Biothechnologies Flashcards
L’extraction d’ADN se déroule en deux principales étapes. Quelles sont ces étapes ?
- lyses des cellules et élimination des protéines
2. la concentration de la solution d’ADN
que veut dire lyser les cellules
éclatement de la cellule = mort de la cellule
quelles structures cellulaires sont attaquées par le tampon de la lyse
membrane plasmique et nucléaire
pourquoi ajoute-t-on de la solution saline 6M
permet de précipité les protéines dégradées et les retirer de l’échantillon par centrifugation
quel produit permet de concentrer la solution d’ADN (par précipitation de l’ADN)
isopropranol
quelle micropipette devrait être utilisée afin de mesurer un volume de 485 uL
P-1000
énumérer ce que contient le tube de 1.5 mL avant l’étape d’incubation
- 485 uL tampon d’extraction sain SDS
- 8 uL de protéine K
- poisson
structure ciblées par le tampon d’extraction salin-SDS
membrane plasmique
membrane nucléaire
structure ciblées par la protéinase K
ADN
Histone
Quel est le rôle général de la technique de l’électrophorèse ?
pour identifier des fragments d’ADN découpés par des enzymes, pour identifier un gène ou pour établir des empreintes génétiques
quels sont les rôles des colorants marqueurs ?
- voir la progression de l’électrophorèse et d’arrêter la progression de celle-ci avant que les autres substances en migration n’est quitté le gel. Il sert également de témoin afin d’établit une droite d’étalonnage.
nommer les facteurs qui influencent de facon importante la migration des molécules vers une électrode donnée ?
la taille, leur charge dans un champ électrique
une fois l’électrophorèse terminée, ou sont les fragment
a) les plus grand
b) les plus petit
a) près des puits
b) loin des puits
quel est le rôle d’une droite d’étalonnage dans une électrophorèse ?
Déterminer la taille moléculaire d’autres substances inconnues en migration sur le même gel.
dans la technique de l’ACP (amplification en chaîne par polymérase), à quelle température doit-on chauffer la solution d’ADN pour s’assurer que toutes les mol.cules soient dénaturées (séparées)
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quelle étape du cycle de manipulations se produit à une température de 72
élongation
quelle est l’utilité de l’ADN polymérase (taq) dans l’étape mentionnée en 2
synthèse des nouveaux brins
si une molécule d’ADN (bicaténaire) est amplifiée, combient devrait-on retrouver de molécules (d’ADN bicaténaire) dans la solution après 3 cycles
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expliquer comment, pour l’analyse d’un même gène, deux individus ou encore deux espèces peuvent pas avoir les mêmes patrons d’empreintes génétiques
- chaque individu a deux allèles de chaque gènes
- variation dans la séquence des nucléotides (sites polymorphiques)
- les enzymes de coupent pas l’ADN toujours au même endroit
donner deux applications courrantes de la technique de l’empreinte génétiques
- discriminer des individus pour des raisons d’ordre criminel ou de recherche de paternité
- classifier différente espèces en fonction de leur degré de parenté
pour obtenir des empreintes génétiques par la technique PTFR, on utilise des enzymes de restriction. Quel est leur rôle ?
elles reconnaissent des séquences d’ADN très spécifique pour couper l’ADN à des endroits très précis.
Quelle méthode permet de multiplier l’ADN afin d’effectuer plusieurs analyses différentes sans risquer d’épuiser l’échantillon de départ ?
Amplification d’ADN en chaîne par polymérase (ACP/PCR)
Pourquoi le père et l’enfant n’ont-ils pas les deux même bandes ?
parce que nous sommes des êtres diploïde, donc le père ne donne que la moité de ses chromosomes. Ce n’est pas deux personnes identitques.
quelqu’un ne présentant qu’une seule grosse bande veut dire quoi et résultat à partir d’un seul spermatozoide
2 fragments de même taille, donc ils ont migré au même endroit (personne homoygote pour cet allèle)
on verrait qu’une seule bande puisqu’il n’y aurait pas la bande du chromosome homozygote
expliquez ce que l’on entend par rechercher d’exclusion de paternité
chercher à exclure des pères possibles et non à déterminer qui est le père
charge de l’ADN
NÉGATIF
quesqui influence le nombre de bande observée pour chaque spécimen
nombre de coupure effectué par les enzymes
