6- Clase Aislamiento Fagos Flashcards
¿Qué es un virus?
Organismo subcelular con un ciclo de vida intracelular parasítico
¿Qué hizo Dimitri Ivanovsky?
Fue el padre de la virología: estudió el virus del mosaico del tabaco (aunque no lo sabía) y descubrió que eso que infectaba al tabaco algo más pequeño que las bacterias
¿Qué hizo Adolf Meyer?
Antes que Dimitri, descubrió que el virus del mosaico del tabaco (sin saber qué era un virus) pueden transmitirse entre plantas
¿Qué hizo Martinus Berjerink?
Descubrió que los virus eran contagiosos (contagium vivum fluidum)
Nucleocápside
Genoma del virus + proteínas
Envoltura de un virus
¿Todos la tienen?
¿Cómo es?
Sólo algunos tienen envoltura; es como una capa extra que recubre la cápside y que la obtienen derivada de la membrana la cell hospedadora
¿Cómo defines si un virus es “complejo”?
Mientras más grande sea el genoma, el virus es más complejo porque codifica +prots y DEPENDE MENOS DE LA CELL
¿Por qué usaría virus para evaluar la calidad de agua en lugar de usar bacterias que son más fáciles de identificar?
Porque puede ser que el agua está tan contaminada que ya no hay ni bacterias. PERO como las bacterias petan, los virus salen y se quedan en el agua. Por eso es útil usar virus.
Chromocult
Medio diferencial y selectivo con 2 sustratos
Componentes de la fase de enriquecimiento
Agua del río (45 ml)
DSPB (5ml)
E. coli (5ml)
UFP
Unidad formadora de placas
¿En el mundo hay muchos virus? :v
Yes, son los organismos más abundantes/ubicuos 10^31
¿Tipo de virus más abundantes?
Los bacteriófagos
¿Los bacteriófagos son generalistas?
No, son súper específicos, sólo infectan a una especie de bacterias e incluso puede ser que sólo infecten a un tipo de cepa :o
¿Cómo es el genoma de un virus?
Puede ser de DNA o RNA *son los únicos organismos que pueden tener el genoma de RNA
¿De qué está formada la cápside de un virus?
Puede ser de prots, lipids, azúcares
Esquema de la vida de un virus
Encuentran por azar a la cell
Producen sus mensajeros para hacer sus prots
Se empaquetan y salen de las cells
¿Los virus tienen un metabolismo?
Nel, los virus son metabólicamente inertes a fuera de la cell; dependen de los choques al azar para encontrar a una cell
¿Cómo sale un virus de la cell? (3 formas)
- Pueden destruir cell por completo con enzimas para destruir la membrana
- La cell se destruye mecánicamente porque hay muchos virus
- Pueden salir a través de gemaciones llevándose un pedazo de cell
2 formas que pueden tener las cápsides de los virus
Icosaédricas
Helicoidales
*PERO HAY MUCHAS MÁS (algunos parecen cells o gusanos D: )
¿El genoma de los virus tiene DNA basura?
Casi no jeje el 90% del genoma de virus codifica prots (a diferencia de los humanos donde sólo el 5% codifica prots)
2 tipos de virus que tienen un cápside icosaédrica (mencione si tienen envoltura o no)
Adenovirus (con cápside desnuda / sin envoltura)
Herpesvirus (con envoltura)
2 tipos de virus que tienen un cápside helicoidal (mencione si tienen envoltura o no)
TMV (sin env)
Paramyxovirus (con envoltura)
¿Qué le hacen los virus a la membrana de la cell para tener su envoltura? (2)
Hacen cambios específicos como:
Incorporar lipids para cambiar la fluidez Agregar prots virales (que pueden ser alta/ inmunogénicas)
Orden el que se encuentra la mayoría de bacterífagos
Orden Caudovirales
¿Qué se puede ver en el medio Chromocult?
Se ve que E. coli crece de color morado y otras coliformes crecen de color rosa
¿Por qué E. coli se ve de color morado en el medio Chromocult?
La mayoría de E. coli produce 2 enzimas (beta-D-glucoronidasa y beta-D-galactosidasa), mientras que las otras coliformes sólo producen 1 (beta-D-galactosidasa)
La galactosidasa da color rosa y la glucoronidasa da color azul; como E. coli produce las dos se ve morado
¿Por qué se usa una E. coli del lab y no la E. coli del río para la fase de enriquecimiento?
Porque se necesita una E. coli que no esté acostumbrada o sea resistente a los fagos
¿Cómo se hace la siembra de fagos?
1-Se toma un vol (varios vols) del tubo con fagos (original o enriquecidos) otro tubo con E. coli
2-Se homogeniza, se vierte en el medio semisólido y eso se esparce en una placa con agar sólido
3-Se observan un medio turbio con placas (huecos)
¿Por qué se ponen varios volúmenes del tubo de fagos cuando se hace la siembra?
Porque no se sabe el # original de fagos, entonces si hay muchísimos se mueren todas las E. coli y se hay muy pocos pues no se ve nada :|
*TODO ES LO MISMO EXCEPTO LA CANT DE FAGOS
¿Por qué se usa medio semisólido en la siembra? (2 razones)
- Porque se necesita que los fagos interactúen con las bacterias
- Además tienen MgSO4 que sirve para que el Mg+ permita la unión de los fagos a la membrana de las bacterias
¿Todos los virus de la muestra forman las placas en para el conteo?
No, algunos no llegan a infectar a la bacteria
Por eso hay protocolos para ciertos virus
