Cours 4 - Centrifugation

Question 1

Pour qu’une molécule subit une sédimentation, qu’elle relation doit-elle avoir avec la solution?

Answer 1

Densité de la molécule doit être plus gros que la densité du liquide

Question 2

Qu’elle est le but de la centrifugation?

Answer 2

séparation des constituants lorsqu’ils sont émis à des hautes vitesses.

Question 3

Qu’elles sont les trois types de centrifugeuses?

Answer 3

1. Centrifuge de table (Eppendorf de 1.5 mL)
2. Centrifuge à haute vitesse (40,000 g pour des volumes allant jusqu’à 50 ou 100 mL)
3. Ultracentrifugeuses (1 000 000g)

Question 4

est ce que les macromolécules se sédiments sans centrifugation?

Answer 4

non, ils ont besoin d’une grande vitesse.

Question 5

Pourquoi les macromolécules ne se sédiments pas avec une centrifugeuse normale?

Answer 5

Puisque l’agitation thermique est suffisante à les garder dispersées de façon homogène en solution

Question 6

L’ultracentrifugeuse peut attendre une force gravitationnelle de combien de g?

Answer 6

1 000 000 X g

Question 7

Qu’est ce que l’ultracentrifugeuse a prouvé dans le domaine des macromolécules?

Answer 7

démontrer que les protéines sont des macromolécules de composition homogène et qu’un grand nombre de protéines sont composées de sous-unités.

Question 8

La vitesses de sédimentation d’une particule dépend de quoi?

Answer 8

De sa masse

Question 9

Qu’elle est la formule de la force de sédimentation?

Answer 9

Fsedimentation = Force de centrifugation - force de flottaison

Question 10

Comment attaint-on la phase stationnaire?

Answer 10

Quand les forces sont contre balancer (Fsedimentation = Force de friction)

Question 11

A quoi sert l’ultracentrifugation analytique?

Answer 11

Mesure la masse des macromolécules et le coefficient de sédimentation

Question 12

Qu’est ce que le volume partiel spécifique?

Answer 12

le changement en volume lorsque 1g sec de particules est dissous dans une soluté à volume infini

Question 13

1 Svedburgs c’est quoi?

Answer 13

10^-13 secondes

Question 14

On peut déterminer la masse d’une solution à l’aide de quoi?

Answer 14

Du coefficient de sédimentation et du coefficient de friction

Question 15

Les masses obtenu par centrifugation son exprimer par quelle unité de mesure?

Answer 15

Svedburgs

Question 16

Dans une centrifugation différentiel, la séparation des particules se fait selon quoi?

Answer 16

leur taille

Question 17

Une centrifugation différentielle se fait en une étape ou plusieurs étapes? Explique

Answer 17

elle se fait en plusieurs
en augmentant l’accélération (g)

Question 18

on utilise la centrifugation préparative quand on a quoi??

Answer 18

une volume significatif à centrifuger

Question 19

Dans une centrifugation préparative, que pouvons-nous utiliser pour augmenter la résolution?

Answer 19

une solution inerte comme le saccharose et le chlorure de césium. Ces solutions causent un gradient de densité ce qui augmente la résolution

Question 20

Explique la différence entre la centrifugation en zone et en gradient de densité

Answer 20

centrifugation en zone sépare la substance selon la masse alors que la centrifugation en gradient de densité par la densité des solutés.

Question 21

Explique la centrifugation en zone

Answer 21

la solution de macromolécules est déposée sous forme
de couche en haut d’un gradient de densité préparé au préalable. De cette manière, les macromolécules vont être séparés selon leur coefficient de sédimentation. On récolte les macromolécules à l’aide d’une aiguille

Question 22

Dans une centrifugation par gradient de densité, une particule de densité spécifique sera entraînée vers le fond pendant la centrifugation jusqu’au point où …

Answer 22

la densité de la solution environnante est identique à celle de la particule (point isopycnique).

Question 23

Les échantillons ont mixer avec quoi dans une centrifugation par gradient de densité

Answer 23

CsCl et Cs2SO4

Question 24

Explique comment on fait pour faire une chromatographie par gradient de densité:

Answer 24

L’échantillon est dissout dans une solution concentrée d’une substance dense qui diffuse relativement vite comme les sels CsCl et Cs2SO4, et qui est subie à des hautes vitesses de rotation

Le fort champ centrifuge génère un gradient important de sel dans lequel les composantes de l’échantillon se retrouvent en zone de densités égales à celle de la
solution de sel;