Cours 18 Flashcards
Les archées du superembranchement TACK sont
Pensés d’avoir les ancetres des eucaryotes
Possèdent des PTM comme glycolysation très similaires à nous
Leurs enzymes sont très diversifiées
Qu’est-ce qu’on étudie dans cet article?
La structure et fonction d’un glycosyltransférase de P. calidifontis qui crée un N-glycane similaire aux eucaryotes
Qu’est-ce que rend le N-glycan de P. calidonfontis si important? Qu’est ce que rend sa structure différente?
Elle est très similaire au N-glycan eucaryotes.
Elle possède un porteur où elle s’assemble DolP ou PP
alpha1-4 entre GlcNac au lieu de beta1-4
Possède un coeur de chitobiose (chitine)
Où s’assemble le N-glycan chez les archés et les eucaryotes
DolPP dans face cytoplasmique du RE et translocation vers ER (eucaryotes)
DOlP ou DolPP dans face cytoplasmique
Comment le mannosyltransférase fonctionne?
Il donne un mannose d’un donneur `à un accepteur de mannose
Quels sont les types de donneur de mannose?
Leloir: Sucre-nucléotide (comme GDPaMan)
Non-leloir: Sucre-nonnuclétoide (comme sucrePPdolichol)
Comment sont fait le Dol P ou PP
C’est fait par le DPMS ce qui est lipide-dépendante (dolp mannose synthase)
Quels sont et que font les détergents?
Ce sont LSAO et LAPAO
Ils créent des bicelles ou nos protéines seront stables
Comment les bicelles sont faits? Pourquoi?
C’est fait avec les détergents, apoA et des phospholipides, pour créer un environnement plus stable pour notre GT transmembranaire
Quels sont les lipides utilisés dans l’étude
PG et PS ont une charge négative
PC Pe et PEG
La cristallisation de rayon X nous a donné la structure de l’enzyme avec GDP et Mn2+. Elle contient?
La partie catalytique 3 hélices transmembranaires (TMH1-3) 2 hélices interface 1 hélice sub-interface Mn2+ a été vue comme nécessaire après des tests de cation (augmente Ka)
Quels boucles (qui bougent souvent pendant catalyse) sont importantes?
Boucle A large qui bouge pendant catalyse
Boucle entre TMH 2 et 3
Quel est le but des tests de titrage calorimétrique isotherme?
Elle a donné des constantes de dissociation entre:
les nucléotides et PcManGT
les sucres-nucléotides et PcManGT
Qu’a donné les tests de iso…. ITC
Le donneur de mannose est un GDP-Man donc l’enzyme est un enzyme Leloir
La crystallisation en rayon X de PcManGT+Mn+GDP sans et avec Man avait comme but de?
Trouver comment le ManGDP intéragit avec le PcManGT dans les bicelles.