Cours 4 - croissance et exigences nutritionnelles Flashcards
Définit la croissance des micro-organismes
Définie par un accroissement du nombre de cellules ou de la masse cellulaire totale
** chez la plupart des procaryotes, la croissance d’une cellule se poursuit jusqu’à sa division en deux nouvelles cellules par fission binaire
La courbe de croissance d’une population bactérienne peut être représentée par log 10 de quoi en fonction de quoi ?
Log 10 de la concentration bactérienne (bactérie / ml) en fonction du temps d’incubation (heures)
Nomme les 4 phases de croissance bactérienne
Latence
Exponentielle
Stationnaire
Mortalité
-Définit la phase de latence
-La durée de la phase varie en fonction de ?
Phase d’adaptation dans laquelle il n’y aucune division cellulaire
Varie en fonction de l’âge des bactéries et de l’origine (composition et température du milieu )
Définit la phase de croissance exponentielle/ nomme des caractéristiques (5)
Accélération de la croissance des bactéries ainsi que de la division cellulaire
Les micro-organismes se développent et se divisent à la vitesse maximale
La population est uniforme
La phase de croissance exponentielle est de courte durée
Relation entre la concentration des nutriments et la croissance
Définit la phase stationnaire et nomme 2 causes
Le nombre total de micro-organismes viables reste contant (équilibre entre division et mort cellulaire)
Causes: limitation des nutriments et accumulation de déchets toxiques, acidité
Définit la phase de mortalité et nomme 3 causes
Arrêt de la division cellulaire
Le nombre de bactéries viables ou cultivables diminue de façon constante en fonction du temps
Causes: dommages irréparables conduisent à une perte de viabilité
Réponse génétique déclenchée (mort cellulaire programmée)
Formation de cellules viables non cultivables
Nomme 2 méthodes directes de la mesure de la croissance des micro-organismes et 2 indirectes
Directes:
-décompte total des micro-organismes
- décompte des unités viables
Indirectes:
-mesure de l’activité
-mesure de la masse cellulaire
Explique le méthode directe de décompte total des micro-organismes ainsi que ses avantages et inconvénients
Compteur de cellules Coulter et Cytomètre de flux
Chambre de comptage observée au microscope: hémocytomètre (levures et cellules mammifères)/ cellule de Petroff-Hausser (bactéries)
Avantages: facile à utiliser, rapide et peu coûteux/ informations sur la taille/ morphologie des micro-organismes
Inconvénients: densité microbienne élevée ( petit volume) / décompte des cellules mortes et vivantes (ils existent des kits pour les différencier)
Quel est le calcul pour connaître la densité du matériel de départ avec la méthode de l’hémocytomètre
10 000 x cellules comptées X facteur de dilution = cellules/ ml
Quel est le calcul pour connaître la densité du matériel de départ avec la méthode de cellule de Petroff-Hausser
100 000 x cellules comptées X facteur de dilution = cellules / ml
Décrit la méthode de décompte des unités viables ainsi que ses avantages et inconvénients
Méthode de dilutions en milieu liquide et d’étalement sur gélose/ méthode des filtres de cellulose
Avantages: les colonies proviennent seulement des cellules vivantes capables de se reproduire
Inconvénients: amas de cellules = 1 colonie / bcp de manipulations et attente de 24h pour les résultats
Définit la méthode des filtres de cellulose
L’échantillon est passé dans un filtre de cellulose dont la porosité retient les micro-organismes et le filtre est mis sur une gelose qui est incubée 24h
En quoi consiste la méthode indirecte de mesure de l’activité
En mesurant la consommation de substrats ( C, N2, O2, ou d’un facteur spécifique de croissance), la concentration des constituants cellulaires (ATP, FAD ou FMN, ADN, protéines) ou l’excrétion de certains produits (Co2 ou NH3), il est possible d’évaluer la concentration microbienne d’un échantillon
En quoi consiste la méthode indirecte de mesure de la masse cellulaire
Poids sec
Récolte des micro-organismes (filtration sur membrane), lavage et dessiccation, pesée (toutes les bactéries), valeurs expérimentées en g/L, valeurs exprimées en cellules/ml
Définit/ décrit la méthode de turbidimétrie
Évaluation de la concentration cellulaire à l’aide de sa densité optique ( absorption lumineuse ) à une certaine longueur d’onde
Dans une certaine limite, la densité optique d’une suspension microbienne est directement proportionnelle à sa concentration cellulaire
Pour évaluer la concentration microbienne d’une suspension inconnue, on doit préalablement établir à l’aide d’un spectrophotomètre une courbe de référence pour des concentrations microbiennes connues
Nomme les 3 expressions mathématiques de la croissance bactérienne et décrit les
Temps de génération ou de doublement (g)
Intervalle de temps entre 2 divisons cellulaires successives
g= temps/ nbre de générations
Taux de croissance (k)
Nombre de générations par unité de temps (inverse du temps de génération )
K= nombre de divisions/ temps
Nombre de générations (n)
n= Log( nombre de cellules au temps t ) - Log(nombre initial de cellule de la population)/ log2
Qu’est ce que la culture continue et nomme les 2 types
Apport de nutriments, élimination des déchets, la phase de croissance exponentielle est maintenue sur une longue période, concentration constante de la biomasse
2 types: chémostat (apport constant de nutriments à la même vitesse que le milieu est éliminé) / turbidostat (vitesse de dilution déterminée par la densité)
Chémostat
-Par quoi est contrôlée la densité de population
- par quoi est contrôlé le taux de croissance
Densité de population: contrôlée par la concentration en substrat limitant de le réservoir de milieu neuf
Taux de croissance: contrôlé par le débit du milieu neuf
Qu’est ce qu’un milieu de culture
Préparations utilisés pour réaliser la croissance, le transport ou la conservation des micro-organismes
-Les compositions varient à l’infini
-Doivent respecter les exigences nutritives des micro-organismes
-La composition précise d’un milieu de culture dépend de l’espèce cultiver
Nomme les 2 possibilités de milieu de culture et décrit les
Liquides: bouillons de culture
Solides: même composition que les bouillons, sauf qu’on ajoute de l’agar a 1-2%
Nomme les classements de milieux de culture
Classés selon la composition (Synthétique ou empirique)
Classés selon l’usage (sélectif ou différentiel)
Défini un milieu de culture synthétique ou définis/ un milieu empirique ou complexe
Synthétiques ou définis: composition chimique entièrement connue. Milieux pauvres permettent la croissance de seulement certains microorganismes
Empiriques ou complexes: composition chimique indéterminée. Milieux riches permettent la croissance d’une grande variété de microorganismes
Qu’est ce qu’un milieu enrichi
Milieux complexes enrichis de certains additifs
Favorisent la croissance de certains micro-organismes exigeants tel que les hétérotrophes fastidieux