Elisa - Competitivo

Question 1

Quais usam o ELISA competitivo?

Answer 1

T4L

Question 2

Qual o princípio do teste?

Answer 2

Após a mistura do anticorpo anti-T4 imobilizado na placa, conjugado enzima-antígeno e um soro contendo o antígeno nativo (T4 livre), resulta uma reação competitiva entre o antígeno nativo e o conjugado enzima-antígeno para se ligarem aos sítios de ligação do anticorpo.

Question 3

Qual o método do teste?

Answer 3

Enzimaimunoensaio

Imunoenzimático

Question 4

Características gerais

Answer 4

• Placa com Ac contra o hormônio;
  
  • Tem menor sensibilidade que o sistema avidina/biotina;
  • Conjugado é um hormônio (Ag) ligado a enzima peroxidase;
  • Não exibe alterações por consumo de biotina.

Question 5

Quais as etapas dos teste?

Answer 5

1. Pipetar as amostras e o conjugado (ag marcado com enzima);
   
   2. Incubar por 1h;
   3. Adicionar cromógeno A e B;
   4. Incubar 15 min;
   5. Solução stop.

Question 6

Qual a interpretação do teste?

Answer 6

A intensidade de cor amarela é inversamente proporcional a concentração de hormônio na amostra.

Muita cor:
Negativo

Pouca cor:
Positivo

Question 7

Quando não tem hormônio na amostra:

Answer 7

Conjugado (Ag com enzima) se liga ao Ac ant hormônio fixo na placa → quando entrar em contato com os substratos A/B gera a cor azul → solução stop → gera cor amarela.

Question 8

Quando tem hormônio na amostra:

Answer 8

Hormônio da amostra se liga com o Ac anti hormônio fixo na placa → Ag marcado com enzima não se liga muito → ao entrar em contato com os substratos não tem muita enzima para realizar a reação → gera pouca/nenhuma cor.

Question 9

Interferentes?

Answer 9

• Uso de hormônios tireoidianos
• condições que alteram os níveis das proteínas transportadoras (em especial TBG) → gravidez ou uso de anticoncepcionais.
Pode também estar alterado pelo uso de drogas como betabloqueadores e amiodarona (que interferem no seu metabolismo periférico).

Question 10

Qual o significado clinico do teste?

Answer 10

Utilizada no diagnóstico de hipotireoidismo e hipertireoidismo primário, e na diferenciação com o hipotireoidismo secundário e terciário (hipotalâmico-hipofisário).