Cours 4 - Transcription Flashcards
En quoi la transcription est très semblable à la réplication ADN
Nécessitent enzymes synthétisent nouveau brin d’acides nucléiques
complémentaires au brin ‘matrice’
C’est quoi les 4 différences entre la transcription et la réplication ?
- Dans transcription: brin constitué de ribonucléotides (ARN)
- ARN polymérase: ne requiert pas d’amorce
- L’ARN ne reste pas apparié au brin matrice d’ADN : l’enzyme déplace la chaîne naissante
- Transcription: moins fidèle que la réplication: 1 erreur/ 10 000 nucléotides
Pourquoi la transcription se permet de faire plus d’erreur que la réplication?
Réplication doit assurer transmission fidèle du matériel génétique aux cellules filles et toute erreur devient permanente dans génome peut avoir conséquences désastreuses
V/F: ARN pol en a autant chez eucaryote que procaryote
c’est quoi leur différence ?
Faux
Procaryote en ont un
Eucarytote en ont 3
Pol I fait quoi
Transcrit précurseur ARNr
Pol II fait quoi
Code plupart des gènes (tous gènes codant des protéines)
Pol III fait quoi?
code ARNt et ARNr 5S
Vrai ou faux: Les polymérases eucaryotes et procaryote sont très similaire (sous-unité)
Vrai
C’est quoi un promoteur ?
Séquence ADN en amont du gène voulu qui fixe l’ARN polymérase et les facteurs d’initiation requis
C’est quoi les 3 étapes de l’initiation de la transcription
- Formation complexe fermé (ADN = double-brin)
2: Formation complexe ouvert (ADN = simple-brin)
3: Polymérase démarre transcription: détachement du promoteur
V/F: La transcription initial est efficace.
pourquoi vrai ou pourquoi faux ?
Faux.
Elle n’est pas efficace.
Font des petites séquences (10nucléotide)
Synthèse abortive (Qui ne parvient pas au terme de son développement.)
La ARN pol a besoin de quel cofacteur
Magnésium
c’est quelle phase si ARN pol fait + 10 nucléotide ?
Élongation
Rôle ARN pol ? (4)
- Déroule ADN devant elle
- Réassocie brins derrière complexe
- Dissocie chaine ARN de la matrice durant progression
- Corrige erreurs potentielles
L’ARN polymérase minimale, ça veut dire quoi ?
chez bactérie, minimum 5 sous-unité (2 alpha, 2 beta, 1 omega) (peut initier transcription n’importe où sur l’ADN in vitro)
V/f: L’ARN polymérase minimale peut initier transcription partout sur l’ADN (pas promoteur spécifique)
Vrai in vitro mais pas in vivo
Comment pouvons-nous rendre l’ARN pol minimale spécifique aux promoteurs ?
En ajoutant 6e facteur d’initiation: σ
c’est quoi holoenzyme de l’ARN polymérase chez les bactéries
ARN pol minimale (2 alpha, 2 beta, 1 omega) + σ
Chez E. coli c’est quoi lefacteur σ prédominant
σ70
Quel séquence consensus est reconnu par σ70
-10 et -35
Pourquoi dit-on que -10 et -35 est une séquence consensus ?
Parce que σ70 reconnait plusieurs séquence différente, mais -10 et -35 est la plus fréquente. De ce fait, c’est la séquence consensus.
C’est quoi les promoteurs forts (initiation transcription + élevé)?
Les séquences qui sont les plus proche du consensus
c’est quoi exactement la séquence consensus?
TTGACA (-35) et TATAAT (-10)
Quel élément de plus ont les prometteurs puissants
élément UP
c’est quoi un élément UP ?
augmente la liaison polymérase et permet interaction spécifique supplémentaire Enzyme/ADN (ARNr)
Que ce passes-t-il si certains promoteurs σ70: pas élément -35
ils ont un élément -10 + long (ex.galactose)
L’Élément discriminateur est placer ou?
en avant de -10
σ70 est divisé en combien de région?
4 régions
Les régions 2 et 4 de σ70 font quoi?
Reconnaissent -10 et -35
La région 4 de σ70 fait quoi?
porte 2 hélices formant motif hélice-coude-hélice (domaine liaison ADN)
Dans la région 4 de σ70, il y a 2 hélices. Elles font quoi?
1ère hélice: grand sillon ADN élément -35
2ème hélice: située en travers au dessus du sillon:
établit contacts avec squelette ADN
Élément -10 est reconnu par quel région de σ70 ?
région 2
La region 3 de σ70, elle fait quoi?
Reconnait élément -10 allongé lorsque présente
Élément ‘discriminateur’ (lorsque présent) est reconnu par quoi dans σ70?
région 1.2
l’Élément UP est reconnu par quoi?
Pas reconnu par une hélice σ mais par domaine C-terminal de sous-unité α de polymérase ( αCTD)
c’est quoi le pont flexible (pont protéique flexible) ?
Pont qui relie αCTD relié à αNTD
La transition en complexe ouvert implique des modifications de quel type ?
structurales dans l’ARN polymérase et le promoteur
(isomérique)
Le complexe fermé est-il réversible ?
Oui
Le passage du complexe fermer à ouvert est-il réversible ?
Non
Le passage du complexe fermer à ouvert nécessite quoi?
1.modification structurale de l’enzyme 2. séparation brins ADN
La séparation de l’ADN par le complexe expose le brin matrice et un brin sens. À quoi sert le brin sens ?
Rien
Quand c’es écrit -11 ou +11, les - ou + servent à quoi
Dire si avant ou après le gène
La modification structurale de la polymérase + σ70 de fermer à ouvert implique quel type de modification
Isomérisation (pas ATP utilisé)
ADN polymérase comporte combien de canaux ? et qu’est-ce qu’il font ?
1 Canal d’entrée des NTPs au centre actif
1 Canal de sortie de l’ARN
3 autres canaux permettent l’entrée et sortie de l’ADN
C’est quoi les deux changements structuraux saisissants observés dans l’ADN polymérase chez la bactérie
- fermeture machoire (double hélice maintenue fermement)
- Déplacement région N-terminale σ
- Dans complexe fermé: σ1.1 dans foyer catalytique
- Dans complexe ouvert: lorsque sépare ADN σ1.1 est expulsé (déplacé)
Dans les canaux de l’ADN polymérase, que ce passe-t-il avec le Brin sens
quitte le centre actif par le canal NT
Dans les canaux de l’ADN polymérase, que ce passe-t-il avec le Brin matrice ?
suit parcours passant par centre catalytique puis canal brin matrice (T)
ADN se sépare en quelle position et se referme en laquelle?
+3 et -11
V/f: ARN polymérase a besoin d’une amorce
Faux
c’est quoi le mécanisme d’action de la transcription?
1er ribonucléotide amené au site actif + maintenu stable sur la matrice
2e NTP présenté pour permettre à la polymérisation de se dérouler
après la synthèse abortive, c’est quoi les modes de déplacement (3) du site actif de l’enzyme sur matrice ADN?
Pas certain, mais 3 modèles expliquerait
1. excursion transitoire
2. Chenille
3. Compression *
c’est quoi le modèle d’ « excursion transitoire » :
Cycles translocation ARN polymérase avant/arrière
c’est quoi le modèle de compression
ADN en avant tiré et replié à l’intérieur de l’enzyme
ADN s’y accumule (boucles simple brin)
c’est quoi le modèle « inchworming »
Existerait élément flexible qui
Permet au module (site actif) de se déplacer vers l’avant en synthétisant un court transcrit avant de se
rétracter dans le corps de l’enzyme (promoteur)
Parmis les modèles du déplacement de la Pol sur l’ADN, laquelle est retenue?
Modèle de compression
La phase d’élongation commence quand ?
Lorsque Polymérase va se libérer du promoteur
Polymérase va se libérer du promoteur à parti de quand ?
lorsque polymérase fait plus de 10 nucléotide
Que ce passes-t-il avec l’ARN naissant ?
ne peut pas rester contenu dans région où il s’hybride à l’ADN donc commence à s’insérer dans le canal de sortie ARN
La libération du promoteur implique de briser quoi?
des interactions polymérase-promoteur et noyau de la polymérase-σ
Que fait le linker3/4 ?
mime ARN chargé négativement occupe le canal de sortie en attendant la phase d’élongation. après: sort.
Relie la région 3 et la région 4
À quoi sert σ dans la pol
Reconnaissance
éjection de la région 3/4: fait quoi?
Baisse force de liaison de σ à l’enzyme = σ se décroche complexe d’élongation
Quel processus fournit énergie requise pour la polymérase de: i) rompre interactions polymérase-promoteur et ii) libérer noyau de l’enzyme du facteur σ
L’empilement de l’ADN dans l’enzyme est inversé lors de la libération du promoteur = ADN est donc ré-enroulé
V/f: Les ARN polymérases bactériennes et eucaryotes sont très semblables
Vrai
V/f: Un cycle de transcription comprend 3 phases distinctes: initiation, élongation et
terminaison.
Vrai
V/f: Chez les eucaryotes, le complexe d’initiation de la transcription est constitué de plusieurs protéines (polymérases + FGTs)
Vrai
V/f: La queue CTD de la polymérase permet de transporter des protéines requises
à toutes les étapes de la transcription d’un gène
Vrai
V/f: Les polymérases Pol I et Pol III fonctionnent de manière similaire à Pol II mais transcrivent dès gènes qui leurs sont propres
Vrai
Coté énergie, la méthode compression permet de quoi?
entrepose+mobilise énergie durant l’initiation transcription