diagnostiek Flashcards
principes virale diagnostiek shema
ppt4 dia 42
1) virus of virale componenten opsporen
-> viruskweek
-> antigeendetectie
-> moleculairbiologische technieken
=> directe benadering in diagnostiek van virale infectie
2) immuunrespons opsporen
-> virale serologie = bepaling antistoffen aangemaakt na virale infectie
=> indirecte benadering in diagnostiek van virale infectie
diagnostiek
- viruskweek
- lichtmicroscopie &/of EM
- moleculaire diagnostiek DNA/RNA
-> amplificatie: PCR
-> hybridisatie: LIPA
-> … - antigen bepalingen
-> ELISA
-> immunofluorescentie
-> …
celcultuur
groeiend virus in celcultuur aanleiding tot:
- cytopathogeen effect (CPE)
-> = degeneratieve cellulaire veranderingen die lichtmicroscopisch waarneembaar zijn
-> snel& traag afh virus
-> verschillende vormen
-> specifiek/ niet specifiek voor virus
- hemadsorptie
bottlenecks
- tijdrovend
- kost & arbeid
- lange tijd voor produceren resultaten
- lage gevoeligheid & lage specifiteit in grootste mate kwaliteit van staal afhankelijk
- lage commercilisatiegraad
- gevoelig bac & toxische stoffen in staal
- relevante kwaliteitscontrole noodzakelijk
- hoge expertiegraad noodzakelijk
- voor beperkt gamma medisch belangrijke virussen
compartimentalisatie PCR lab
ppt4 dia 48
immuunrespons opsporen
- hemagglutinatie (inhibitie) assay
- enzyme immunoassay
- immunofluo assay
- chemilumino immunoassay
- neutralisatie assay
- complement fixatie assay
IgM
- pentameer
- enkele dagen na begin symptomen tijdens acute inf
- piek : dag 7-10
- niet detecteerbaar m1-m2
- initieerd complement cascade
- aanwezige of recente infectie
- reactivatie/reinfectie: IgM respons +/-
- geen placentaire transfer mogelijk
IgG
- monomeer
- enkele dagen na IgM
- hogere piek dan IgM
- levenslang in lage hoeveelheid
- initieerd complement cascade
- significante stijging -> aanwezige/recente virale inf
- reactivatie/reinfectie: IgG aanwezig
- placentaire transfer mogelijk
interpretatie serologiche testen bottle necks
- vertraagd/ geen productie antistoffen pasgeborenen, ouderen, immuungecomprimeerden
- IgM persisteren gedurende maanden na prim. infectie & aanwezig tijdens reactivatie of latent virale infectie
- virus-specifieke IgG aanwezig zonder infectie!
-> recipienten immunoglobulines
-> recipienten bloedtransfusies
-> pasgeboren door transplacentair transfer - specifieke situaties
-> aantonen virus-specifieke antistoffen lumbaalvocht
-> pasgeborenen