Clonación y transformación de bacterias Flashcards
“Es el proceso de hacer muchas copias de un fragmento de ADN específico, como un gen. Con frecuencia, las copias se hacen en bacterias”
Clonación de ADN
La enzima de restricción…
La enzima de restricción es aquella enzima que nos ayuda a cortar la hebra de ADN bacteriano para pegarlo al plásmido por medio de ligasas
Qué tipo de extremo / corte son
ATTG CGTA
TAAC GCAT
Extremos romos
Qué tipo de extremo / corte son
A TTCG
CTGA T
Cortes cohesivos
La enzima de restricción EcoRI hace cortes de tipo
cohesivo
Función de las enzimas de restricción
Cortar el gen que queremos clonar
Reconocen secuencias especificas de genes
Para la clonación de ADN debemos de insertar **un gen **en un:
plasmido
Corte en diferente posición (3 a 5 nucleotidos de diferencia), deja nucleotidos libres que se pueden complementar con otra secuencia
Cohesivo
Corte en forma simétrica en ambas cadenas de AND, los nucleotidos están completos
Corte romo
Enzima que une el plasmido (extremos cohesivos) con el ADN formando enlaces covalentes
Ligasa
El ADN recombinado (plasmido + ADN) se inserta en bacterias aunque solo las que contengan ________ van a crecer (son resistentes a antibióticos)
El ADN recombinado (plasmido + ADN) se inserta en bacterias aunque solo las que contengan el plasmido van a crecer (son resistentes a antibióticos)
Enzima con actividad de nucleasa (degrada)
Enzimas de restricción
Secuencias que se leen igual de izquierda a derecha y al revés
ej :
5´GAATTC3´
3´CTTAAG5´
Secuncias palindrómicas
Es más difícil pegar fragmentos romos o fragmentos cohesivos
Fragmentos romos
En que ayuda a las bacterias el hecho de tener un plásmido en ellas
Les ayuda a ser resistentes a los antibióticos.
