componentes de la sangre

Question 5

Epítopo

Answer 5

Región del antígeno que puede ser reconocida por un anticuerpo

Antigenos tienen diferentes epitopes con diferentes formas

Question 6

¿Qué es monoclonal y policlonal?

Answer 6

• monoclonal: anticuerpo viene de 1 celula (reconocen 1 epitope)
• policlonales: anticuerpo viene de 2 o más células (reconcen más epitopes)

Question 7

¿Qué reconoce una ELISA y qué tipo de ab utiliza?

ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas

Answer 7

• reconocer antígeno
• anticuerpos clonados a partir de un mismo tipo de célula (monoclonales)

Question 8

Tipos de ELISA

Answer 8

• directo
• indirecto
• sandwich (directo/indirecto)

Question 9

ELISA directo pasos

Answer 9

• 1 ag (inmovilizado en placa)
• Se agrega 1 ab primario unido a una enzima

LAVADO

• Si unió ag con ag → al agregar sustrato la enzima reacciona

Question 10

ELISA indirecto

Answer 10

• 1 ag (inmobilizado en una placa)
• ab primario se une al ag
• ab secundario se une al ab primario (contien la enzima)

LAVADO
* Si el ag estaba → se unió ab1 → ab2
* Al agregar sustrato la enzima reacciona

el que hicimos en lab

Question 11

ELISA sandwich directo

Answer 11

• 1 ab de captura (inmovilizado en placa)
• 1 ag de interés
• ab primario se une a ag

Question 12

ELISA sándwich indirecto

Answer 12

• 1 ab de captura (inmovilizado en placa)
• 1 ag de interés
• ab primario se une al ag
• ab secundario se une con ab primaria (tiene la enzima)

Total de 3 anticuerpos

Question 13

¿Qué es la citometría de flujo?

Answer 13

• se ven poblaciones, propiedades y etapa de diferenciación celular
• cuantitativo
• reconocimiento de CD

Question 14

Para la citometría de flujo, ¿en qué medio necesitan estar las células?

Answer 14

medio líquido (buffer de fosfatos) → cx. se alinean en fila india

Question 15

¿Qué prueba se utilizaría para la cuantificación de Lin CD 4 en pacientes con VIH?

Answer 15

Citometría de flujo

Question 16

¿Qué identifica el láser de la citrometría de flujo?

Answer 16

• tamaño
• complejidad
• granularidad
• proteínas que expresan (marcadores)
• detecta cuántos anticuerpos se pegaron

Question 17

Tipo de prueba que se debe de usar si el target es una célula y el objetivo es identificar

Answer 17

Citrometría de flujo

Question 18

Tipo de prueba que se debe de usar si el target es una molécula y el objetivo es cuantificar

Answer 18

ELISA

Ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas

Question 19

Tipo de prueba que se debe de usar si el target es una célula y el objetivo es cuantificar

Answer 19

Citometría de flujo

Question 20

Función de ELISA directo

Answer 20

Permite cuantificar ag → respuesta inmune

Question 21

Función de ELISA indirecto

Desventaja

Answer 21

Permite cuantificar ab

• cuantifican ag y concentracion del anticuerpo
• procedimiento largo
• alta sensibilidad

Desventaja: posible reacción cruzada

Question 22

Reacción cruzada

Answer 22

El ab diseñado se une a un ag similar

Question 23

Usos de ELISA sandwich

Answer 23

• análisis de muestras complejas
• alta sensibilidad y especificidad

Question 24

Prueba para:

Cuantificación de concentraciones de moléculas solubles

Answer 24

Citometría de flujo

Question 25

Prueba para:

Eficacia de tratamientos antitumorales e inmunosupresores

Answer 25

Citometría de flujo