Anatomo-pathologie Flashcards
Anatomopathologie : prélèvement ?
= Liquides, frottis, produis de ponction à l’aiguille, biopsie, pièces opératoires…
- Examen cytologique : prélèvement uniquement de cellules
- Examen histologique : prélèvement de cellules et du tissu de soutien
Anatomopathologie : transmission des prélèvements ?
- Identification du patient sur le contenant
- Feuille de demande d’examen anatomo-pathologique : identifiants du patient, adresse du patient ou du service, nom du médecin préleveur et coordonnées, caractère urgent, nature du prélèvement, siège des échantillons, date et heure du prélèvement, renseignements cliniques pertinents, recherches
particulières demandées - Généralement fixé (évite l’autolyse) : le plus souvent par immersion en formol dilué à 10% tamponné
Prélèvement adressé non fixé
- Demande d’examen extemporané
- Demande de recherche de graisse dans le tissu (l’inclusion paraffine dissout la graisse)
- Demande d’examen en immunofluorescence directe : biopsie cutanée ou rénale
- Tumeur pédiatrique, suspicion de lymphome ou de sarcome : congélation de tissu tumoral frais avant fixation
=> Envoi rapide de l’échantillon frais au laboratoire
Anatomopathologie : cytologie ?
- Mise sur support (lame) : étalement sur lames ou cyto-centrifugation
- Fixation : dessiccation rapide (à l’air), immersion en alcool, pulvérisation de laque
- Coloration après réhydratation
Anatomopathologie : histologie ?
- Fixation : durée variable en fonction du volume
± Dissection avec choix des prélèvements pour les pièces volumineuses (+1 jour de délai) - Imprégnation et inclusion en paraffine : obtention du bloc de paraffine
- Coupe du bloc et mise sur lame (environ 4 um)
- Déparaffinage et coloration de la coupe
=> Prend généralement 1 jour (+ 1 jour si dissection), sauf en cas d’examen extemporané
Anatomopathologie : immunohistochimie ou immunocytochimie ?
= Identification et localisation de protéines sur une préparation grâce à ses propriétés antigéniques
- Sur lames non colorées (lames « blanches ») après déparaffinage éventuel
Immunofluorescence directe
= Réaction de la lame avec un Ac purifié couplé directement à un fluorochrome : surtout pour les dépôts tissulaires d’immunoglobulines et de compléments
- Sur biopsie cutanée ou biopsie rénale congelées
- Observé au microscopie à fluorescence
Méthode immuno-enzymatique indirecte
= Réaction de la lame avec un Ac primaire, révélé par un 2nd Ac couplé à une enzyme : produit de réaction coloré
Anatomopathologie : hybridation in situ ?
= Identification et localisation d’une séquence d’acide nucléique (ARN ou ADN)
- Sondes nucléiques couplées à des traceurs : fluorochrome = FISH ou enzymatique = CISH
- Visualisation par des méthodes identiques à l’immunohistochimie
Anatomopathologie : analyse ?
- Examen au microscope par un médecin anatomo-pathologiste
- Complété éventuellement par d’autres techniques : coloration spéciale, immunohistochimie…
Double lecture :
- Diagnostic difficile : tumeur rare, interprétation équivoque, technique spécialisé…
- Systématique : lymphomes, sarcomes, mésothéliome et tumeurs neuroendocrines rares
- Compte-rendu d’anatomie pathologique
Anatomopathologie : archives ?
=> Les lames et blocs de tissus inclus en paraffine sont conservés au laboratoire
- Sur bloc conservé = étude possible secondairement (jusqu’à plusieurs années après) : étude complémentaire (immunohistochimie, biologie moléculaire…), travaux de recherche
- Les travaux de recherche peuvent également être faits sur les prélèvements congelés conservés
Anatomopathologie : examen extemporané ?
= Examen anatomopathologique réalisé en cours d’intervention (généralement chirurgicale) pour
fournir un résultat général rapide : ≤ 30 minutes
Application :
- Nature tumorale ou non d’une lésion
- Nature bénigne ou maligne d’une tumeur
- Evaluer les limites de résection d’une pathologie tumorale
- Evaluer l’atteinte ganglionnaire
=> Ne doit être demandé que si la réponse a une incidence sur la conduite de l’acte en cours
Technique
- Prélèvement frais adressé immédiatement sans fixation ni sérum physiologique
- Examen histologique sur tissu frais durci par congélation et coupé avec un microtome à congélation, avec coloration rapide de la coupe
Limites
- Réponse non définitive
- Qualité inférieure à la coupe après inclusion en paraffine
=> L’examen extemporané est toujours vérifié par inclusion en paraffine du tissu restant
Anatomopathologie : biologie moléculaire non morphologique ?
= Recherche de clonalité, perte d’hétérozygotie, mutation, réarrangement…
- Diagnostic : lymphome, sarcome…
- Pronostic : recherche d’amplification N-Myc (neurobastome)…
- Thérapeutique : recherche de mutation EGFR (ADK pulmonaire)…
Technique
- Sur prélèvement congelé : meilleur des cas
- Sur prélèvement fixé au formol tamponné sinon : fragmentation de l’ADN extrait
- Effectué systématiquement après contrôle morphologique du prélèvement analysé : s’assurer de la nature tumorale et de la qualité du prélèvement (pourcentages de cellules tumorales, nécrose)
