Clone par clone et Annotation structurale - CC1 Flashcards

1
Q

La méthode clone par clone du séquencage de génome complet se fait en deux étapes : lesquelles ?

A

D’abord, on établit une carte physique du génome en ordonnant les clones selon leur taille.
Puis, on fragmente et on séquence ces clones de grande taille.

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2
Q

Quels sont les avantages et inconvénients du clone par clone ?

A

Avantage: moins d’erreur, plus adaptés à des génomes complexes. Inconvénient : établir la carte physique, et cher.

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3
Q

Est-ce que la qualité des génomes séquencés qu’on peut obtenir est toujours la même ?

A

Non, pas du tout : la qualité dépend de nombreux facteurs. Une qualité plus haute est trouvée pour la recherche fondamentales que pour la recherche appliquée.

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4
Q

Après avoir obtenu les séquences, on fait quoi ?

A

Il faut décoder le génome, en faisant des tests fonctionnels dessus (couteux en temps et argent) ou en faisant des aproches in silico (mais prédictions -> erreurs)

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5
Q

Que va-t-on annoter lorsque le génome est étudié ?

A

On localise les éléments structuraux : gènes pour protéines, non coants, répétées ? On annote les produits du génome. On dresse des voies métaboliques, des familles de prots etc.

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6
Q

Qu’appelle-t-on la synténie ?

A

conservation de l’ordre des gènes entre les espèces.

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7
Q

Que sont les gènes codants pour les ARNs non traduits ?

A

Les gènes qui codent pour les ARN ribosomiques et ARNt. Ces séquences sont très conservées et bien connues.

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8
Q

Quel programme permet de détecter les séquences propres au codage de l’ARNt ?

A

tRNAscan

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9
Q

Que recherche-t-on au niveau des gènes codant, pour les procaryotes lorsque l’on fait de l’annotation structurale ?

A

On recherche des ORF
des unités de traduction (Shine/Dalgarno en 5’ du codon initiateur).
On recherche des unités de transcriptions, ou opérons.

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10
Q

Que recherche-t-on au niveau des gènes codant, pour les eucaryote lorsque l’on fait de l’annotation structurale ?

A

La structure en introns/exons.
Les 5’ UTR et 3’UTR.
Les promoteurs et sites de PolyA.

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11
Q

Quels difficultés de faire l’annotation structurale des gènes codant chez proca ? Euca ?

A

Chez les proca, les gènes sont chevauchants. Et chez les eucariotes, une faible portion du génome est codante et il y a beaucoup d’introns (pb avec l’épissage).

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12
Q

Dans les ARN de transfert, quelle structure est mieux conservée ?

A

La structure secondaire.

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13
Q

Qu’est-ce que une séquence codante ou CDS ?

A

Comment par un codon init (ATG ou GTG ou TTG)
Se termine par codon de term (TAA TAG TGA)
A une taille multiple de 3 sans les introns.

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14
Q

Qu’est-ce qu’une ORF ?

A

C’est une séquence codante qui peut contenir un gène.

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15
Q

Quels problèmes avec annotation structurale des ORF et CDS ?

A

Le gène peut être sur l’un ou l’autre des brins.
Plusieurs phasesde lectures possibles.
Chez les eukaryotes, les exonsintrons rendent les ORF discontinues.

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16
Q

Qu’est-ce que la méthodenaive pour détecter les ORF ?

A

On cherche des régions assez grandes entre Cini et Cstop puis on fait une traduction de la séquence à l’aveugle.

17
Q

En détectant des ORF, si on trouve 6 phases de lecture, cela signifie que…

A

… il y a 6 séquences protéiques possibles.

18
Q

à part la méthode naive pour détecter les ORF que peut-on-utiliser ?

A

Des logiciels pour els détecter, mais des limites : toutes les ORF ne contiennent pas de gène, ne détecte que la partie codante du gène et les logiciels ne sont pas appropriés pour les gènes morcelés.

19
Q

Quel avantage des prédictions statistiques pour détecter les ORF ?

A

Prend en compte l’usage du code génétique, c’est à dire que N codons codent pour le même acide aminé.
Peut aussi calculer la proba qu’une fenêtre soit codante

20
Q

Est-ce que chaque codon qui code pour un acide aminé a les même chances d’être utilisé ?

A

Non, il y a un codon préférentiel pour chaque AA dans chaque organisme.

21
Q

Quelle méthode complémentaire peut être utilisée en plus des détections d’ORF et prédictions statistiques ?

A

Comparer les séquences : on cherche des similarités entre ORF prédite et celles déjà disponibles dans les banques.

22
Q

Ou est-ce que ces programmes sont efficaces et ou est-ce qu’ils puent la merde ?

A

Très efficace pou rles procaryotes malgré quelques pièges. MAIS à chier pour les eucaryotes complexes à cause de la structure complexe des gènes et du faible % de régions transcrites.

23
Q

Définir sensibilité.

A

Capacité à mettre un phénomène en évidence quand il a lieu.

24
Q

Définir spécificité

A

Capacité à donner unr ésultat négatif quand ce phénomène n’a pas lieu.

25
Q

Quelle relation entre sensibilité et spécificité ?

A

Quand sensibilité augmente spécificité diminue. Il faut donc trouver un bon compromis.