chap 1 Flashcards

1
Q

quels sont les 3 elements définissant la qualité d une image ?

A
  • grossissement ( rapport taille objet/image)
  • contraste ( difference entre densité la plus forte et la plus faible )
  • resolution (taille du pixel)
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Q

qu est ce que la résolution?

A

distance minimale qui doit séparer deux objets pour qu ils apparaissent distincts

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3
Q

par quoi un microscope est il caractérisé ?

A

par sa résolution

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4
Q

qu est ce qu une lentille convergente ?

A

loupe, sa forme fait converger la lumière en un point

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5
Q

qu est ce que la distance focale ?

A

distance entre lentille et point vers lequel converge la lumiere

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6
Q

que nous permet de déterminer la distance focale ?

A

si la lentille est tres grossissante ou non

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7
Q

qu est ce qui fait que l image de l objet se trouvant derrière la loupe se trouve elle meme derrière l objet ?

A

la lentille a déplacée les faisceaux lumineux

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8
Q

qu est ce qu un microscope composé?

A

formé d au moins 2 lentilles convergentes –> multiplication des effets grossissants entres eux

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9
Q

quel est le probleme de l association de plusieurs lentilles ?

A

imperfection des differentes lentilles s additionnent

–> aberrations chromatiques, ne devie pas toutes les longueurs d ondes de la meme façon

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10
Q

qu est ce qu un microtome ?

A

objet permettant de faire des coupes tres fines

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11
Q

quelle a été la solution face aux aberrations chromatiques ?

A

lentille achromatique –> peu sensible aux différentes longueurs d ondes

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12
Q

qu est ce qu un verre Chrown?

A

classique–> verre qui fait converger la lumiere

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13
Q

qu est ce qu un verre Flint ?

A

special, prorates differentes–> ne dévie pas les differentes lumiere comme le chrown

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14
Q

que se passe t il si on met un Chrown suivi d un Flint ?

A

la deuxième lentille corrige les défauts de la première –> fait tout converger au meme point

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15
Q

quel est le constituant principal d un etre vivant ?

A

cellule

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16
Q

comment calcul t on la limite théorique d un microscope optique ?

A

resolution optimale = lambda/2–> moitié de la longueur d onde

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17
Q

si on grossi un objet, cela nous permet il de gagner en resolution ?

A

NON

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18
Q

quelle est la meilleure résolution d un microscope optique ?

A

200nm

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19
Q

quel est le principe d un microscope électronique ?

A

objet éclairé avec faisceau d électrons puis on compte les électrons qui sont passe a travers la lentille électromagnétique

20
Q

quelle est la resolution d un microscope électronique ?

A

1nm

21
Q

par quoi un faisceau d électron peut il etre arrêté ?

A

par de l air –> pas possible de regarder des cellules vivantes

22
Q

quelle doit etre la largeur de la coupe pour que le faisceau d electron passe sans etre absorbé ?

A

100nm–> coupes extra fines

23
Q

quelle est la source de la miscroscopie optique ? électronique ?

A

optique : photons

électronique : électrons

24
Q

avec quel microscope peut on observer ds cellules vivantes ?

A

optique

25
Q

quelle largeur les coupes doivent elles faire pour que les photons passent a travers ?

A

10-20µm

26
Q

pourquoi le microscope optique est il plus pratique ?

A

plus simple, rapide et moins couteux, meme si moins bonne resolution

27
Q

qu est ce que le fractionnement cellulaire ?

A

on exerce une force mécanique sur une cellule pour la “casser” puis centrifugation pour séparer les compartiments

28
Q

dnas la centrigfuation, qu est ce que le surnageant et le culot ?

A

surnageant–> proteines libres

culot = compartiments au fond

29
Q

en fonction de quoi sont séparés les compartiments ?

A

en fonction de leur densité

–> visible grace au gradient de sucrose

30
Q

grace a quoi se fait l immunodetection ?

A

anticorps

31
Q

comment proceed t on si l on veut détecter une proteine au milieu d un mélange complique de proteines ?

A

on injecte a un lapin des anticorps qui reconnaissent spécifiquement cette proteine –> devient immun a cette proteine

32
Q

comment trouver un anticorps ?

A

immunofluoresence directe ou indirecte

33
Q

premiere etape de l immunofluoresence directe ?

A

fixation–> on transforme le milieu liquide en gel ( oeuf dur )

34
Q

deuxième etape de l immunofluoresence directe ?

A

permeabilisation ( saponine)–> faire des trous dans la membrane pour laisser passer des anticorps

35
Q

troisième etape de l immunofluorescence directe ?

A

anticorps fluorescents–> diffuse partout dnas la cellule , se lie a la proteine et donc on peut l observer

36
Q

quatrième etape de l immunofluroescence directe ?

A

observation –> illumination avec une certaine longueur d onde –> proteine fluorescente réemet une longueur d onde plus forte –> localisation de la proteine dans la gelée ( cellule )

37
Q

qu est ce que l. immunofluorescence indirecte

A

au lieu de mettre directement l anticorps, on utilise deux anticorps qui reconnaissent la proteine

38
Q

comment fonctionne l immunofluorescence indirecte ?

A

anticorps primaire reconnait proteine d intérêt du lapin, puis on utilise un anticorps de chèvre qui reconnait tous les ac du lapin, dejamarque en fluorescence par partie constante
–> ne necessite pas de marquage

39
Q

comment peut on amplifier le signal ?

A

en utilisant des ac secondaire car plusieurs secondaires se lient a un primaire–> signal plus fort

40
Q

qu est ce que la double immunofluorescence indirecte ?

A

meme principe mais Avec 2ac qui reconnaissent soit proteines X ou Y–> repérer 2 protéines dnas la meme cellule pour voir si sont au meme endroit ou non

41
Q

comment fonctionne la double immunofluorescence indirecte ?

A

1 ac de lapin qui reconnait X et 1 ac secondaire de chèvre qui reconnait lapin–> lumiere rouge
1 ac de souris qui reconnait Y et ac chèvre qui reconnait souris –> lumiere verte

42
Q

pourquoi la fluorescence ne se voit pas en microscopie électronique ?

A

pas de photons

donc pour voir cela avec immunofluorescence on accroche des particules d or –> métaux lourds arrêtent les électrons

43
Q

qu est ce que la microscopie confocale ?

A

concentration de la lumiere a un oint de l échantillon –> si fluorescence, émet de la lumiere rouge, sinon pas de lumiere

44
Q

qu est ce qu un voxel?

A

pixel en 3D

45
Q

qu est ce que GFP?

A

proteine responsabile notamment de la fluorescence sur les méduses –> permet de rende une proteine fluorescente
absorbe vers 395 nm et renvoie vers 475nm