Absorbans Flashcards
Forklar begrebet Transmittans
Transmission er en måling af den mængde lys, der passerer gennem prøven
Hvornår gælder Lambeert Beers lov ikke og hvorfor?
Når forholdet i standardkurven ikke er lineær.
Sammenhængen mellem koncentration og absorbans er lineær ved lavere koncentrationer.
Ved højere koncentrationer vil lysets refleksion give et andet mønster. Derfor bør prøver som
giver en absorbans på over 1,000 fortyndes før måling.
Ved høje koncentrationer, ligger partiklerne så pakket, at de tilbagekaster lyset
I bliver lig 0 da alt lys er absorberet.
Hvordan er et spektrofotometer opbygget og hvordan virker det?
Hvordan svækkes lyset?
Et spektrofotometer er opbygget af en lyskilde, en monochromator og en detektor.
Lyset fra lyskilden sendes igennem et prisme, som spreder lyskilden ud i et spektrum.
Gitteret: kun lys med den ønskede bølgelængde passerer igennem.
Et display viser absorbans ved den ønskede bølgelængde.
Spektrofotometrets lyskilde sender lys gennem prøven.
Celler, partikler og opløste molekyler gør prøven uklar så lyset svækkes, og spektrofotometrets lyssensor måler denne svækkelse som prøvens absorbans, A
I det ultraviolette spektrum anvendes typisk en deuteriumlampe der producerer lys med en bølgelængde på 110-400 nm.
Hvad sker der på molekylært niveau når et stof absorberer lysenergi?
Ved absorption af synligt lys flyttes elektroner i materialets atomer eller molekyler fra de yderste fyldte elektronskaller til højereliggende tomme elektronskaller.
Ved absorption overføres elektromagnetisk energi til atomerne i molekylerne i prøven, og konverterer disse til en mere energirig tilstand. Denne energi kan afgives igen i form af varme, fluorescens, phosphorescens eller stoffet kan undergå en kemisk ændring.
Når et atom bliver ramt af en foton med den rigtige bølgelængde bliver fotonen absorberet og atomet bliver exciteret. Når atomet udsender denne foton igen kaldes det emission
Hvad er spektrofotometri? Hvad bruger man det til?
Metode til at bestemme en opløsnings absorbans.
• at bestemme stofkoncentrationen i en opløsning
• Opløst stof absorberer lys, så jo større opløsningens stofkoncentration er, jo større er absorbansen
Forklar absorbans, hvornår er A høj?
Har A en enhed?
A = Måling af den mængde lys, der absorberes af prøven.
Absorbansen er et udtryk for, hvor meget lys opløsningen absorberer, når lys med en bestemt bølgelængde sendes igennem opløsningen. Jo mere opløst stof eller jo flere celler, der er i opløsningen, jo større er absorbansen.
Forklar lambert Beers lov og sig udtrykket højt.
A = e * c * l
Den forudsætter, at absorptionen er lineær, dvs. at den absorberede strålingseffekt er proportional med intensiteten. Afvigelser forekommer ved høje intensiteter
Matematiske forhold mellem absorbans og de tre faktorer:
1) Koncentrationen af det absorberende kemiske stof (kromoforen).
2) Lysets rejse hastighed
3) Evne kromoforen har til at absorbere lys. (molære absorptionskoefficient, eller den molære ekstinktionskoefficient).
Hvad er Ekstinktionskoefficienten?
Hvilken enhed?
Ekstinktionskoefficienten er unik for opløsningen., en konstant.
Ekstinktionskoefficienten, ε, dvs. hvor meget de pågældende celler svækker lys ved den målte bølgelængde.
L*cm^-1 mol^-1
Hvad er i0 og it og hvilken sammenhæng har det til transmittant.
hvad er A her?
Io er intensiteten af det indkomne lys mens
It er den lysmængde der ikke absorberes
Brøkdelen af lys transmitteret (It/I0), kaldes transmittansen (T):
Transmissionsintensiteten divideret med kildeintensiteten giver transmittansen af prøven
A = log (i0/iT)
Hvad gør Fluoroforer?
Hvorfor er dette essensielt at exiterer elektroner
Fluoroforer kan absorbere og udsende lys inden for et område af bølgelængder, normalt benævnt absorbans (excitation) og emissionsspektre.
Optager energi i form af stråling og genudsender energien som synligt lys.
Hvad sker der på molekylært niveau når et stof absorberer lysenergi?
Forklar elektron overførsel.
En elektron absorberer en foton med høj energi og bliver løftet til et højere energiniveau.
Elektronen er blevet exciteret.
Systemet henfalder igen til grundniveauet ved udsendelse af en foton.
Den udgående foton vil altid have lavere energi end den indgående foton, dvs den udgående stråling vil altid have længere bølgelængde end den indgående stråling.
