Cours # 3

Question 1

Qu’elle est l’équation de la force électrique sur un ion q et un champ électrique E?

Answer 1

F electrique = qE

Question 2

La migration électrophorétique de l’ion à travers la solution est opposée par quelle force?

Answer 2

force de friction

Question 3

Qu’elle est la formule de la force de friction?

Answer 3

F friction = Vf

Question 4

Que se passe-t-il au protéine à leur point isoélectrique dans un gel?

Answer 4

une mobilité électrophorétique nulle car q = 0

Question 5

Qu’elle est la méthode d’électrophorèse la plus couramment utilisée?

Answer 5

l’électrophorèse en zones

Question 6

Explique l’électrophorèse en zones

Answer 6

l’échantillon est contraint de se déplacer en zone

Question 7

Qu’elles sont les avantages de l’électrophorèse en zone?

Answer 7

1) on élimine largement l’agitation provoquée par la convection
2) requiert une quantité faible de matériel permettant ainsi la migration des composantes en bandes discrètes.

Question 8

Qu’elles sont les deux types de gel les plus utilisé?

Answer 8

agarose et polyacrylamide

Question 9

qu’elle est la différence entre le gel de filtration et l’electrophorèse?

Answer 9

-les gels d’électrophorèse retardent les molécules de taille plus grande (ce qui est l’inverse de la filtration par gel)

Question 10

Que signifie PAGE

Answer 10

PolyAcrylamide Gel Electrophoresis

Question 11

Qu’elles sont les étapes dans l’utilisation d’un gel?

Answer 11

1) on coule le gel entre deux vitres et on laisse polymériser
2) On dépose les échantillons dans le gel
3) On coule le tampon pour recouvrir les plaques contenant le gel (pH - 9 pour que toutes les charges soit négatives)
4) On fait passer un courant de 100 à 200 V (ils vont migrer vers l’anode + selon leur charge/masse ration)

Question 12

Que pouvons-nous faire au gel pour améliorer la finess et la résolution?

Answer 12

l’utilisation d’un gel plus long

Question 13

Nomme un moyen populaire d’améliorer la résolution?

Answer 13

l’utilisation 2 gel dans des tampons différents

Question 14

Qu’elles sont les deux gels utilisés pour améliorer la résolution?

Answer 14

Gel de concentration (stacking gel)
Gel de séparation (running gel)

Question 15

le tampon du gel de séparation et du gel de concentration diffère en général de combien de pH?

Answer 15

2– Le pH du tampon de gel de concentration a un pH de 2 unités plus petit que le tampon du gel de séparation

Question 16

Explique en détail l’utilisation du stacking gel?

Answer 16

le stacking gel est fait d’un tampon de 6.8 de pH. Donc, la glycine à une charge neutre donc elle est immobile dans le gel. Des ions CL- vont pousser les protéines contre la glycine. Cela assure que les protéines sont tus au même niveau. Puis, quand il touche le gel de séparation, le pH de 9 permet à la glycine de regagner sa charge négative ce qui permet la migration des protéines au même niveau

Question 17

Qu’elle est le but derrière la réduction de la taille des bandes?

Answer 17

la réduction dans les bandes macromoléculaires en rentrant dans le gel de séparation augmente de façon très significative la résolution

Question 18

Qu’est ce qu’un détergent d’un point de vue protéique?

Answer 18

Substance capable de dénaturer une protéine

Question 19

Nomme un détergent? Donne le nom complet et non juste l’acronyme

Answer 19

SDS = Sodium Dodecyl Sulfate

Question 20

Qu’elle est le ratio de liaison détergent-protéine?

Answer 20

1 molécule de détergent pour 2 résidus d’acides aminés

Question 21

Nomme deux fonctions du SDS

Answer 21

1. premet la dénaturation linaire
2. permet une même charge pour les protéines

Question 22

Le gel SDS-PAGE possède deux grands avantages par rapport à l’électrophorèse ordinaire. Lesquels?

Answer 22

1. Permet la dissolution des agrégats de protéine
2. La mobilité électrophorétique possède une relation directe avec le poids moléculaire

Question 23

Qu’elles sont les trois approche de détection utilisé?

Answer 23

1. bleu de coomassie
2. nitrate d’argent
3. autoradiographie si les protéines sont marquées avec des isotopes