Cours 6 Flashcards
La région variable des Ac servent à quoi?
responsable de la reconnaissance de l’épitope; 2 sites de liaison (combinaison de la chaîne lourde et légère de chaque côté)
La région cste des Ac sert à quoi?
Permet aux anticorps d’être reconnu par diff cell
Vrai ou faux? Chaque antigène peut contenir plusieurs épitopes (Partie spécifique reconnu par un anticorps) reconnus par des anticorps différents
Vrai
En quoi l’Exposition multiple à l’antigène améliore la réponse en anticorps?
Augmentation de la quantité d’anticorps produite
Changement d’isotype
Augmentation de l’affinité des anticorps produits; Rép même si ya peu d’Ag
Si exposé au même Ag +ieurs fois, améliore et raffine rép
Comment on produit des anticorps polyclonaux?
- Synthèse d’antigènes: Pour augmenter immunogénicité: couplage à un haptène (grossir la taille pour être mieux visible pour les lymphocytes B)
- Production d’anticorps sur 12 semaines: Pour augmenter l’affinité des anticorps produits: répétitions des immunisations
- Caractérisation et purification d’antigènes polyclonaux: Évaluation in vitro de la spécificité et de l’affinité des anticorps; Prélève le sérum, isole les anticorps et les évalue
Comment on produit des Ac monoclonaux?
Immunisations répétées avec l’antigène désirée pour augmenter l’affinité et la quantité d’anticorps spécifique à l’antigène produits par la souris
Récolte de la rate de la souris; isole LB de la rate
Fusion des cellules de la rate avec des cellules myélomes (afin d’immortaliser les cellules productrices d’anticorps)
Sélection in vitro et expansion in vitro
Sélection des hybridomes produisant les anticorps désirés
Expansion en grande quantité in vitro (surnageant de culture) ou in vivo (liquide d’ascite)
Décrit les anticorps polyclonaux
Contient plusieurs anticorps reconnaissant plusieurs épitopes sur un même antigène
Possibilité de détecter un antigène par la reconnaissance de plusieurs épitopes
Possiblité de réaction croisée : reconnaissance d’épitopes partagés par plusieurs antigènes
Peu cher à produire
Production rapide
Génère une grande quantité d’anticorps non-spécifiques
Reconnaît plusieurs épitopes sur un seul antigène
Variabilité inter-production; peut être problématique si on veut des résultats reproductibles
Décrit les anticorps monoclonaux
Reconnait un seul épitope sur un antigène
Épitope à reconnaitre doit être accessible et préservé
Hautement spécifique: un seul épitope, moins de risque de réaction croisée
Dispendieux à produire
Hybridome requiert du temps à produire
Génère une grande quantité d’anticorps spécifique
Reconnaît un seul épitope sur un antigène
On peut les congeler et ils sécréteront les mêmes anticorps
Hybridome est une source constante et renouvelable de l’anticorps
Vrai ou faux? On peut muter les anticorps (partie cste surtout) pour qu’ils puissent être reconnus par diff sp
Vrai
Pourquoi utiliser des anticorps monoclonaux en immunothérapie pour cancers?
But: Enlever les freins du système immunitaire qui empêchent les lymphocytes T d’aller attaquer efficacement les cellules tumorales
Anticorps bloquent les récepteurs inhibiteurs pour que les LT puissent tuer les cell tumorales
Aussi dév des anticorps qui seront des agonistes qui activent les LT
Qu’est-ce qu’un anticorps secondaire?
anticorps reconnaissant des épitopes sur régions constantes des anticorps d’une autre espèce
La méthode de détection ELISA sert à quoi?
détection d’un antigène (protéine, motif, etc.) dans un format liquide (surnageant cellule, sérum, plasma, liquide céphalorachidien, lysat cellule, lysat organe) en format de plaque
La méthode de détection d’Immunobuvardage de type western sert à quoi?
détection d’un antigène (protéine, motif, etc.) dans un lysat de cellules, d’organes ou dans un liquide (surnageant cellule, sérum, plasma, liquide céphalorachidien) en gel polyacrylamide- tient compte de taille de la protéine
La méthode de détection d’Immunoprécipitation sert à quoi?
Isolement d’une protéine à partir d’une solution liquide (lysat cellule, lysat organe, etc) puis précipitation du complexe anticorps protéine pour l’identifier
La méthode de détection de Cytométrie en flux sert à quoi?
détection d’un antigène à l’aide d’un anticorps fluorescent sur/dans cellules en suspension
