Croissance Flashcards
Comment fonctionne la reproduction bactérienne ?
1 cellule mère = 2 cellule fille
(asexué)
ADN mere = ADN fille
Mécanisme de division cellulaire ?
- fission binaire transverse (scissiparité) + fréquent
- Bourgeonnement
- Fragmentation d’hyphe (gros -> plein petit)
Deux types de synthese de septum ?
transversale à l’axe longitudinal (bacille)
équateur (cocci)
Étapes formation du septum ?
- duplication chromosome
(si qqchose bloque duplication = pas de septum) - invagination membrane cytoplasmique
- croissance peptidoglycane dans l’invagination
- cloisonement des cytoplasme
- séparation des 2 cellule fille + terminaison synthese nouvelle paroi septum
Comment fonctionne l’approche moléculaire de la fission binaire ?
Proteine ParA et ParB
(partition/partage)
migre dans les pôle de la cellule et intéragit avec parS proche d’oriC-chromosome
que fait la proteine MreB
forme de spirale qui déplace les chromosomes + interagit avec parA parB sur OriC
cest quoi l’appareil mitotique procaryote ?
parA, parB et MreB
Comment se forme le septum ?
mutant FtsZ forme de longue cellule filamenteuse à température non permissive
= prot ftsZ forme anneau concentrique (échafaudage au sitre formation septum)
= invagination membrane
que veux dire les lettre dans mutant ftsZ ?
filament termo sensible
Comment la cellule localise le site ou va se faire le septum?
gène min (mini cell)
-> minCD inhibe assemble de ftsZ
c’est quoi l’aspect mathématique de la croissance bactérienne ?
2^n ou n= nb génération
= progression géométrique
Comment on calcul la population final (N) ?
N= No (initial) x 2^2
comment on calcul le nombre de génération?
n = 3,3 (log10 N - log10 No)
c’est quoi le temps des générations et le calcul ?
g= temps pour dédoubler population
g= (T2-T1)/N
= min ou heure/ génération
Le G sera grand petit en milieu pauvre vs riche ?
Pauvre = g élevé
Riche= g petit
c’est quoi le taux de croissance et le calcul?
k= constante de vitesse de croissance
k= 1/g ou n/(t2-t1)
génération/heures
sert à comparer les milieu
c’est quoi la courbe de croissance ?
- latence
- croissance exponentielle
- ralentissement
- stationnaire
- déclin
c’est quoi la phase de latence ?
activité physio élevé
-> s’adapte au milieu
-> n’augmente pas la pop
-> se termine quand commence division
-> duré variable
C’Est quoi la phase exponentielle ?
augmentation constant de la population
temps de génération constant et minimal
-> cell identique
-> métabolisme au max
-> pas de restriction des nutriments
-> courte duré
c’est quoi la phase stationnaire de croissance
ralentissement croissance
-> densité max = 5-15x10^9 cell/ml
-> population constante
-> élément nutritif sont en manque (rare)
-> déchet métabolique augmente = toxique (ex. acide lactique)
-> population heterogene
-> formation endospore
-> duré variable
c’est quoi la phase de déclin?
chute constante de la population
-> pu de division cellulaire
-> disparition élément nutritif
-> concentration maximal de dechet metabolique
-> duré variable
c’est quoi un chémostat ?
culture en vase non clos
volume fixe mais ajoute en permanence milieu frais et élimine milieu épuisé , controle pH, température… etx
que controlons nous avec la culture en continue ?
- débit
taux de dilution ajouté/retiré - tcontrole cellule en phase exponentielle
c’est quoi le taux de dilution?
vol ajouté/ vol total réacteur/ heure
si on a 100ml/h dans un réacteur de 1L , c’est quoi le taux de dilution?
0,1 h-1
que veux dire si taux de croissance = taux de dilution
optimal
Que veux dire si taux de croissance est plus grand que le taux de dilution?
condition limitante
Il y a une différence entre la culture in vitro vs in vivo?
oui.
vitro: g=30 min
vivo : g=11h
Comment on mesure la croissance bactérienne ?
- énumération
- quantification de la masse cellulaire de la population
- quantification de l’activité ou constituant cellulaire
Comment on fait l’énumération?
- avec la chambre de Petroff-Hausser
= compte dans un volume prédéterminer
ex. 25 carreaux de 1mm (à voir) - énumération électronique (cytométrie en flux)
- énumérisation en unité viable
- méthode turbidimétrique
- méthode moléculaire
Avantage de la chambre Petroff-Hausser ?
minimum équipement
Rapide
population 10^7 -10^8 / ml
Comment fonctionne l’énumération électronique
doit être mis avec des fluorochrome vitaux et fonctionne sur cell morte ou vivante
(FACS)
Avantage de l’énumération électronique ?
rapide
sensibilité est limité taille bactérie
doit avoir des témoin interne
permet détecter spore
permet détecter population hétérogene
(coute cher)
comment fonctionne l’énumération des unités viables?
dilution + étalement
-> 30-300 colonies/ pétri
unité = UFC
COLONIE ET NON CELLULE
avantage l’énumération des unités viables?
économique
permet espace et temps
doit être VIVANTE
population dilué
UFC = population totale
FAUX.
V\F: - de 1% espece son cultivable
VRai
comment fonctionne la méthode turbidimétrique ? avantage ?
les corps bactérien font du trouble = absorbe ou disperse la lumière = spectroscopie de masse
- rapide
-condition standarisé, même espece, même milieu.. - 10^7 - 10^8 UFC/ml .
- utilisé routine en labo
c’est quoi la courbe de référence pour la méthode turbidimétrique ?
courbe de référence/étalon DO/UFC
Comment fonctionne la méthode moléculaire ? avantage ? inconvénient ?
extrait ADN total + amplification
-> PCR = +++ nb copie
-> qPCR = quantification vs témoin interne nb copie/volume
Rapide
quantification des organismes non cultivable
quantification simultané de différent organisme
cher
spécificité de ce quon veut amplifier
spécificité des séquence = long pour la mise en point
comment on quantifie la masse cellulaire ?
détermine le poids sec
comment on détermine le poid sec ?
filtre + seche à 100-150 degré
1ul d’H2O = 1mg
10^9 cellules = 1mg
pourquoi le poids sec reste le même même pendant la phase létal ?
parce que le corps bactérien est toujours la
comment on choisit la méthode de mesure de croissance ?
rien universelle,
fréquent: UFC et turbidimétrique
si en croissance = moléculaire
