Cours 3 - Examen 2 Flashcards
Qu’est-ce que la réplication de l’ADN?
le processus de doublement du contenu en ADN d’une cellule-mère en mitose afin de créer 2 cellules filles identiques
Quand ce produit la réplication (quelle phase)?
Dans la phase S de la mitose
Pourquoi dit-on que la réplication s’effectue selon un mode semi-conservatif?
Chaque brin de la molécule sert de matrice à la synthèse d’un brin complémentaire, pour 2 molécules d’ADN. Chaque nouvelle fille conserve la moitié du bagage de la cellule mère. Les autres brins sont néoformés
Quelle est la vitesse de réplication de l’ADN chez les procaryotes vs les eucaryotes?
Pro = 20-30 minutes
Euc = 1h
Pourquoi la vitesse de réplication des eucaryotes est 2x moins longue que celle des procaryotes?
L’ADN eucaryotes est linéaire, beaucoup plus long et empaqueté. De ce fait, il y a un stock d’ADN polymérise beaucoup plus important avec plusieurs origines de réplication. Il faut donc des étapes additionnelles que les procaryotes à cause des modifications de structure de la chromatine.
Qu’est-ce que l’ADN polymérase?
enzymes qui font un nouveau brin d’ADN à partir d’un brin matrice. Elles catalysent la formation de liaison phosphodiester entre l’extrémité 5’P du nucléotide incorporé et l’extrémité 3’OH de la chaîne en croissance
Qu’est-ce que tous les ADN polymérase ont besoin pour fonctionner?
Une amorce et une matrice
Quelles est la différence entre une amorce d’ADN et une amorce d’ARN?
ADN: réparation ou recombinaison
ARN: réplication
Quelle est la principale enzyme impliquée dans la réplication du chromosome bactérien?
L’ADN polymérase III: elle intervient dans l’élongation du brin avancé et dans la synthèse des fragments d’Okazaki
Apprendre tableau polymérase procaryote
Apprendre tableau polymérase chez les eucaryotes
De quoi dépend la correction de copie et par quoi est-elle fait?
de l’activité 3’→5’ exonucléase de l’ADN polymérase III
Où se produit la correction de copies?
À l’endroit où l’enzyme se sépare de son site d’activité 5’→ 3’ polymérase
Comment on sait quand il doit y avoir une correction de copies?
Quand un nucléotide désapparié s’introduit dans le domaine de polymérisation, la synthèse d’ADN arrête afin de permettre l’excision du mauvais nucléotide et de le remplacer par le bon nucléotide
À quoi sert la technique PCR?
À amplifier, de façon exponentielle, un fragment d’ADN, car la quantité double à chaque cycle
Combien de temps dure un cycle de PCR?
1 cycle = 3 étapes = 2-3h pour faire 30 cycles
Quelles sont les étapes de la technique PCR?
- Dénaturation
- Hybridation des amorces
- Élongation
En quoi consiste la dénaturation lorsqu’il est question de PCR?
Chauffer le mélange à 94˚C pendant 2 minutes pour séparer les deux brins d’ADN
En quoi consiste l’hybridation des amorces lorsqu’il est question de PCR?
La température est descendu (en fonction des amorces) pendant 2 minutes. Alors, les amorces s’attachent à leur séquence complémentaire
En quoi consiste l’élongation lorsqu’il est question de PCR?
Le fragement d’ADN est amplifiée, car l’enzyme a une excellente activité au dessus de 70˚C
Quelle est la différence entre la PCR classique et la RT-PCR?
La PCR classique se produit à un endroit précis (une mutation) afin d’amplifier cet endroit (pour trouver anomalie/génotype/clonage/empreinte génétique) tandis que la RT-PCR se produit sur un tout un ARN où il est nécessaire d’avoir de la transcription inversée (remettre ARN en ADN)
Quelles sont les 3 principales étapes de la réplication?
- Initiation
- Élongation
- Terminaison
Qu’est-ce que des facteurs d’initiation?
Des protéines qui vont reconnaître les origines de réplication afin de faciliter la fixation de d’autres protéines qui elles aussi vont se fixer à ces origines de réplication. Ces protéines permettent l’ouverture des deux brins de l’ADN et ainsi « faire apparaître » des fourches de réplication
Comment se produit l’étape d’initiation?
C’est l’ouverture de la double hélice:
1. Les facteurs d’initiation de la transcription reconnaissent l’origine de réplication
2. La protéine DnaA forme la fourche en brisant les liaisons H = OEIL DE RÉPLICATION
3. L’hélicase sépare les deux brins (casent les liaisons H)
4. La topoisomérase enlèvent les supertours positifs engendrés par la formation de l’œil de réplication
5. SSB (protéine) se fixent pour stabiliser les simples brins d’ADN et empêchent la reformation du double brin (RPA chez eucaryotes)