aula 4 Flashcards

1
Q

Q: Quais são os sinónimos de anticorpos?

A

A: Imunoglobulinas e gamaglobulinas.

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Q

O que são anticorpos?

A

São glicoproteínas complexas capazes de se ligar especificamente a um só epítopo.

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3
Q

Onde se encontram os anticorpos?

A

Na superfície das células B (como recetores) e em circulação (produzidos por plasmócitos).

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4
Q

onde sao produzidos os anticorpos circulantes

A
  • Os anticorpos circulantes são produzidos pelos plasmócitos em resposta à presença de substâncias reconhecidas como estranhas pelo sistema imunológico.
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5
Q

Os anticorpos de membrana e os solúveis têm a mesma especificidade?

A

Sim, apesar de ligeiramente diferentes, partilham a mesma especificidade antigénica.

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6
Q

O que é o paratopo?

A

É o local do anticorpo que se liga especificamente ao epítopo do antigénio.

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7
Q

Que estruturas podem os anticorpos identificar?

A

A: Proteínas, polissacáridos, células, organitos, tecidos, microrganismos…

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8
Q

Q: O que é especificidade num anticorpo?

A

Capacidade de reconhecer e ligar-se exclusivamente a um determinado antigénio

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9
Q

Q: E afinidade?

A

A: Força de ligação entre o anticorpo e o antigénio.

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10
Q

o que sao Imunoglobulinas

A
  • É uma classe de proteínas que possuem atividade de anticorpo, tem uma conformação em Y que é caracteristica;
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11
Q

Q: Qual é a estrutura básica das imunoglobulinas?

A

Constituída por quatro cadeias polipéptidas - duas cadeias leves idênticas e duas cadeias pesadas também idênticas, que se unem através de ligações dissulfúricas (garante a estabilidade estrutural do Anticorpo) wm forma de Y

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12
Q

Q: Que regiões formam a imunoglobulina?

A

A: Região constante (CL, CH1, CH2, CH3) e região variável (VL, VH).

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13
Q

funçao da regiao constante

A

(determina o tipo de imunoglobulina e desencadeia a resposta imune especifica

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14
Q

funçao da regiao variavel

A

reconhece e liga ao antigenio).

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15
Q

Q1: Quantos domínios têm as cadeias leve e pesada de um anticorpo?

A

A1: A cadeia leve tem 2 domínios e a cadeia pesada tem 4 domínios.

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16
Q

Q2: Como se chamam as regiões variáveis e constantes das cadeias leve e pesada dos anticorpos?

A

Variáveis: VL (leve), VH (pesada)

Constantes: CL (leve), CH1, CH2, CH3 (pesada)

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17
Q

Q3: Qual a função das regiões variáveis VL e VH?

A

A3: São as zonas de ligação ao antigénio, determinando a especificidade e afinidade do anticorpo.

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18
Q

funçao da CH1,CH2 ,CH3

A

últimas responsáveis por definir o tipo de imunoglobulina e o mecanismo utilizado para eliminar o antígeno.

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19
Q

O que são as CDRs nas imunoglobulinas?

A

São regiões determinantes da complementaridade — 3 zonas hipervariáveis na sequencia de aminoacidos DAS REGIOES VARIAVEIS. Estas diferem em tamanho e sequência entre anticorpos e que conferem especificidade e afinidade ao anticorpo.

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20
Q

Q5: O que resulta da ação da enzima papaína sobre um anticorpo?

A

A papaína corta a molécula antes das ligações dissulfídicas, em dois fragmentos monovalentes Fab (fragment antigen binding), que mantêm a capacidade de ligação ao antígeno, e um fragmento Fc (fragment crystallisable), que não possui essa capacidade e tende a cristalizar facilmente.

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21
Q

Q6: O que resulta da ação da enzima pepsina sobre um anticorpo?

A

Um fragmento F(ab’)₂ (bivalente e funcional) e pequenos peptídeos da porção Fc.

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22
Q

funçao do porção F(ab ́)2

A

capacidade de ligação ao Ac e cristalização e pequenos peptideos da porção Fc\

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23
Q

Q: O que acontece quando a pepsina hidrolisa uma imunoglobulina?

A

A pepsina corta a porção Fc após as ligações dissulfúricas, formando uma porção F(ab’)₂ funcional e pequenos peptídeos da porção Fc.

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24
Q

Q: Qual a importância da ação da pepsina na imunoglobulina?

A

Reduz ligações inespecíficas da porção Fc com os tecidos, preservando a porção F(ab’)₂ bivalente, capaz de ligar ao antigénio.

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25
Q: Qual a função da região “hinge” (dobradiça) das imunoglobulinas?
A: Permite ajuste do ângulo dos braços do anticorpo, facilitando ligação a múltiplos antigénios e aumentando a eficácia imunológica.pois possibilita a ligação eficiente a diferentes patógenos, facilitando sua neutralização e eliminação pelo sistema imunológico.
26
Q: Quais são as duas classes de cadeias leves nas imunoglobulinas determinadas pela sequência de aminoácidos na região constante:?
A: Cadeia Kappa (κ) e Cadeia Lambda (λ).
27
Q: Qual a proporção de cadeias leves Kappa e Lambda no ser humano?
A: 65% Kappa e 35% Lambda.
28
Q: Quais são as classes de cadeias pesadas das imunoglobulinas?
A: Gamma (IgG), Alpha (IgA), Miu (IgM), Delta (IgD), Epsilon (IgE).
29
Q: Qual é a imunoglobulina mais abundante no sangue e que atravessa a placenta?
IgG
30
capacidade do igg
É a Ig com maior capacidade de difusão, sendo a primeira responsável pela neutralização imediata das toxinas bacterianas e pela promoção da fagocitose.
31
tipos de igg
- IgG1 - Gamma 1 - IgG2 - Gamma 2 - IgG3 - Gamma 3 - IgG4 - Gamma 4
32
Q: Onde atua principalmente a IgA?
Existe nas secreções seromucosas como saliva, lágrimas, suor, corrimento nasal ou secreções gastrointestinais, onde possui funções de defesa contra o ataque por microorganismos.
33
tipos de igA
- IgA1 - Alpha 1 - IgA2 - Alpha 2
34
Q: Qual a primeira imunoglobulina produzida numa infeção?
A: IgM – com alta avidez, eficaz na aglutinação de patógenos.
35
Qual imunoglobulina está presente em pequenas quantidades no sangue e atua em linfócitos?
A: IgD – com função de ativador/inibidor e estana superficie dos linfocitos.
36
Q: Qual imunoglobulina está associada a reações alérgicas e parasitas?
IgE – liga-se a mastócitos e basófilos, promovendo libertação de histamina.
37
Q: O que é um antigénio?
substância (>8 kDa) que pode induzir uma resposta imunitária e ligar-se a anticorpos produzidos pelo organismo. Esse reconhecimento leva à formação do complexo Ag-Ac, que desempenha um papel essencial na neutralização e eliminação de microrganismos patogénicos..
38
comoposiçao dos antigenios
Os antigénios podem ser compostos por proteínas, lípidos, hidratos de carbono ou ácidos nucleicos e possuem na sua superfície epítopos
39
Q: O que são epítopos?
A: Regiões específicas dos antigénios onde os anticorpos se ligam.Esses epítopos podem ser sequências completas ou fragmentos de proteínas ou polissacarídeos.
40
o que precisa de se fazer para que a molecula atue como antigenio de forma indeendente
* Para que uma molécula atue como antigénio de forma independente, precisa ter um peso molecular superior a 8 kDa. Se substâncias de baixo peso molecular podem ligar-se a moléculas com um peso molecular superior (os chamados haptenos), e desempenhar as funções de antigénio.
41
Q: O que são imunogénicos?
Antigénios (naturais ou sintéticos) capazes de induzir produção de anticorpos.
42
Q: Vantagem e desvantagem dos antigénios sintéticos?
Vantagem: sequência conhecida. Desvantagem: podem não imitar a estrutura 3D nativa.o que pode resultar em falsos negativos se os anticorpos gerados não reconhecerem corretamente o antigénio em condições reais.
43
Q: O que são haptenos?
Substâncias de baixo peso molecular que só são imunogénicas quando ligadas a proteínas transportadoras.Após a resposta imunitária inicial, os anticorpos formados podem reagir diretamente com os haptenos livres, mesmo que não estejam ligados a uma proteína.
44
Q: O que são antigénios exógenos?
Substâncias externas (como bactérias e toxinas) que provocam resposta imune.
45
Q: O que são antigénios endógenos?
: Presentes naturalmente no organismo nos animais superiores e normalmente não desencadeiam uma resposta imunitária, pois são reconhecidos como próprios pelo sistema imunitário.
46
Q: O que são auto-antigénios (autólogos)?
Antigénios do próprio organismo e habitualmente não imunogénicos que só provocam resposta em doenças autoimunes.
47
Q: O que são alo-antigénios?
A: Presentes em diferentes indivíduos da mesma espécie (ex: grupos sanguíneos).
48
Q: O que são hetero-antigénios (xenogénicos)? Q: O que são hetero-antigénios (xenogénicos)?
Antigénios presentes em espécies diferentes. A sua existência permite preparar os imunossoros específicos para moléculas humanas a partir de coelhos, ratos, cabras, porcos, etc.
49
O que são epítopos e quais propriedades conferem?
Epítopos (ou determinantes antigénicos) conferem: * Imunogenicidade – capacidade de induzir resposta imunitária * Reatividade específica – capacidade de se ligar especificamente a anticorpos
50
Frente: Que tipo de ligações formam o complexo Ag-Ac?
A ligação entre um antigénio (Ag) e um anticorpo (Ac) não é covalente, mas sim mantida por um conjunto de forças físico-químicas fracas, que juntas conferem estabilidade e especificidade ao complexo Ag-Ac: -forças eletrostáticas (NH3⁺ - COO⁻) * Pontes de hidrogénio * Interações hidrofóbicas (~50% da força total) * Forças de Van der Waals
51
Q: O que são forças eletrostáticas no complexo Ag-Ac?
A: Atração entre iões com cargas opostas (NH₃⁺ - COO⁻). um átomo doa um eletrão, devido à sua baixa eletronegatividade, formando um ião positivo ou catião. O elemento recetor adquire então carga negativa tornando-se um anião
52
Q: O que são pontes de hidrogénio na ligação Ag-Ac?
interações fracas e reversíveis entre grupos hidrofílicos OH, NH2 e COOH e que ajudam a estabilizar a ligação.
53
Q: Qual o papel das interações hidrofóbicas na ligação Ag-Ac?
Responsáveis por ~50% da força total da interação Ag-Ac, promovem associação entre regiões apolares e afastam a água.
54
Q: O que são forças de Van der Waals?
Forças intermoleculares,A: Atração fraca entre dipolos induzidos por nuvens de eletrões próximas.podendo assim os dois dipolos estabelecer uma força de atração entre eles
55
Q: O que é afinidade num imunossoro?
Força entre parátopo (Ac) e epítopo (Ag), depende da complementaridade tridimensional, altamente especifica.Medida por Ka (ex: IgM ~10⁷ M⁻¹, IgG ~10⁹ M⁻¹).
56
o que requer a ⁻¹). A medição das constantes de afinidade Ka
⁻¹). A medição das constantes de afinidade Ka requer antigénio e anticorpo purificados, o que no caso destes últimos só é possível com soros monoclonais.
57
Q: O que é avidez e como difere da afinidade?
Avidez é a força global da ligação entre Ag e vários Ac presentes num soro policlonal
58
Q: Por que as IgM têm alta avidez mesmo com baixa afinidade?
apesar de apresentarem baixa afinidade, são pentâmeras e, por isso, conseguem formar várias ligações simultâneas com o antigénio, conferindo-lhes uma avidez comparável à das IgG, que são monoméricas mas com alta afinidade
59
Q: De que fatores depende a taxa de reação Ag-Ac?
* Fixação * Concentração do anticorpo * Temperatura ambiente
60
o que implica os periodos curtos de incubvaçao
Períodos curtos de incubação implica uma resposta de ligação mais rápida entre o anticorpo e o antigenio, que depende diretamente da velocidade de reação do anticorpo e da sua concentração.
61
Q: Como reduzir o tempo de incubação?
A: Aumentar 2–3x a concentração do Ac primário ou secundário → tempo reduzido (ex.: 30 min → 90 seg).
62
Q: O que observar na receção de anticorpos?
* Forma de armazenamento * Data de validade * Nº do lote * Data de receção * Referência do Guia/Fatura
63
Q: Como armazenar anticorpos?
Pré-diluídos: 4–8 °C * Concentrados: 4–8 °C ou -20 °C (aliquotas de forma a evitar multiplos ciclos de congelação e descongelação)
64
Q: Como evitar contaminações ao usar anticorpos?
usar pontas de pipetas descartáveis, usar tubos diluição não reutilizáveis e recolocar soros após utilização armazenando de forma adquada
65
Q: Quais cuidados evitar durante o uso?
Exposição a altas temperaturas * Luz excessiva * Uso após validade
66
Q: Qual a diluição típica para anticorpos?
Monoclonais: 1:5 a 1:1000 * Policlonais: 1:100 a 1:2000
67
Q: Como se faz uma diluição 1:10?
A: Misturar 1 parte de soro + 9 partes de tampão → 10 partes totais.
68
Q: Quanta solução usar por secção?
A: 0,1 a 0,4 mL de anticorpo já diluído.
69
Q: Como a titulação e temperatura influenciam a incubação?
A: Maior titulação ou temperatura → menor tempo de incubação.
70
Q: Qual a duração típica da incubação de soros primários?
A: 1,5 min a 48 h (mais comum: 20–30 min).
71
Q: Qual o risco de incubação muito prolongada?
A: Saturação do antigénio → menor eficácia na marcação.
72
Q: Quais as condições ideais de incubação?
Temperatura: 4 °C a 37 °C, pH 7.6 * Usar câmara húmida → evita evaporação