Chapitre 2. Combler les besoins nutritionnels des bactéries Flashcards
Qui est considéré comme le père des milieux de culture?
Robert Koch qui réussit à isoller B. anthracis avec le sérum de boeuf stérile et d’humeur aqueuse d’oeil de vache, et qui émit son postulat en 1882. Il a aussi été lke premier à proposer la gélatine pour oslidifer les milieux de culture
Pourquoi la gélatine est-elle peu propice à la culture bactérienne?
Parce qu’elle devient liquide à 25 degrés celsius et que la plupart des bactéries ont une température optimale de croissance plus élevée que 25 degrés celsius
Quel est l’objectif premier dans la préparation d’un milieu de culture?
Procurer un mélange bien balancé des nutriments rquis qui permettreont une croissance optimale du microorganisme recherché.
Est-il une bonne idée de mettre les nutriments essentiel en excès?
Non, car la plupart peuvent devenir inhibiteur ou toxiques en excès.
Vrai ou faux? Les microorganismes sont capables d’utiliser une diversité infinie de sources de carbones.
Vrai (on ne connait aucune molécule organique qui ne puisse pas être dégradé par des bactéries)
Quel sucre est le plus utilisé par les bactéries hétérotrophes?
Le glucose
Peut-on se servir de la source de carbone comme agent sélectif?
Oui, car certaines sources de carbones sont uniquement dégradables par certaines bactéries.
Comment est rajouté une source d’azote dans les milieu synthétique? Et les milieux complexes?
Milieu synthétique : sels azotés (ex. NH4CL, KNO3)
Milieu complexes : hydrolysats (ou peptones) et extraits
Quelles sont les deux types d’hydrolyses utilisés pour la fabrication de peptones?
L’hydrolyse acide ou enzymatiques
Quels sont les trois types de matières premières utilisées pour la fabrication de peptones?
1 - Origine animale : organes, muscles
2 - Origine laitière : caséine acide, lactosérum
3 - Origine végétale : soja, coton, maïs, fève, blé
Que permet l’ultrafiltration des peptones?
Séparer/concentrer les consitituants des solutions de protéines basé sur le poids moléculaire (membrane séparant à 10 kDa) : on l’utiliser pour créer un produit à faible teneur en endotoxine (utile en pharmacie, par exemple)
Vrai ou faux? Les hydrolysats enzymatiques conservent mieux la valeur nutritive de la source originale de protéine que les hydrolysats acides.
Vrai, l’hydrolyse acide détruit généralement complètement le trp et souvent la ser et la thr, et le contenu en vitamine.
Quel est la particularité de l’hydrolysat de soja?
Elle contient beaucoup de sucres, donc est à proscrire dans un milieu où l’on cherche à contrôler le sucre.
À quoi sert les extraits? Quelle est leur particularité en les comparant avec les peptones?
Ils servent comme source d’azote et de carbone, et contiennent une teneur élevée en sucre ce qui peut fausser les résultats dans les études d’utilisation des sucres.
Comment sont ajoutés les minéraux dans les milieux de cultures synthétiques et complexes?
- Milieu synthétique : ajoutés sous forme de sels inorganiques (MgCL2, KH2PO4, CaCl2, NaCL)
- Milieu complexe : présents dans les hydrolysats, extraits et suppléments
Quels rôles peuvent être joués par les minéraux dans un milieu de culture?
Éléments nécessaire à la croissance et tampons
Quels sont les tampons les plus utilisés en culture?
Les tampons phosphates
Qu’est-ce qu’un supplément dans un milieu de culture?
Des facteurs de croissance de quantité indéfinies et dont la composition n’est pas nécessairement connue qui sont rajoutés au milieu de culture pour faire croître les bactéries qui y sont souvent associées (ex. extraits de sol pour bactéries du sol, lait écrémé pour bactéries laitières, jus de fruits ou tomates pour bactéries lactiques de matière végétales)
Quel est l’agent solidifiant le plus souvent employé en microbiologie et pour quelles raisons?
L’agar : extrait d’un groupe d’algues marines rouges
1. Bonne transparence dans les formes solides/gel (permet l’identification des colonies)
2. Résistance constante pour résister aux striations sans nuire aux caractéristiques de diffusion
3. Gélification à 32 à 40 degrés celsius et fusion à environ 85 degrés celsius
4. Absence de produits chimiques utilisables métaboliquement
5. Teneur faible et régulière en groupes électronégatifs
6. Absence de substances toxiques
7. Absence de substances hémolytiques
8. Absence de contamination par spores thermophiles
Nommez deux autres agents solidifiants utilisés que l’agar et dans quel conterxte?
Gel de silice : absence totale de produits organiques - permet la croissance des bactéries autotrophiques
Gomme gélane : Gel thermostable utilisé pour la croissance de microorganismes à températures de 120 degrés celsisus et pressions de 265 atm.
Quelle sont les grandes catégories de milieux de culture et leur différences?
Les milieux synthétiques et complexes.
Les milieux synthétiques ont une composition connue et donc plus contrôlés, qui permet d’effectuer des études métaboliques.
Les milieux complexes utilisent des peptones, extraits et suppléments dont la composition n’est pas définie.
Quels sont les 4 catégories de milieux de cultures en fonction de leur usage?
- Milieux d’enrichissement : toujours liquides, stimulent la croissance d’un microorganisme ou inhibe/tue des microorganismes indésirable
- Milieux séléctifs/électifs : contient un ou des produits qui inhibent le développement des microorganismes indésirables et pas celui de la bactérie que l’on tente de d’isoler
- Milieux différentiels : permettent de mettre en évidence une propriété particulière d’un microorganisme (ex. hemolyse, production d’acide, etc.)
- Milieux de transport : pas des milieux de cultures, permettent seulement de préserver l’intégrité des microorganismes entre le prélèvement et la mise en culture
Quel est le but d’un milieu d’enrichissement?
Il est utilisé quand la bactérie à isoler est minoritaire dans le sol : elle lui confère un avantage qui lui permet de prendre le dessus sur les autres bactéries en compétition avec elle.
Quels effets visent à retarder les milieux de transport (4)?
- Dessiccation de l’échantillon
- Modification du pH
- Perte des anaérobies (contient des agents réducteurs)
- Croissance des bactéries commensales
Dans quel ordre de grandeur est ajouté chacun des éléments suivants?
* Sucres
* Hydrolysats/extraits
* Sels/ions
* Vitamines
* Purines/pyrimidines
* a.a.
* agents réducteurs
* agar
- Sucres : g/L
- Hydrolysats/extraits : g/L
- Sels/ions : ng à g/L (de traces à NaCl)
- Vitamines : mg/L
- Purines/pyrimidines : 10 mg/L
- a.a. : 50 mg/L
- agents réducteurs : 250 à 500 mg/L
- agar : 1,5 g/L
