Cours # 6

Question 1

L’activité enzymatique est influencé par deux groupements de choses. nomme les

Answer 1

1. des propriétés spécifiques à l’enzyme
2. des effets non spécifique de l’enzyme

Question 2

Donne 3 exemples de propriétés spécifique à l’enzyme qui peuvent affecter son activité

Answer 2

1. concentration du substrat
2. activateur
3. inhibiteur

Question 3

Donne 5 exemples d’effet non spécifique à l’enzyme qui peuvent affecter son activité

Answer 3

1. des sels et tampons
2. pH
3. température
4. autre protéine
5. force ionique

Question 4

Généralement, dans un organisme, toutes les conditions sont arrangé d’une façon pour permettre à l’enzyme de faire quoi?

Answer 4

Performer à son meilleur (Activité maximale)

Question 5

Dessine l’équation de michealis-menten

Answer 5

V = Vmax* [S]/ (km + [S])

Question 6

Écrit l’équation d’une enzyme avec son substrat

Answer 6

k1 k2
E + S ⇄ ES –> P + E
k-1

Question 7

Dans l’équation d’une enzyme avec son substrat, donne un autre nom plus scientifique à la constante K2

Answer 7

Kcat

Question 8

Que signifie le Kcat

Answer 8

elle représente la constante de vitesse qui est égale au nombre de molécules de substrat transformées par chaque molécule d’enzyme par seconde (turnover number)

Question 9

Est ce que Vmax est une constante?

Answer 9

Non car elle dépend de la concentration d’enzyme

Question 10

Le Km signifie quoi?

Answer 10

l’affinité du substrat pour l’enzyme

Question 11

Complète la phrase:
Le Km est la concentration en substrat nécessaire pour …

Answer 11

concentration en substrat nécessaire pour saturer la moitié des sites catalytiques de l’enzyme)

Question 12

Explique la courbe du graphique quand on du substrat en XS

Answer 12

yalla shed 7elak

Question 13

Km élevé siginifie quoi?

Answer 13

une grande concentration de
substrat est nécessaire pour atteindre la moitié de la vitesse maximale de réaction et donc, que l’enzyme possède une affinité relativement faible pour le substrat

Question 14

Pourquoi est-il important que la vitesse de réaction soit linéaire pendant la période d’incubation utilisée?

Answer 14

pour détecter convenablement la formation du produit de la réaction SLIDE 10 SI C PAS GOOD

Question 15

Quels sont les trois types d’inhibiteurs?

Answer 15

compétitifs, incompétitifs et non-compétitifs

Question 16

Qu’est ce qu’un inhibiteur compétitif?

Answer 16

Les inhibiteurs compétitifs sont en compétition avec le substrat pour fixer le site actif de l’enzyme. Ils empêchent ainsi la liaison entre le substrat et l’enzyme

Question 17

Dans un inhibiteur compétitif, décrit la valeur de Km et du Vmax

Answer 17

Toutefois, si le substrat se fixe à une enzyme, la réaction se fait normalement, aussi vite qu’en absence
d’inhibiteur. Par conséquent, le Vmax n’est pas
modifié par la présence de l’inhibiteur. Le Km, quant à lui, augmente

Question 18

Qu’est ce qu’un inhibiteur incompétitif?

Answer 18

Les inhibiteurs incompétitifs se lient au complexe Enzyme-Substrat (ES) mais pas à l’enzyme libre (E).

Question 19

Dans un inhibiteur incompétitif, décrit la valeur de Km et du Vmax

Answer 19

Dans ce cas ils diminuent la vitesse de la réaction puisque les complexes ES sont inhibés. Toutefois, en bloquant la réaction, ils augmentent l’affinité
apparente du substrat pour l’enzyme. Ainsi, le Vmax ainsi que le Km diminuent.

Question 20

Qu’est ce qu’un inhibiteur non-compétitif?

Answer 20

Les inhibiteurs non-compétitifs se lient à l’enzyme libre ainsi qu’au complexe EnzymeSubstrat.

Question 21

Dans un inhibiteur non-compétitif, décrit la valeur de Km et du Vmax

Answer 21

la fixation entre le substrat et l’enzyme n’est pas affectée par la présence de l’inhibiteur. Toutefois, la vitesse de la réaction est diminuée. Ainsi, le Km reste le même et le Vmax diminue.

Question 22

Quel est la conséquence d’une accumulation de produit dans une réaction enzymatique?

Answer 22

la vitesse de la réaction peut être compromise par la réaction de retour (retro-inhibition)

Question 23

Que pouvons nous faire pour empêcher la réaction inverse (5)

Answer 23

1. Mesurer la réaction enzymatique pour une courte durée afin de minimiser l’accumulation du produit
2. L’utilisation de hautes concentrations de substrat
3. Utiliser des pH non physiologiques (basiques si le produit de la réaction est un proton) pour enlever le proton et déplacer la réaction dans la direction de la formation du produit
4. L’utilisation de méthodes très sensibles pour détecter le produit afin de minimiser sa concentration
5. l’inhibition par le substrat à des hautes concentrations peut aussi être due à la formation d’interactions non appropriées au site actif et qui mènent à l’inhibition de l’activité enzymatique

Question 24

est ce que les enzymes fonctionnent tous au maximum au pH physiologique ?

Answer 24

Non, la valeur maximale de l’activité de certaines enzymes peut être très loin du pH
physiologique

Question 25

Explique une utilité qui peut être exploité dans un tampon dans une réaction enzymatique?

Answer 25

Certains tampons peuvent agir comme inhibiteurs.

Question 26

Donne un exemple où un tampon agi comme un inhibiteur

Answer 26

le phosphate et certaines tampons anioniques, possédant des charges multiples tel que le citrate, compétitionnent avec des substrats possédant des charges négatives pour lier le site actif

Question 27

Donne une relation quantitative entre la température et la concentration

Answer 27

La vitesse d’une réaction augmente en règle
générale d ’ un facteur 2 pour chaque
augmentation de 10°C

Question 28

Plus la période d’incubation est courte, plus la
température apparente de l ’ activité
maximale peut être élevée. Pourquoi?

Answer 28

Car il y a moins de temps pour que l’enzyme se dénature

Question 29

Quel est la température physiologique?

Answer 29

37°C

Question 30

Quels sont les deux façons de mesurer l’activité enzymatique?

Answer 30

• des méthodes discontinues (flot arrêté)
• des méthodes continues

Question 31

Explique très généralement la méthode discontinue

Answer 31

L’enzyme est incubé avec ses substrats pendant une certaine période de temps et la réaction est ensuite arrêtée

Question 32

Pour vérifier si la réaction est linéaire qu’est il essentiel de faire?

Answer 32

Il est essentiel de faire plusieurs incubations à des temps différents afin de vérifier si la réaction est linéaire

Question 33

Comment on provoque la discontinuité dans la méthode discontinue?

Answer 33

la réaction est arrêtée par une méthode qui provoque la dénaturation instantanée de l’enzyme

Question 34

donne une méthode pour arrêter une réaction enzymatique

Answer 34

• la précipitation par acide trichloracétique- perchlorique
• dénaturation thermique de l’enzyme
• on peut également utiliser le SDS pour dénaturer l’enzyme
• des méthodes non dénaturantes qui
  inactivent l’enzyme

Question 35

Donne trois méthodes pour détecter les produits d’une réaction enzymatique

Answer 35

• convertir le produit directement ou indirectement en un autre produit qui lui est plus facile à détecter
• spectrophotométrie
• fluorométrie

Question 36

la détection du produit final dépend de
la production de ….

Answer 36

d’un chromatophore ou fluorophore important et qui est facile à détecter

Question 37

Explique la détection directe du produit

Answer 37

un des produits de la réaction enzymatique absorbe la
lumière

Question 38

Explique la détection indirecte du produit

Answer 38

ajoute une enzyme qui utilise le produit de la réaction
pour former du NADH par couplage avec une autre réaction