Cours 7 - INTRA Flashcards
Donne la définition complète et finale d’un Anticorps
Gros complexe glycoprotéique soluble de la superfamille des immunoglobulines
(structure tridimentionnelle particulière) produit par le système immunitaire
(lymphocytes B et en particulier plasmocytes) capable de reconnaître un court fragment (épitope) d’une molécule nommée antigène
- Est un antigène toute molécule (protéine, sucre, lipide, agent chimique) reconnu par le système
immunitaire (pas seulement les anticorps)
Un anticorps réagit de manière…
Les anticorps réagissent de manière SPÉCIFIQUE
* Ils ne reconnaissent qu’un petit fragment de l’antigène, ce court fragment se nomme épitope
* Par exemple sur une protéine ils peuvent ne reconnaître qu’un segment de 8-12 acides aminés
* Si on modifie un de ces acides aminés ou s’il en manque un, la reconnaissance risque d’être affectée
Les anticorps assurent plusieurs fonctions immunes différentes
Nommes-en
Agglutination, neutralisation, destruction de l’anticorps par des cellules, phagocytose, bris par
les molécules du complément
La clonalité des anticorps fait référence à quoi?
Aux cellules produisant ces anticorps.
Vrai ou faux: Chaque lymphocyte B produit plusieurs type d’anticorps d’une
spécificité unique.
Faux, il produit qu’un seul type d’anticorps d’une
spécificité unique. Il peut se cloner au besoin (se diviser en gardant ses
propriétés)
Décrit ce qu’est un mélange d’anticorps polyclonal
Plusieurs anticorps
différents reconnaissant donc plusieurs épitopes différents (plusieurs clones
de lymphocytes B produisant des anticorps différents)
- Ces épitopes peuvent provenir d’un seul antigène
- Ex.: vaccin composé d’une seule protéine
- Les épitopes reconnus peuvent provenir de plusieurs antigènes
- Ex.: un microorganisme
Ainsi, le serum A pourrait reconnaitre plus d’épitope que le Serum B
Décrit ce qu’est un anticorps monoclonal
- Les anticorps monoclonaux sont quant à eux une solution de plusieurs anticorps uniques (plusieurs fois le même anticorps); d’une spécificité unique
=» Un seul épitope d’un antigène est reconnu
*Des épitopes peuvent se chevaucher! Sur une série de 15 a-a, l’épitope #1 va de 5 à 11 et l’épitope #2 va de 9 à 15. Ainsi, si il y a une perte de l’a-a 10 par exemple, les 2 épitopes ne seront pas reconnus :(
Décrit le Changement conformationnel d’un antigen et son lien avec des Ac
Par exemple, une antigène est en confromation folded (Wt) et seulement un anticorps peut se lier à un site.
Lorsque cet antigen est en conformation unfolded, un total de trois anticorps (p.e.) peuvent venir se lier à des 3 épitopes. (De nouveau épitopes sont apparus!)
Pourquoi des AcMo sont intéressant en 2024?
A) * Stabilité et répétabilité
* L’épitope reconnu est toujours le même
* Peu importe qui utilise l’anticorps il aura toujours la même réaction
* Chaque mélange polyclonal est unique et varie d’un lot à l’autre
* Les réponses des individus aux antigènes sont différentes
B) * Source intarissable
* Avec un anticorps monoclonal, on peut produire indéfiniment de l’anticorps
* Avec un polyclonal (sérum d’un animal), une quantité définit du sérum est disponible
Décrit le Principe de création d’anticorps monoclonaux (AcMo)
La technique de production d’anticorps monoclonaux consiste à rendre
immortelle une cellule productrice d’anticorps (un lymphocyte B) en la
fusionnant (mélange de 2 cellules, de leur matériel génétique et cellulaire)
avec un partenaire de fusion soit un myélome (lymphocyte B cancéreux :
prolifération incontrôlé)
Quels sont les 2 types cellulaires impliqués dans la création d’anticorps monoclonaux (AcMo)
- Les lymphocytes B provenant d’un animal qu’on aura immunisé avec l’antigène contre
lequel on désire produire des AcMo
* Suite à l’immunisation répétée, l’animal aura beaucoup de ses lymphocytes B qui seront en prolifération suite au contact avec l’antigène - Le myélome, une cellule immortelle.
Décrit caractéristiques particulière des lymphocyte B et du myélome que l’on prends pour faire des AcMo
Pour le myélome on prends sa caractéristique de cellule immortelle, prolifération continue
*Lymphocyte B est une cellule mortelle de 5 à 7 jours)
Pour le lympocyte B on prends ses caractéristiques de Production de Ac et de l’enzyme HPRT
*Le myélome ne produit pas d’Ac et n’a pas la HPRT comme enzyme
DÉcrit les étapes pour former une AcMo
- Un animal est immunisé avec l’antigène d’intérêt
* Augmentation du nombre de lymphocytes B contre cet antigène - Les Lymphocytes sont prélevés (rate de l’animal)
- Fusion avec le myélome
* Utilisation d’un PEG particulier - Mise en culture
- Sélection à l’aide de l’aminoptérine
* Induit la voie de sauvegarde - Identification des anticorps d’intérêt
* Reconnaissance de l’antigène/épitope d’intérêt - Vérification de la clonalité des puits
Que fait l’Aminoptérine
- En présence d’aminoptérine, on bloque la synthèse de novo des acides nucléiques, la cellule doit utiliser la voie de sauvegarde
- Seules les cellules ayant l’enzyme HPRT peuvent utiliser cette voie (donc caractéristique des lymphocytes B)
Avec quel produit on peut faire la fusion entre le myélome et le lymphocyte B?
La fusion des cellules s’effectue en présence d’un type particulier de
polyéthylène glycol (PEG)
