Código Genético e Engenharia Genética Flashcards
O que é o código genético
É a relação entre as bases nitrogenadas e os aminoácidos nas proteínas. 3 bases nitrogenadas equivalem a 1 códon, que determina um aminoácido na proteína que está sendo fabricada.
Material genético
vs. código genético
O material se trata dos genes que estão no DNA/cromossomos, no genoma. É a sequência de bases nitrogenadas. Pode-se dizer, como exemplo fictício, que o gene X apresenta o material genético ACTAGA…
- O material varia entre as pessoas, devido ao DNA lixo enquanto o código é universal.
- O material pode ser alterado através de mutação e engenharia genética.
Códons de início e nonsense
AUG / UGA - UAG - UAA
Maquinaria para síntese proteica
Será necessário:
- RNAm;
- Aminoacil-RNAt: aminácidos ligados aos RNAt;
- Ribossomos, organelas obrigatória em toda célula.
- Máquina composta de RNAr+ e proteínas.
- Forma de 8.
2.1 Apresenta 2 subunidades, uma maior que a outra. - Subunidade maior apresenta 2 sítios.
3.1 Em um desses “buracos”, o aminoacil, ocorre a entrada do aminoácido;
3.2 Em outro “buraco”, o peptidil, ocorre a saída do aminoácido.
3.3 Assim, pode-se dizer que essa subunidade maior é para a ligação com RNAt. - A subunidade menor serve para a ligação com RNAm, determinando a sequência de aminoácidos.
Processo de síntese proteica
- Ligação RNAt da metionina com a subunidade menor.
- Adiciona o RNAm.
- Adiciona o subunidade maior.
- A proteína fator de terminação desmonta o ribossomo, quando esse encontra um nonsense. Assim, a proteína está pronta.
Polirribossomos
Ribossomos nunca estão sozinhos em um RNAm. Entre 60 e 80 ribossomos estão conectados em um mesmo RNAm, produzindo várias cópias da proteína com o mesmo RNAm.
Polissomos da citoplasma e retículo
Proteínas de uso interno às células são produzidas no citoplasma, enquanto as proteínas de uso externo, de secreções, são fabricadas no retículo endoplasmático rugoso.
Biotecnologia
Uso de seres vivos para obtenção de produtos úteis ao homem.
Engenharia genética
Conjunto de técnicas que possibilitam a manipulação do material genético, como a técnica do DNA recombinante - que consiste em corte e colagem de genes entre quaisquer espécie.
Transgênicos
É um OGM com gene de outra espécie.
Técnica do DNA recombinante
Enzimas endonucleases de restrição cortam o DNA.
Vetor e DNA de interesse
O DNA de interesse é o que nos interessa obter, enquanto que o vetor é o suporte receptor da colagem.
Vetor - Plasmídeo bacteriano
Trata-se de um exemplo de um vetor. O plasmídeo é um DNA extracromossomial.
- Genes essenciais à bactéria estão no cromossomo.
- Genes não-essenciais à vida estão fora do cromossomo, no plasmídeo.
Assim, esse é um exemplo de vetor possível porque pode-se inserir o DNA de interesse no plasmídeo, pois não é fundamental à vida da bactéria, diferente do seu material cromossômico.
Etapas do DNA Recombinante (6)
- Corte do DNA: enzima endonuclease de restrição.
- Colagem do DNA por pontes de H: as pontas se complementam e ligam pelas extremidades pegajosas.
- Colagem do DNA por ligações fosfodiéster 3’5’: ligação covalente feita pela enzima DNA ligase.
- Clonagem do DNA recombinante.
- Transfecção: inserção no organismo a ser modificado.
- Seleção dos organismos modificados através da inserção do gene marcador.
Clonagem in vivo
A bactéria cria cópias do DNA através da reprodução assexuada.
Clonagem in vitro
Realizada em tubos de ensaios, com as enzimas apropriadas.
Reação de Cadeia de Polimerase
Técnica de clonagem de DNA in vitro em ↑T = ↑v da reação química. A enzima TAQ DNA polimerase, que é a polimerase da bactéria termoacidófila Thermos aquaticus, é usada por aguentar altíssimas temperaturas antes de desnaturar, diferente da polimerase humana. Assim, ela auxilia no processo de criação de várias cópias rápidas do DNA.
- O DNA é elevado a ↑↑↑T, por volta de 96°C, onde são quebradas as pontes de H das bases nitrogenadas, separando as fitas de DNA.
- ↓T, mas ainda a mantendo ↑T, por volta de 72°C, onde a enzima TAQ DNA polimerase adiciona novos nucleotídeos, criando pares pra cada frita, criando dois DNAs novos.
- Mantém-se oscilando essas temperaturas.
Usos do transgênicos (2)
- Biofábricas de produtos úteis ao homem.
- Plantas de qualidade superior, mais nutritivas.
Riscos do transgênicos (3)
- Reações alérgicas.
- Perda de biodiversidade no local de cultivo.
- Transferência de genes às espécies nativas/selvagens.
Genes Bt / RR
Eliminam insetos. /
Resistência à herbicida glifosfato.
Solução para a transferência de genes
Plantas transgênicas devem ser estéreis para evitar a transmissão de genes por cruzamento.