Cours 21

Question 1

2150

Qu’est-ce qu’un immunoglubuline?

Answer 1

C’est un anticorps produit par le système immunitaire

Question 2

Une immunoglobuline contient

Answer 2

Une chaine lourde et légère
Un domaine Fab et Fc
Des domaines constantes et variables

Question 3

Quels sont les noms des boucles hypervariables

Answer 3

CDR L1-L3 (light 1-3)

CDR H1-H3 (heavy 1-3)

Question 4

Comment gp120-gp41 (Env) permet l’entrée de virus dans la cellule hote

Answer 4

Monomère de trimère gp120 intéragit avec CD4
Changement de conformation de gp120
gp120 intéragit avec corécepteur
gp41 expose son peptide fusion pour laisser l’entrée du virion en canal

Question 5

Quels sont les facons de faire un vaccin contre le VIH1

Answer 5

Bloquer coopérativité du trimère après chg. de conformation
Bloquer intéraction CD4 gp120
Empeche entrée en arretant jonction gp41 et gp120

Question 6

Pourquoi SOSIP64 est plus cristallisable que Env?

Answer 6

RRR à gp120 pour un clivage de gp120-fp41 (par site de furine) plus facile.
gp120-41 attachés par liaison disulfure
I559P pour stabiliser la protéine
Ne possède pas sont gp41 c-terminal

Question 7

Qu’est-ce qui est caractéristqie à Env?

Answer 7

C’est 50% glycosylés (de sa masse)

Question 8

Dans l’article, on s’intéresse à:

Answer 8

La liaison de gp120 et l’anticorps VRCPG05 qui s’attache au silent face très glycosylée de gp120

Comment le virus du patient a mutée

Question 9

Quel est le but de cytométrie de flux?

Answer 9

Trouver les cellules de l’hote avec des anticorps qui veulent s’attacher de facon non-spécifique et spécifique au site de liaison de CD4 de Env

Question 10

Quels sondes de cytométie de flux sont utilisés?

Answer 10

Rsc3 (non-spécifique)

deltaRsc3 (spécifique)

Question 11

Le cytométrie de flux a permet d’isoler quels anticorps?

Answer 11

VRCPGO4 et VRCPG05

Question 12

Quel est le but d’un test de compétition ELISA? Que veut dire la fluorescence?

Answer 12

C’est pour voir comment bien le VRCPG05 se lie au site de laision de CD4 de gp120 à comparaison à d’autres anticorps qui lient au gp120.

Grand DO veut dire PAS de liaison.

Question 13

What does the competition ELisa results mean?

Answer 13

Aucun anticorps a été capable de délooger VRCPG05

Question 14

Qu’a donnée les tests de neutralisation de plusieurs souches de Env?

Answer 14

L’anticorps a une spécificité difféerente des autres anticorps connues (epitope différente) donc elle vient d’une lignée différente.

Question 15

Qu’a donné le TEM de Env-anticorps-CD4?

Answer 15

Les sites de liaison de l’anticorps et CD4 sur gp120 sont opposés l’un de l’autre

Question 16

Quels changements de Env étaient nécessaires pour faire la crystallisation en rayon X?

Answer 16

Des coeurs de gp120 sont faites avec des souches sensbles à VRCPG05 dans des cellules HEK293S GNTI-
Ils sont soumis à un endoglucosidae pour cliver les glycanes qui rendent la crystallisation impossible
On l’a complexé au fragment Fab de VRCPg05

Question 17

La crystallisation a montré que la surface d’intéraction

Answer 17

se compose 85% de glycanes

Question 18

Quels sont les glycanes principales dans l’intéraction

Answer 18

N262, 295 et 448

Question 19

Quels sont les parties protéiques (de Env) de l’interaction?

Par quels boucles?

Answer 19

ELS (E293, L446 et S447)

Par les CDRL1 et H3 qui s’inserent dans une pochette

Question 20

Quels sont les intéractions que font N262 (REQ), N295 et N448

Answer 20

N262 avec H1 et H3 (REQ)
N295 avec L2 et H3 (liaisons hydrogènes)
N448 avec L1, H2 et H3 (empilements, H et hydrophobes)
W fait un empilement pi

Question 21

Qu’a donné l’expérience de Surface Plasma Resonance?

Answer 21

Le VC PG05 interagit uniquement avec le gp120 GLYCOSYLÉ

Question 22

Qu’est-ce que se passe si on enle;eve les N262 et N248 de Env? analyse par test ELISA

Answer 22

Il n’y a pas d’intéraction avec l’anticorps

Question 23

Est-ce que l’épitope (les glycans) sont uniques au VRCPGO5

Answer 23

Non, sauf pour l’intéraction avec N262. C’est l’épitope le 2e plus glycolysé connu pour le VIH1.

Question 24

Est-ce que l’épitope (les glycans) sont uniques au VRCPGO5

Answer 24

Non, sauf pour l’intéraction avec N262. C’est l’épitope le 2e plus glycolysé connu pour le VIH1.

Question 25

Qu’est-ce que le modèle anticorps CD4 - gp120 CLOSE et OPEN nous montre?

Answer 25

En conformation close, l’anticorps peut s’attacher au trimère
En conformation open, il y a des empechements stériques avec le CD4

Cela EMPECHE l’infection

Question 26

Quels mutations a VRCPg05 eu pour reconnaitre les glycanes?

Answer 26

Allongement de bouvles, mutations dans les boucles
Mutations qui ajoutent à la surface de liaison
Y enlevé comme il cause des encombrements stériques

Question 27

Pourquoi le E293 est importante

Answer 27

Elle intéragit avec anticorps (partie protéique)

Elle lie 3 molécules d’eau et des boucles qui font des liaisons avec les glycans

Question 28

Quels sont les changements Env a subit contre le VRCPgo5

Answer 28

E293A ou G pour enlever la liaison avec les anticorps

N448 à 446 pour enlever la surface d’intéraction