6-RCPG Flashcards
Nommez des exemples de stimuli extracellulaires qui peuvent agir sur les RCPG
Lumière Odorants Ca Petites molécules (aa, nucléotides, peptides) Protéines (hormones)
Décrire la structure des RCPG
7 domaines transmembranaires
N-terminal extracellulaire + 3 boucles
C-terminal intracellulaire + 3 boucles
Quelles sont les 3 étapes du modèle de signalisation des RCPG?
1) Occupation
2) Activation
3) Réponse
Quels sont les ligands des RCPG de classe A et où se logent-ils?
Les ligands sont des petites molécules: monoamines, ACh, Adénosine, opiacés
Les ligands se logent à l’intérieur des domaines transmembranaires (logique, car ils sont petits)
Quels sont les ligands des RCPG de classe B et où se logent-ils?
Ligands sont des hormones peptidiques (glucagon, VIP, calcitonine, PTH, PACAP)
Les ligands sont ‘‘entrappés’’ par le domaine N-terminal globulaire qui contient +++ de ponts disulfures. (permet d’avoir des ligands plus gros qui ne pourraient pas entrer dans domaines trans)
Interactions surtout extracell
Quels sont les ligands des RCPG de classe C et où se logent-ils?
Ligands sont le Glutamate et GABA
Ligands sont capturés par les dimères constitutifs des N-terminaux qui ont une allure de venus fly trap (extracell)
Qu’est-ce qui se produit lors de l’étape d’activation du récepteur?
1) La liaison du ligand repousse les domaines TM3 et TM6 (ch conformation avec TM5)
2) Le mvmt de TM3 et TM6 provoque la séparation des boucles intracellulaires 2 et 3
3) Le récepteur est activé
Qu’est-ce qui se produit lors de l’étape d’activation de la protéine G?
1) La queue C-terminale de alpha se loge dans le creux des boucles 2 et 3
2) Cela permet à la partie hélicase de alpha de se rabattre
3) Ceci libère le site pour l’échange GDP en GTP = permet séparation du dimère beta-gamma
4) N-terminale de alpha devient acylé, ce qui permet interaction avec membrane (se tient)
À quoi sert la technique BRET et comment fonctionne-t-ell?
Permet d’observer la dynamique d’activation des protéines G dans les cellules vivantes via proximité de protéines avec tag lumineux.
Luciférase: donneur d’énergie
GFP: receveur d’énergie
Quand les tags sont proches, GFP peut émettre de la fluorescence.
Qu’est-ce que le ratio BRET?
Fluo GFP / Luminescence luciférase
Ex: Luciférase sur alpha hélicase, GFP sur gamma
Pour une protéine G inactive, à quoi ressemble le ratio BRET?
alpha et gamma proches = bcp de fluo GFP
Donc ratio BRET élevé
Ex: Luciférase sur alpha hélicase, GFP sur gamma
Pour une protéine G active, à quoi ressemble le ratio BRET?
alpha et gamma séparés = peu de fluo GFP
Donc ratio BRET petit
Quelles sont les 2 parties de la sous-unité alpha de la protéine G?
GTPase: hydrolyse GTP en GDP, inactive la protéine G
Hélicase: GDP en GTP, active protéine G
Quelle est la grande distinction entre les réponses cellulaires médiées par la sous-unité alpha vs le dimère beta-gamma?
Ga: effecteurs enzymatiques
Gbg: effecteurs enzymatiques ET canaux
Quels canaux (2) peuvent être modulés par l’activation de protéines Gi/o beta-gamma et quel est l’effet de cette activation sur les canaux?
Kir: canal K activé par Gbg
(Keven est content d’être un bg)
Cav: canal Ca inhibé par Gbg
(Un bg ‘‘cav’’ n’est pas attirant)
Que se passe-t-il lors de l’activation de Galpha s?
1) Gs stimule le domaine membranaire adénylate cyclase
2) Adénylate cyclase produit AMPc
3) AMPc permet de libérer le site catalytique de PKA
4) PKA est activée
Quel est l’effet de la phosphodiestérase sur la signalisation Galpha s?
Arrêt de la signalisation
Phosphodiestérase dégrade AMPc
Que se passe-t-il lors de l’activation de Galpha i?
Inhibition de l’adénylate cyclase
À quoi servent les protéines de la famille AKAP?
Rassemblent les composantes de la cascade AMPc
(comme un raft qui assure que la cascade se passe bien)
Aident à localiser et intégrer signalisation AMPc
Permettent à PKA d’agir rapidement sur les canaux synaptiques
Permettent interaction avec protéines synaptiques SAP97 et PSD95