Cours 6 - Régulation transcriptionnelle chez les eucaryotes Flashcards
Machinerie transcriptionnelle eucaryote est plus complexe que les procaryotes
Vrai
Transcription par Pol II est régulée par quoi?
Activateur et represseur
c’est quoi des activateurs / répresseur ?
Protéines lient ADN qui facilitent ou empêchent initiation transcription de gènes spécifiques en réponse à signaux appropriés
qu’est-ce qui complexifie la régulation de la transcription chez les eucaryotes ?
- Les nucléosomes et leurs modifications (doit trouver façon de décompacter)
- régulateurs et + grandes séquences régulatrices
(peut avoir 20 régulateur pour 1 gène)
- régulateurs et + grandes séquences régulatrices
c’est quoi la différence entre les séquences régulatrices bactérienne et des eucareyotes ?
Bactérie: séquence régulatrice et promoteur très proche
Eucaryote: il y en a plusieurs et peuvent être éloigné
Cest quoi un Enhancers ?
plusieurs sites activateurs regroupés en une seule unité
Quelle action à distance ffacilite les interactions entre protéine ?
Boucle ADN
Quelle problème engendre l’activation à distance
Activateur lié à enhancer: peut contrôler plusieurs gènes à sa portée, alors quil devrait en controler qu’un seul
= Requiert d’autres séquences régulatrices (isolateurs ou éléments frontières)
Ou sont les isolateurs et que font-il ?
-> Situés entre enhancers et promoteurs
-> Bloquent activation du promoteur induite par activateurs liés à enhancer quon ne veut pas
= Garantissent que activateurs ne fonctionnent pas aveuglément
qu’est-ce qui nuit à la Pol II?
nucléosome
Quel est l’organisme le + accessible à des combinaisons de dissection génétique et biochimique ?
Le levure
-> principale connaissance et étude vient des levures
Le Domaine de liaison à l’ADN (DLA) fait quoi?
protéine qui reconnait sequence en particulier (site de liaison)
C’est quoi Gal4 ?
Activateur qui active transcription gènes (GAL1) galactose chez S. cerevisiae
Il a 2 domaine: activation et et DLA
- un des premier à être connu
Chez la levure,que se passe-t-il en présence de galactose ?
Gal4 active transcription GAL1 +1000 fois (très fort)
GAL1 permet de métaboliser le galactose
Quelles sont les 2 expériences qui ont permis de découvrir le DLA ?
- Fragment de GLA4 sans son domaine d’activation = peut se lier, mais n’active pas
DLA = permet juste de cibler la région activatrice de la protéine sur le promoteur - place la région activatrice GLA4 sur un DLA LexA bactérien = active la transcription de Lacz
qu’est-ce que ca veut dire qu’un DLA bactérien (LexA) peut remplacer un DLA eucaryote (GAL4) ?
Pas différence fondamentale dans façon dont DLA lient ADN et reconnaissent leurs sites
DLA et domaine d’activation c’est la même chose.
Faux.
l’un sert à lier, l’autre à activer.
Grande majorité protéines régulatrices bactériennes utilisent quoi comme DLA ?
motif hélice-coude-hélice
À quoi servent les deux hélices dans le motif hélice-coude-hélice ?
1ère hélice = hélice de reconnaissance: s’insère dans grand sillon et reconnaît pb spécifiques
2ème hélice = crée contacts avec squelette ADN (sucre-phosphate)
Les régulateurs bactériens et eucaryotes lient sous quelle forme ?
Bactérie: dimère
Eucaryote: hétérodimères et parfois monomères
c’est quoi des protéines à homéodomaine ?
Classe de DLA de type hélice-coude-hélice (HCH)
ayant une séquence consensus: TAATNN
soit des activateurs ou répresseurs: fonction dictée par l’homéodomaine
Plusieurs protéines à homéodomaine lient ADN sous forme de dimères
c’est quoi le domaine en doigt à zinc
Le plus commun des DLA ayant 2 résidus cystéine + 2 résidus histidine (coordone le zinc) Initialement identifié chez TFIIIA
NECESSITE ZINC
= Stabilisent le domaine en interagissant avec une molécule de zinc Zn2+
Chaque doigts de Zinc est en contact avec combien de pb?
3
c’est quoi un activateur Sp1
3 structures en doigts de Zn consécutives
est-ce qu’il existe d’autres DLA qui utilisent le Zn ? (autre que doigts de Zinc)
Oui, en a sans histidine = ne stabilise pas Zn parreil et agit comme modif HCH
c’est quoi les récepteur glucocorticoïdes
c’est 8 cystéines pouvant lier 2 atomes de zinc
c’est quoi le motif fermeture à glissière de leucines ?
Motif qui combine des surfaces de dimérisation et de liaison à l’ADN dans même unité structurale
charge (+)
qu’est-ce qui permet au motif fermeture à glissière de leucines de faire de la dimérisation + capacité à lier ADN?
a des leucines très précisément séparé -> 4 leucines séparé par intervalle de 7 résidus
motif fermeture à glissière de leucines forme quoi?
Forment homo- ou hétéro-dimères
Comment fonctionne le motif fermeture à glissière de leucines ?
- segment s’insère dans le grand sillon
- Dimérisation induite par autre segment de cette hélice
- Forment homo- ou hétéro-dimères
Dans le motif fermeture à glissière de leucines, qu’est-ce qui rend son interface très hydrophobe ?
Arrangement particulier des leucines
Deux protéines avec le motif fermeture à glissière de leucines forment quel type de structure ?
de type ‘coiled-coil’ (surenroulement l’une autour de l’autre)
quelle protéine héterodimère font le motif fermeture àa glissière de leucines ?
CREB (symétrique)
AP-1 (asymétrique)
c’est quoi les quatre domaine de liaison de l’ADN ?
- Hélice-coude-hélice
- Doigts de Zinc (+ souvent/populaire )
- fermeture à glissière de leucines
- Hélice boucle hélice
c’est quoi les deux hélices dans hélice-boucle-hélice
- Hélice de reconnaissance ADN
- Hélice α plus courte
séparé par une boucle flexible
ayant séquence conservé boîte E
Hélice-boucle-hélice est très similaire à hélice-coude-hélice
Faux.
HBH ressemble beaucoup à la fermeture à glissière de leucines
-> Possède région basique essentielle à liaison
à ADN + région permettant dimérisation
lequel des facteurs de transcription contient TAF?
TFIID
les domaines d’activation ont une structure définie
Faux
Des fois forme une structure en hélice (probablement lorsque lien avec l’ADN)
Pourquoi ça fais du sens que les domaines d’activation n’ont pas de structure ?
vu que c’est une surface adhérente capable d’interagir avec plusieurs surface de protéine
La région activatrice GAL4 est acide ou basique ?
acide
Comment se nomme la régions riches activatrice riche en glutamine
SP1
Comment se nomme la région riches en proline
CTF1
qu’est-ce qui est spéciale avec les régions activatrices acides?
Sont fortes et fonctionnent dans tous organismes eucaryotes
les autres sont plus faibles et ne sont pas universelle
qu’est-ce qui recrutent la machinerie transcriptionnelle sur les gènes?
les activateurs