College 2 COVID-19: afweer en besmettelijkheid

Question 1

wat moeten cellen hebben om geïnfecteerd te kunnen worden met SARS-Cov-2?

Answer 1

ACE2 receptor op het oppervlak –> zonder deze receptor kan het virus de cel NIET in

Question 2

Waarmee bindt het SARS-Cov-2 aan cellen?

Answer 2

Spike-eiwitten (alle coronavirussen hebben dit)

Question 3

Waartegen zijn de vaccins tegen SARS-Cov-2 gericht?

Answer 3

Tegen de spike-eiwitten

Spike is het major Ag in vaccinaties tegen SARS-Cov-2

Question 4

Wat is het nadeel van het gebruik van een dood virus vaccin?

Answer 4

• virus gaat cel niet in omdat dood
• Ag wordt op een andere manier aangeboden dan bij een infectie

Question 5

Wat is het nadeel van levend verzwakte virus vaccins? wat zijn voorbeelden hiervan

Answer 5

Immuun gecompromitteerden kunnen wel infecties krijgen

Rubella, bof, mazelen

Question 6

Hoe werken de mRNA vaccins?

Answer 6

• mRNA van spike-eiwit
• hostcellen maken zelf deze spike-eiwitten
• natuurlijke manier om IS te alarmeren –> zelfde manier als bij een infectie
• Ig maken
• T-cel respons met een goede geheugenrespons

Question 7

hoe werken DNA vaccins met virale vector?

Answer 7

• onschuldig virus nemen (bvb adenovirus)
• kapot maken waardoor niet meer repliceren, maar wel cel in kan
• Kan Ag laten zien want brengt spike-eiwit tot expressie omdat genoom verandert is

Question 8

Wat is het voordeel van virale vector vaccins?

Answer 8

Kan je wel geven aan immuun gecompromitteerden ALS niet repliceerbaar

Question 9

welke 3 fases van COVID-19 zijn er?

Answer 9

fase 1 = vroege infectie
fase 2 = pulmonale fase
fase 3 = hyperinflammatie fase

Question 10

wat gebeurt er in de acute fase van COVID-19?
Wat zijn de symptomen in deze fase? Hoe detecteer je de infectie?

Answer 10

• enorme replicatie van het virus
• anti-virale immuunrespons

Asymptomatisch of milde symptomen

RT-PCR

Question 11

wat gebeurt er in de pulmonale fase van COVID-19? wat zij de symptomen?
Hoe detecteer je dit?

Answer 11

• virus replicatie
• afname van anti-virale immuunrespons
• begin/toename van inflammatoire host respons
• aangedane longen, pneumonie
• dyspnoe

X-thorax: verdichtingen
CT: matglas verdichtingen

Question 12

wat gebeurt er in fase 3 van COVID-19? wat zijn de klachten/kenmerken?

Answer 12

= hyperinflammatie reactie
- cytokine storm
- enorme inflammatoire host respons

• pneumonie
• sepsis
• respiratoir falen
• ARDS

Question 13

wat is een kenmerk van virussen om ze te kunnen aantonen?

Answer 13

Moeten replicatie competent zijn

–> laten repliceren om te vangen

Question 14

wanneer zijn patienten met COVID-19 waarschijnlijk het meest besmettelijk?

Answer 14

Vlak voor en vlak na symptomen

HOe hoger de load hoe meer kans dat infectieus virus bij zich draagt

Hoe langer ziek hoe minder de kans dat een infectieus virus nog bij je draagt

Question 15

wat maakt de kans dat iemand infectieus is kleiner?

Answer 15

Zodra er neutraliserende antistoffen gemaakt worden

Question 16

Hoe kan je neutraliserende antistoffen gebruiken bij COVID-19 als therapie?

Answer 16

REGEN-COV: 2 soorten neutraliserende Ig op RBD stuks van spike-eiwit binden –> Bindt aan ACE2

Effect bij patienten die nog sero-negatief zijn (dus zelf nog geen Ig hebben gemaakt)
Als sero-positief heeft het geen effect op de overleving

Question 17

Hoe verlopen de mutaties in het coronavirus?

Answer 17

• eerst mutaties op het beter kunnen besmetten van mensen
• mutaties die escape hebben voor de opgebouwde afweer (omicron)

In 2020 hadden mensen nog geen afweer dus de virussen die toen de afweer konden omzeilen werden uitgeselecteerd tov virussen die beter waren in het besmetten

Question 18

wat is het effect van de vaccinaties? Wat is het effect van de neutraliserende Ig?

Answer 18

Zorgen dat de T-cel respons aanwezig is waardoor minder ernstig ziek worden

Ig waarschijnlijk meer in eerste lijn afweer –> vaccins hiermee lijken dus minder goed te werken

Question 19

Hoe kon Sars-Cov-2 worden aangetoond?

Answer 19

Door real time PCR
We hadden al snel het genoom van het virus bepaalt waardoor deze diagnostiek kon plaats vinden –> vermeerderen van een bepaald stukje van het virale genoom

Question 20

hoe kunnen we mutaties van de virussen in kaart brengen?

Answer 20

Via sequencing
–> virussen vergelijken met het wildtype virus

Question 21

Hoe kunnen we de besmettelijkheid van het virus in kaart brengen?

Answer 21

Virale kweek op verocellen
–> Kijken of het virus gezond cellen kan infecteren

Toevoegen sputum COVID patient aan Vero cellen –> klontering
= cytopatisch effect

Vervolgens met kleuring aantonen dat de geklonterde cellen ook daadwerkelijk met het virus geïnfecteerd zijn

Question 22

Wat zegt iets over de besmettelijkheid?

Answer 22

De viral load en dus de hoeveelheid van het virus die kan worden aangetoond met een PCR

Question 23

Wat is een nadeel van de PCR?

Answer 23

Blijft lang positief ook als een patient niet meer besmettelijk is

Question 24

wat is nadelig van sneltesten tov PCR?

Answer 24

Ag sneltesten zijn minder gevoelig

Question 25

Kan je iets zeggen over de virale load nav Ag sneltest?

Answer 25

Hoe sterker gekleurd hoe hoger de virale load

Question 26

Wat moet altijd in acht worden genomen bij een Ag sneltest?

Answer 26

Het is een momentopname
–> Kan dus snel weer veranderen en zo kan iemand negatief zijn terwijl hij wel COVID-19 aan het ontwikkelen is

Daarbij hebben ze niet allemaal dezelfde sensitiviteit en specificiteit

Question 27

Hoe werken neutraliserende Ig tegen een virus infectie?

Answer 27

neutraliserende Ig kunnen binden aan het spike-eiwit en kunnen zo voorkomen dat het virus aan de cel kan binden en deze kan infecteren

Question 28

wanneer hebben de neutraliserende Ig de beste respons?

Answer 28

De meest efficiënte en snelle respons bij een tweede aanraking met het virus

Question 29

Hoe kan de virus neutralisatie in kaart worden gebracht?

Answer 29

neutralisatie assay

• serum van een patient worden afgenomen en steeds verder verdund
• aan de verschillende verdunningen wordt Sars-Cov-2 toegevoegd
• de oplossingen worden na enkele uren aandacht op een cellijn die gevoelig is voor het virus
• in de buisjes met veel Ig al je naar verwachting geen reactie zien op de cellijn, omdat het virus hier onschadelijk is gemaakt door die neutraliserende Ig
• hoe verder de verdunning (hoe minder Ig) hoe meer de cellen zullen reageren

Reactie: ontstaan van virus plaques gevormd door een groepje geïnfecteerde cellen

Question 30

hoe kunnen we onderzoeken of een patient immuun is voor de mutanten?

Answer 30

Door bij een neutralisatie essay ook de mutanten toe te voegen

Question 31

Op welke termijn hebben de meeste mensen neutraliserende Ig? Hoe lang beschermen deze de patient?

Answer 31

Na 2 weken

Duur: onbekend

Question 32

Hoe verloopt de humorale adaptieve respons in het kort?

Answer 32

• kortlevende plasmacellen: kort na de infectie zorgen deze voor een hoge Ig respons
• respons wordt overgenomen door de langlevende geheugencellen
• hoeveelheid geheugecellen is lager waardoor de hoeveelheid Ig zal afnamen

Question 33

Wat is een nadeel van de neutralisatie assay? Wat is een alternatief?

Answer 33

Duur en arbeidsintensief

ELISA

Question 34

Hoe werkt een ELISA?

Answer 34

• strip met een coating van een specifiek Ag
• serum van de patient wordt toegevoegd
• indien zich hierin Ig bevinden tegen dit Ag zullen deze binden aan het Ag
• vervolgens worden er gelabelde Ig toegevoegd die binden aan de Ig van de patient
• die geven kleuren af die kunnen worden aangetoond

Question 35

Hoe zit het Sars-Cov-2 eruit?

Answer 35

• genoom wordt omringt door een nucleocapside
• daarom heen een kapsel met spikes

Question 36

wat moeten we gebruiken voor Sars-Cov-2 vaccinatie en wat niet?

Answer 36

Niet: nucleocapside eiwitten want niet erg specifiek

Wel: spike-eiwitten want is erg specifiek voor Sars-Cov-2
Specifiek het receptor bindend domein

Question 37

Wat wordt gezien bij geïnfecteerde mensen (Virus) die een B-cel deficiëntie hebben?

Answer 37

Kunnen het virus alsnog goed klaren omdat waarschijnlijk de T-cellen hier een grote rol bij hebben

• T-cellen herkennen Ag via HLA-complex
• klonale expansie
• differentiatie in effector T-cellen en geheugen T-cellen

Question 38

Hoe vindt de diagnostiek van de cellulaire respons meestal plaats?

Answer 38

Flowcytometrie –> specifieke T-cellen aansleuren

Of een IFN-y assay –> indicatie voor de kwaliteit van de T-cellen