Chapitre 2. Combler les besoins nutritionnels des bactéries

Question 1

Qui est considéré comme le père des milieux de culture?

Answer 1

Robert Koch qui réussit à isoller B. anthracis avec le sérum de boeuf stérile et d’humeur aqueuse d’oeil de vache, et qui émit son postulat en 1882. Il a aussi été lke premier à proposer la gélatine pour oslidifer les milieux de culture

Question 2

Pourquoi la gélatine est-elle peu propice à la culture bactérienne?

Answer 2

Parce qu’elle devient liquide à 25 degrés celsius et que la plupart des bactéries ont une température optimale de croissance plus élevée que 25 degrés celsius

Question 3

Quel est l’objectif premier dans la préparation d’un milieu de culture?

Answer 3

Procurer un mélange bien balancé des nutriments rquis qui permettreont une croissance optimale du microorganisme recherché.

Question 4

Est-il une bonne idée de mettre les nutriments essentiel en excès?

Answer 4

Non, car la plupart peuvent devenir inhibiteur ou toxiques en excès.

Question 5

Vrai ou faux? Les microorganismes sont capables d’utiliser une diversité infinie de sources de carbones.

Answer 5

Vrai (on ne connait aucune molécule organique qui ne puisse pas être dégradé par des bactéries)

Question 6

Quel sucre est le plus utilisé par les bactéries hétérotrophes?

Answer 6

Le glucose

Question 7

Peut-on se servir de la source de carbone comme agent sélectif?

Answer 7

Oui, car certaines sources de carbones sont uniquement dégradables par certaines bactéries.

Question 8

Comment est rajouté une source d’azote dans les milieu synthétique? Et les milieux complexes?

Answer 8

Milieu synthétique : sels azotés (ex. NH4CL, KNO3)
Milieu complexes : hydrolysats (ou peptones) et extraits

Question 9

Quelles sont les deux types d’hydrolyses utilisés pour la fabrication de peptones?

Answer 9

L’hydrolyse acide ou enzymatiques

Question 10

Quels sont les trois types de matières premières utilisées pour la fabrication de peptones?

Answer 10

1 - Origine animale : organes, muscles
2 - Origine laitière : caséine acide, lactosérum
3 - Origine végétale : soja, coton, maïs, fève, blé

Question 11

Que permet l’ultrafiltration des peptones?

Answer 11

Séparer/concentrer les consitituants des solutions de protéines basé sur le poids moléculaire (membrane séparant à 10 kDa) : on l’utiliser pour créer un produit à faible teneur en endotoxine (utile en pharmacie, par exemple)

Question 12

Vrai ou faux? Les hydrolysats enzymatiques conservent mieux la valeur nutritive de la source originale de protéine que les hydrolysats acides.

Answer 12

Vrai, l’hydrolyse acide détruit généralement complètement le trp et souvent la ser et la thr, et le contenu en vitamine.

Question 13

Quel est la particularité de l’hydrolysat de soja?

Answer 13

Elle contient beaucoup de sucres, donc est à proscrire dans un milieu où l’on cherche à contrôler le sucre.

Question 14

À quoi sert les extraits? Quelle est leur particularité en les comparant avec les peptones?

Answer 14

Ils servent comme source d’azote et de carbone, et contiennent une teneur élevée en sucre ce qui peut fausser les résultats dans les études d’utilisation des sucres.

Question 15

Comment sont ajoutés les minéraux dans les milieux de cultures synthétiques et complexes?

Answer 15

• Milieu synthétique : ajoutés sous forme de sels inorganiques (MgCL2, KH2PO4, CaCl2, NaCL)
• Milieu complexe : présents dans les hydrolysats, extraits et suppléments

Question 16

Quels rôles peuvent être joués par les minéraux dans un milieu de culture?

Answer 16

Éléments nécessaire à la croissance et tampons

Question 17

Quels sont les tampons les plus utilisés en culture?

Answer 17

Les tampons phosphates

Question 18

Qu’est-ce qu’un supplément dans un milieu de culture?

Answer 18

Des facteurs de croissance de quantité indéfinies et dont la composition n’est pas nécessairement connue qui sont rajoutés au milieu de culture pour faire croître les bactéries qui y sont souvent associées (ex. extraits de sol pour bactéries du sol, lait écrémé pour bactéries laitières, jus de fruits ou tomates pour bactéries lactiques de matière végétales)

Question 19

Quel est l’agent solidifiant le plus souvent employé en microbiologie et pour quelles raisons?

Answer 19

L’agar : extrait d’un groupe d’algues marines rouges
1. Bonne transparence dans les formes solides/gel (permet l’identification des colonies)
2. Résistance constante pour résister aux striations sans nuire aux caractéristiques de diffusion
3. Gélification à 32 à 40 degrés celsius et fusion à environ 85 degrés celsius
4. Absence de produits chimiques utilisables métaboliquement
5. Teneur faible et régulière en groupes électronégatifs
6. Absence de substances toxiques
7. Absence de substances hémolytiques
8. Absence de contamination par spores thermophiles

Question 20

Nommez deux autres agents solidifiants utilisés que l’agar et dans quel conterxte?

Answer 20

Gel de silice : absence totale de produits organiques - permet la croissance des bactéries autotrophiques

Gomme gélane : Gel thermostable utilisé pour la croissance de microorganismes à températures de 120 degrés celsisus et pressions de 265 atm.

Question 21

Quelle sont les grandes catégories de milieux de culture et leur différences?

Answer 21

Les milieux synthétiques et complexes.

Les milieux synthétiques ont une composition connue et donc plus contrôlés, qui permet d’effectuer des études métaboliques.

Les milieux complexes utilisent des peptones, extraits et suppléments dont la composition n’est pas définie.

Question 22

Quels sont les 4 catégories de milieux de cultures en fonction de leur usage?

Answer 22

1. Milieux d’enrichissement : toujours liquides, stimulent la croissance d’un microorganisme ou inhibe/tue des microorganismes indésirable
2. Milieux séléctifs/électifs : contient un ou des produits qui inhibent le développement des microorganismes indésirables et pas celui de la bactérie que l’on tente de d’isoler
3. Milieux différentiels : permettent de mettre en évidence une propriété particulière d’un microorganisme (ex. hemolyse, production d’acide, etc.)
4. Milieux de transport : pas des milieux de cultures, permettent seulement de préserver l’intégrité des microorganismes entre le prélèvement et la mise en culture

Question 23

Quel est le but d’un milieu d’enrichissement?

Answer 23

Il est utilisé quand la bactérie à isoler est minoritaire dans le sol : elle lui confère un avantage qui lui permet de prendre le dessus sur les autres bactéries en compétition avec elle.

Question 24

Quels effets visent à retarder les milieux de transport (4)?

Answer 24

1. Dessiccation de l’échantillon
2. Modification du pH
3. Perte des anaérobies (contient des agents réducteurs)
4. Croissance des bactéries commensales

Question 25

Dans quel ordre de grandeur est ajouté chacun des éléments suivants?
* Sucres
* Hydrolysats/extraits
* Sels/ions
* Vitamines
* Purines/pyrimidines
* a.a.
* agents réducteurs
* agar

Answer 25

• Sucres : g/L
• Hydrolysats/extraits : g/L
• Sels/ions : ng à g/L (de traces à NaCl)
• Vitamines : mg/L
• Purines/pyrimidines : 10 mg/L
• a.a. : 50 mg/L
• agents réducteurs : 250 à 500 mg/L
• agar : 1,5 g/L