Duplicazione del DNA e Biotecnologie Flashcards
A cosa serve l’elicasi?
Serve a rompere i legami H presenti tra le due emieliche dei filamenti di DNA
Cosa serve per il sequenziamento del DNA (Sanger)?
-Dideossiribonucleotidi trifosfato marcati (DDNTP)
-Primer
-Deossiribonucleotidi trifosfato
-DNA polimerasi
Cosa serve nel processo della PCR?
Una DNA polimerasi batterica
Dimmi 4 situazioni in cui interviene la DNA ligasi?
Nei meccanismi di ricombinazione
Nell’unione dei frammenti di Okazaki
Nella sintesi del filamento corto di DNA
Unione di vettori plasmidici
Dimmi 4 cose sulla duplicazione del DNA
È semiconservativa
Entrambi i filamenti di DNA sono utilizzati come stampo
Il legame tra l’innesco a RNA e il relativo frammento di Okazaki è di tipo covalente
Da ogni origine si formano due forcelle
Chi scoprì la duplicazione del DNA?
Meselson e Stahl
Dimmi 4 cose sulla duplicazione del DNA
E’ semiconservativa
Avviene nella fase S del ciclo cellulare
Avviene in direzione 5’–>3’
E’ catalizzata da diversi enzimi, tra cui la DNA polimerasi
Quali sono gli enzimi della replicazione che necessitano di ATP?
Elicasi e ligasi
Quale reazione catalizza la DNA polimerasi?
Formazione di legami fosfodiesterici tra deossiribonucleotidi adiacenti
Qual è la differenza tra esonucleasi e endonucleasi?
Nucleasi=taglio di DNA
Esonucleasi=tagliano DNA partendo dall’estremità del filamento
Endonucleasi=possono tagliare il DNA da qualsiasi punto del filamento
Dimmi 3 cose sulla DNA polimerasi
Agisce solo in direzione 5’->3’
Aggiunge nucleotidi al carbonio 3’-OH
Per iniziare la sintesi necessita di un primer
Cos’è il primer?
E’ una breve sequenza di DNA che funge da innesco per la DNA polimerasi
Dimmi 3 cose sui plasmidi
Sono molecole circolari extra di DNA
Sono circolari
Grazie a essi, i batteri presentano resistenza agli antibiotici grazie al gene R
Cos’è un enzima di restrizione?
È una proteina che riconosce sequenze palindrome di DNA e applicano un taglio netto su quella specifica sequenza
Dimmi 2 cose sugli enzimi di restrizione
Il più conosciuto è l’EcoRI, che taglia il legame G/A
Riconoscono sequenze palindrome