Apoptose en necrose

Question 1

Extrinsieke apoptose-signalisatieweg

Answer 1

1. FAS -> FADD = DISC = Death Inducing Signaling Complex
   killer/cytotoxische killelymfocyt bindt FAS-receptor (trimeer) via FAS-ligand op plasmamembraan <=> conformatiewijziging receptor <=> adaptoreiwitten = FADD (Fas Associated Death Domain) <=> procaspase 8
   LET OP: receptor en FADD bevatten beide DD die interageren, FADD bevat hiernaast DED (death effector domain) dat interageert met prodomein
2. TNF = tumor necrosis factor
   TNF - TNF receptor (DD) - (DD)TRADD - FADD - procaspase 8
   -> basically the same met TRADD (TNF associated death domain)

Question 2

DISC-variant bij necroptosis

Answer 2

TRADD/FADD inhibeert nu procaspase 8 <-> necrosoom actief = gereguleerde necrose

Question 3

Intrinsieke apoptose signalisatieweg

Answer 3

DNA-schade/gebrek GF/UV.. <=> depolarisatie buitenste membraan mitochondriën <=> cytochroom C vrijstelling in cytosol <=> complex met Apaf1 (apoptose protease activting factor) <=> vorming apoptosoom (via CARD-domeinen + dATP->dADP->dATP/ATP <-> conformatiewijziging) <=> activatie procaspase 9

Activatie bij pro-apoptotisch signaal&raquo_space; IAPs = caspase-inhibitoren

Question 4

Hoe wordt de balans gehouden tss apoptose en survival? Geef een belangrijke genfamilie

Answer 4

Bcl2-familie bevat zowel pro- als anti-apoptotische genen.
Pro-apoptose: inhiberen anti-apaoptose genen en zorgen voor Cyt-C vrijstelling
Anti-apoptose: inhiberen pro-apoptose genen

Answer 5

Kankercellen worden vermeden door apoptose, zo zien we overexpressie anti-apoptose zeer snelle en grote tumorontwikkeling.

overlevingsfactoren (binden RTK receptor tyrosine kinase) -> OP3 -> PIP3 -> kinase PDK1 geactiveert -> activering PKB kinase -> BAD dissociatie waarvan een apoptose inhibitie eiwit

Question 6

virussen en apoptose

Answer 6

Virussen willen leven cel verlengen <-> apoptose inhiberen via caspasen 8, 9 en 3

Question 7

TNF en apoptose: a love story

Answer 7

TNF zorgt mede voor antibacteriële immuunresons: bacteriecomponent -> TLR receptor -> TNF, IL-6,.. = pro-inflammatoire cytokines

TNF in tumor:
TNF inhibeert integrine (αvβ3) (=verbinding tumor-endotheelcel) <=> geen/weinig nutriënten voor tumor <=> sterft af
-> echter weet dat er vele nadelen zijn (verhoogd TNF <=> artritis en darminflammatie, autoimmuunziekten)

Anti-TNF therapeutica voor stoppen inflammatoire problematieken (!!risico bacteriële infecties)

Question 8

Functie ubiquitinatie in inflammatoire en apoptose signaaltransductiewegen?
+ hoe werkt ubiquitinatie

Answer 8

polyubiquitinatie gebeurd via lysine/methionine residuen substraat + E1, E2 en E3 enzymes <=> proteasoom knipt EW/complexvorming (vb effector-EW)

• ubiquitinase kan EW modificeren zodat het effector-EW gerecruteerd kan worden
• EW-interactie enkel mogelijk hierna

Question 9

3 mogelijke uitkomsten TNF

Answer 9

1. NF-kB activatie (celoverleving)
   - TNFR1 activatie -> RIPK1 ubiquitinatie -> rekrutering kinasen TAK1/TAB2/3 + IKK-complex -> TF-kB activatie -> IAPs
2. NF-kB inhibitie (apoptose)
   - IkB-super-repressor inhibeert NF-kB activatie <=> TRADD/FADD/caspase 8 kan nu wel gevormd worden

OPM: FLIP EW is inactief caspase 8 analoog en kan dus anti-apoptotisch werken

3. NF-kB inhibitie + caspase 8 inhibitie
   - geen ubiquitinatie van RIPK1 <-> RIPK1 integreegt zelf in complex met FADD/caspase 8
   dan + caspase 8 inhibitie <-> RIPK1-RIPK3-MLKL complex <=> medieren necrotische celdood