Coloration des hydrates de carbone Flashcards

1
Q

Classification générale des hydrates de carbone

A

– Hydrates de carbone simples

• Polysaccharide: Glycogène

– Glycoconjugués

• Mucines stromales:

– Protéoglycans et acide hyaluronique

• Mucines épithéliales:

– Neutres, sialomucines, sulfomucines

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2
Q

Quel est le rôle du glycogène?

A

Réserve majeure d’énergie.

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3
Q

Quelle est la localisation du glycogène?

A

– Hépatocytes

– Muscles squelettiques

– Muscle cardiaque
– …

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4
Q

Quel est le rôle des mucines épithéliales?

A

– Sécrétées pour des fonctions de protection et lubrification.

– Liées aux membranes pour l’adhésion cellulaire et la régulation de la prolifération cellulaire.

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5
Q

Quelle est la localisation des mucines épithéliales?

A

– Tractus digestif, respiratoire et reproducteur.

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6
Q

Quelle est la sous-classification des mucines épithéliales?

A
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7
Q

Quel est le rôle des mucines stromales?

A

– Support, lubrification, adhésion cellulaire…
– Donnent de la résilience aux tissus conjonctifs

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8
Q

Quelle est la localisation des mucines stromales?

A

– Matrice extracellulaire tissus conjonctifs, membranes cellulaires.

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9
Q

Quelle est la composition des mucines stromales?

A

– Distinct des mucines épithéliales, matériel myxoïde

– Protéoglycans et acide hyaluronique

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10
Q

Quels sont les agents de fixation compatibles et non compatibles pour la coloration des hydrates de carbone?

A

• Fixateurs compatibles:
– À base d’alcool: les meilleurs

• Carnoy, Bouin

– Formaldéhyde

• Fixateurs non compatibles:

– Zenker

• Délai de fixation le plus court possible.

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11
Q

Quelles sont les sous-divisions de mucines épithéliales?

A

Neutre : dans les cellules gastriques fovéolaires, glandes duodénales de Brunner et prostate. PAS (+).

Acide : dans les cellules à gobelet et glandes sous-muqueuses oesophagiennes. Bleu alcian (+).

  • Sialomucine : Forme la plus simple. Petit et gros intestin
  • Sulfomucine : Forme complexe sulfatée. Gros intestin.
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12
Q

Résumé de la classification des mucines

A
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13
Q

Nommer les différentes colorations du glycogène

A

PAS

PASD

Carmin de best

PAS-BA

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14
Q

Quel est le mécanisme de la coloration Periodic acid-Schiff (PAS) ?

A

Mécanisme : basé sur la réaction entre les groupes aldéhyde libres des hydrates de carbone et le Schiff pour former un produit rouge magenta.

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15
Q

Quel est le résultat du PAS?

Quel est son contrôle positif?

A

o Noyaux bleus

o Glycogène et autres substances PAS+ sont rouges (voir tableau 2)
o Structures acidophiles comme le collagène, les globules rouges, la kératine et les fibres musculaires sont jaunes.

• Contrôle positif: rein, foie

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16
Q

Quelle est l’utilisation du PAS?

Quelles tumeurs sont positives au PAS?

A

Utilisation : liste non exaustive

Démontre la présence de la plupart des glucides dans un tissu.

o Seule coloration pour la détection des mucines neutres.

o Montre aussi les mucines acides, mais ne colore pas les mucines stromales.

o Tumeurs PAS + :

  • § Sarcome d’Ewing
  • § Rhabdomyosarcome
  • § Sarcome alvéolaire des tissus mous : cristaux intracytoplasmiques
  • § Séminome

o Utilisation de routine en pathologie rénale, hépatique et musculaire.

o Poumon : protéinose alvéolaire

o Peau : Corps de Kamino dans le naevus de Spitz

o Gastro-intestinal : Maladie de Whipple

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17
Q

Quelles sont les substances positives au PAS?

A

Glycogène

Mucines épithéliales (neutres = seul le PAS les met en évidence).

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18
Q

Quelles sont les structures positives au PAS?

A
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19
Q

Quelle est la coloration et quelle est le diagnostic?

A

Maladie de Whipple

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20
Q

Quels sont les problème fréquents du PAS?

A

Problèmes fréquents:

– Marquage faible.

• Substances qui devraient être PAS+ sont trop peu +

– Marquage excessif.

• Trop de structures sont PAS+
– Masquage par la coloration nucléaire.

• Noyaux et contre-coloration trop foncée

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21
Q

Décrire le principe de la coloration au PASD

A

Technique:
– Comparer deux coupes d’un même bloc.

  • PAS
  • Ajout de diastase qui hydrolyse le glycogène, puis PAS – Zones PAS+ qui sont PAS- sur l’autre coupe = glycogène

Contrôle positif: Foie

22
Q

Décrire le Carmin de best

A

Carmin de Best

– Noyaux noirs

– Glycogène rouge foncé
– Mucosubstances neutres et fibrine en rouge pâle

23
Q

Décrire le Grocott

A

Grocott

  • Champignons, mucines, glycogène et mélanine noir
  • Cytoplasmes et érythrocytes en jaune.
  • Structures acidophiles tissulaires en vert pâle.
24
Q

Quelles sont les colorations utilisées pour mettre en évidence les mucines?

A

Bleu Alcian (BA)

Bleu Alcian/PAS

Bleu alcian avec digestion à l’hyaluronidase

Mucicarmin

Fer colloïdal de Hale

Periodic acid-Schiff technique (PAS)

IMHC

25
Q

Quel est le mécanisme du BA?

A

Mécanisme : Pas entièrement compris. Grosse molécule d’encre initialement utilisée dans l’industrie textile qui contient du cuivre et dont le caractère basique permet l’étude des mucines acides. Détection aussi des mucines stromales.

26
Q

Quelle est la technique du BA?

A

Technique :

Coloration avec le bleu alcian pour 30 minutes. Rinçage.

Contre-coloration au fast red pour 10 minutes. Rinçage.

Peut être utilisée à différents pH (en contrôlant l’acide acétique) et les résultats mettront en évidence différentes mucines :

pH 2,5 : la plupart des mucosubstances acides.

pH 0,5 : mucines fortement sulfatées

27
Q

Quels sont les résultats d’un BA?

Quel est le contrôle positif?

A

Résultats :

Mucines épithéliales acides (sulfomucines et sialomucines) en bleu.

Mucines stromales (Protéoglycans et acide hyaluronique) en bleu.

Noyaux en rouge.

Reste en rouge pâle à rose.

Contrôle positif: appendice, côlon, petit intestin

28
Q

Quelles tumeurs peut-on mettre en évidence au BA?

A

Utilisation : Détection des mucines acides.

Mise en évidence de la présence de mucine pour le diagnostic différentiel des :

Adénocarcinomes

Carcinomes adénosquameux

Tumeurs mucineuses

Œsophage de Barrett

Maladie de Paget du scrotum

Myxomes

Adénomes pléomorphes sur une biopsie à l’aiguille

29
Q

Quelles sont les structures positives au BA?

A

Colloïde de la thyroïde

Cellules à gobelet

Glandes muqueuses

30
Q

Quels sont les problèmes fréquents du BA?

A

Problèmes fréquents:
– Arrière-plan trop foncé

• Fond trop bleu

– Noyau coloré

• Noyaux bleus
– Coloration trop faible dans les structures qui devraient être +

• Structures qui devraient être positives sont bleu pâle

31
Q

Quel est le mécanisme du BA/PAS?

A

Mécanisme : Combinaison des techniques du bleu alcian et du PAS dans le but de différencier les mucines acides des mucines neutres ou d’élargir le spectre de détection des hydrates de carbone.

32
Q

Quel est le résultat d’un BA/PAS?

Quel est son contrôle positif?

A

Résultats:

– Mucines acides + stromales : bleu.

– Mucines neutres, glycogène et autres glycoprotéines : rouge.

– Noyaux : noir.

• Contrôle positif: duodénum (glandes de Brunner PAS + et cellules à gobelet mauves)

33
Q

Quelle est l’utilisation du BA/PAS?

A

Utilisation : Coloration pan-mucine.

Identification de la métaplasie intestinale dans l’estomac

Identification de la métaplasie gastrique dans l’intestin.

34
Q

Quel est le mécanisme du Bleu alcian avec digestion à l’hyaluronidase

A

Mécanisme : Digestion de l’acide hyaluronique. L’hyaluronidase peut provenir du testicule, du pneumocoque et de la tête de sangsue. Permet la distinction entre les mucines épithéliales acides (+) et stromales (-).

35
Q

Quel est le résultat du Bleu alcian avec digestion à l’hyaluronidase?

Quel est son contrôle positif?

A

Résultats :

Comparaison entre les deux coupes : les zones bleu alcian (+) qui deviennent (-) après la digestion sont composées d’acide hyaluronique.

Contrôle positif : Sur chaque lame. Appendice, côlon, petit intestin.

36
Q

Quelle est l’utilisation du Bleu alcian avec digestion à l’hyaluronidase

A

Utilisation :

Différencier un mésothéliome d’un adénocarcinome.

Identification de la mucine intradermique (granulome annulaire).

37
Q

Quel est le mécanisme du mucicarmin?

A

Mécanisme : Démonstration des mucines acides par un complexe aluminium-acide carminique appelé carmine. Les sels d’aluminium agissent comme chélateur sur l’acide carmique et donnent une charge positive globale attirant les mucines acides.

Coloration la plus spécifique pour les mucines acides

38
Q

Quels sont les résultats d’un mucicarmin?

Quel est son contrôle positif?

A

Résultats :

Mucine épithéliale acide : rose foncé à rouge.

Noyaux : noirs

Autres éléments : jaune pâle.

Contrôle positif : Appendice, côlon, petit intestin.

39
Q

Quelles sont les utilisations du mucicarmin?

A

Utilisation :

Très spécifique pour les mucines épithéliales acides.

Capsule du Cryptococcus.

40
Q

Quelle est la coloration et le Dx?

A

Mucicarmin

Capsule de Cryptococcus neoformans

41
Q

Quel est le mécanisme du Fer colloïdal de Hale?

A

Mécanisme : Attraction des cations ferriques d’une solution oxyde de fer colloïdal pour les groupes carboxyle et sulfate négativement chargés des mucines acides et protéoglycans. Les ions ferriques sont mis en évidence par le bleu de prusse. Mise en évidence des mucines épithéliales acides et stromales.

42
Q

Quel est le résultat du Fer colloïdal de Hale?

Quel est son contrôle positif?

A

Résultats:
– Mucines acides et stromales: bleu.
– Collagène : rouge

• Contrôle positif: Appendice, côlon, grêle

43
Q

Quelles sont les utilisations du Fer colloïdale de Hale?

A

Utilisation :

Différenciation entre le carcinome rénal chromophobe (fortement positif) de l’oncocytome (négatif).

Mise en évidence de la capsule du Cryptococcus.

44
Q

Quelles sont les structures positives au Fer colloïdale de Hale?

A

Hémosidérine

Fer dans un tissu

Acides nucléiques libres

45
Q

Quelle est la coloration la plus sensible mais la moins spécifique pour mettre en évidence les mucines?

A

6 Periodic acid-Schiff technique (PAS)

Coloration la plus sensible, mais la moins spécifique pour les mucines.

Meilleure spécificité en ajoutant la digestion à la diastase.

46
Q

Comment sont classées les IMHC pour les mucines?

A

Les immunohistochimies pour les mucines sont divisées de la façon suivante :

Mucines liées aux membranes : MUC1, 3, 4, 12, 16 et 17.

Mucines sécrétées: MUC2, 5AC, 5B et 6.

Mucines solubles : MUC7

47
Q

Quelles cellules normales et quelles tumeurs sont mises avec l’IMHC de MUC1 (EMA)?

A

Mucine pan-épithéliale

• Cellules épithéliales en général.
– Surtout les épithéliums sécrétoires, dont le tractus digestif et les cellules pancréatico-biliaires.

  • Positif dans la majorité des carcinomes non-épidermoïdes.
  • Autres : sarcome synovial, sarcome épithélioïde, chordome.
48
Q

Quelle est l’utilisation de l’IMHC contre MUC1 (EMA)?

A
  • Tumeurs EMA + et CK - : méningiome, périneurome, néoplasmes à plasmocytes, cellules de Reed Sternberg.
  • Mésothéliome (membranaire +), adénocarcinome (cytoplasmique +)
49
Q

Quelles cellules normales et quelles tumeurs marquent avec l’IMHC de MUC2?

A

• Mucine intestinale :

– Cellules à gobelet.

• Néoplasies :
– Tumeurs primaires du tractus gastro-intestinal (colon, œsophage, estomac)

50
Q

Quelle est l’utilisation de l’anticorps contre MUC2?

A
  • Identification des métastases de carcinome colorectal aux ovaires.
  • Identification des adénocarcinomes mucineux d’origine gastro-intestinale.
  • Distinguer l’origine de la métaplasie intestinale à la jonction gastro-oesophagienne (MUC1 et 2 + si œsophage de Barrett, MUC1 et 2 – si métaplasie de la muqueuse gastrique).
  • Tumeur intracanalaire papillaire mucineuse du pancréas (IPMN) MUC2 + vs néoplasie pancréatique intra-épithéliale (PanIN) MUC2 -.
51
Q

Quelles cellules normales marquent à l’IMHC de MUC5AC? de MUC6?

A

Mucines gastriques:

– MUC5AC:

  • Cellules fovéolaires normales
  • Positif aussi dans la muqueuse trachéobronchique et l’endomètre.

– MUC6:

  • Antre gastrique
  • Cellules des glandes fundiques
  • Positif aussi dans la vésicule biliaire, le côlon et l’endocol.