Biothechnologies

Question 1

L’extraction d’ADN se déroule en deux principales étapes. Quelles sont ces étapes ?

Answer 1

1. lyses des cellules et élimination des protéines

2. la concentration de la solution d’ADN

Question 2

que veut dire lyser les cellules

Answer 2

éclatement de la cellule = mort de la cellule

Question 3

quelles structures cellulaires sont attaquées par le tampon de la lyse

Answer 3

membrane plasmique et nucléaire

Question 4

pourquoi ajoute-t-on de la solution saline 6M

Answer 4

permet de précipité les protéines dégradées et les retirer de l’échantillon par centrifugation

Question 5

quel produit permet de concentrer la solution d’ADN (par précipitation de l’ADN)

Answer 5

isopropranol

Question 6

quelle micropipette devrait être utilisée afin de mesurer un volume de 485 uL

Answer 6

P-1000

Question 7

énumérer ce que contient le tube de 1.5 mL avant l’étape d’incubation

Answer 7

• 485 uL tampon d’extraction sain SDS
• 8 uL de protéine K
• poisson

Question 8

structure ciblées par le tampon d’extraction salin-SDS

Answer 8

membrane plasmique

membrane nucléaire

Question 9

structure ciblées par la protéinase K

Answer 9

ADN

Histone

Question 10

Quel est le rôle général de la technique de l’électrophorèse ?

Answer 10

pour identifier des fragments d’ADN découpés par des enzymes, pour identifier un gène ou pour établir des empreintes génétiques

Question 11

quels sont les rôles des colorants marqueurs ?

Answer 11

• voir la progression de l’électrophorèse et d’arrêter la progression de celle-ci avant que les autres substances en migration n’est quitté le gel. Il sert également de témoin afin d’établit une droite d’étalonnage.

Question 12

nommer les facteurs qui influencent de facon importante la migration des molécules vers une électrode donnée ?

Answer 12

la taille, leur charge dans un champ électrique

Question 13

une fois l’électrophorèse terminée, ou sont les fragment

a) les plus grand
b) les plus petit

Answer 13

a) près des puits

b) loin des puits

Question 14

quel est le rôle d’une droite d’étalonnage dans une électrophorèse ?

Answer 14

Déterminer la taille moléculaire d’autres substances inconnues en migration sur le même gel.

Question 15

dans la technique de l’ACP (amplification en chaîne par polymérase), à quelle température doit-on chauffer la solution d’ADN pour s’assurer que toutes les mol.cules soient dénaturées (séparées)

Answer 15

95

Question 16

quelle étape du cycle de manipulations se produit à une température de 72

Answer 16

élongation

Question 17

quelle est l’utilité de l’ADN polymérase (taq) dans l’étape mentionnée en 2

Answer 17

synthèse des nouveaux brins

Question 18

si une molécule d’ADN (bicaténaire) est amplifiée, combient devrait-on retrouver de molécules (d’ADN bicaténaire) dans la solution après 3 cycles

Answer 18

8

Question 19

expliquer comment, pour l’analyse d’un même gène, deux individus ou encore deux espèces peuvent pas avoir les mêmes patrons d’empreintes génétiques

Answer 19

• chaque individu a deux allèles de chaque gènes
• variation dans la séquence des nucléotides (sites polymorphiques)
• les enzymes de coupent pas l’ADN toujours au même endroit

Question 20

donner deux applications courrantes de la technique de l’empreinte génétiques

Answer 20

• discriminer des individus pour des raisons d’ordre criminel ou de recherche de paternité
• classifier différente espèces en fonction de leur degré de parenté

Question 21

pour obtenir des empreintes génétiques par la technique PTFR, on utilise des enzymes de restriction. Quel est leur rôle ?

Answer 21

elles reconnaissent des séquences d’ADN très spécifique pour couper l’ADN à des endroits très précis.

Question 22

Quelle méthode permet de multiplier l’ADN afin d’effectuer plusieurs analyses différentes sans risquer d’épuiser l’échantillon de départ ?

Answer 22

Amplification d’ADN en chaîne par polymérase (ACP/PCR)

Question 23

Pourquoi le père et l’enfant n’ont-ils pas les deux même bandes ?

Answer 23

parce que nous sommes des êtres diploïde, donc le père ne donne que la moité de ses chromosomes. Ce n’est pas deux personnes identitques.

Question 24

quelqu’un ne présentant qu’une seule grosse bande veut dire quoi et résultat à partir d’un seul spermatozoide

Answer 24

2 fragments de même taille, donc ils ont migré au même endroit (personne homoygote pour cet allèle)

on verrait qu’une seule bande puisqu’il n’y aurait pas la bande du chromosome homozygote

Question 25

expliquez ce que l’on entend par rechercher d’exclusion de paternité

Answer 25

chercher à exclure des pères possibles et non à déterminer qui est le père

Question 26

charge de l’ADN

Answer 26

NÉGATIF

Question 27

quesqui influence le nombre de bande observée pour chaque spécimen

Answer 27

nombre de coupure effectué par les enzymes