3- Crecimento Microbiano Flashcards
¿Para qué sirve saber el # de mos? 2 cosas
El # de mos da info sobre la calidad de una sustancia comestible y actividad microbiana en el suelo o ambientes acuáticos
¿Para qué sirve saber el # de mos en una sustancia comestible? 2 ejemplos
Para saber sobre su calidad, por ejemplo del agua potable o de la leche
3 métodos más comunes utilizados para el recuento de mos
1-Contaje viable
2-Contaje directo al microscopio
3-Método turbidimétrico
Contaje viable
¿En qué se basa?
Se basa en las suposición de que cada cell puede multiplicarse en un medio sólido y formar una UFC
Pasos del contaje viable (2)
1-Preparación de diluciones
2-Métodos de siembra
3 Pasos en la preparación de diluciones
1-Primera dilución 1/10: se pesan 10, 11, y 25 gr de la muestra con 90, 99, 225ml de agua peptonada respectiv/
2-Homogeneizar
3-Se hace la segunda dilución (1/100= 1ml de la primera sol a 9ml de agua) hasta 10^-6
3 métodos de siembra para el contaje viable
Vertido en placa
Extensión en placa
Petrifilm
4 Pasos del vertido en placa
1-Colocar 1ml de la dilución en una caja petri estéril vacía
2-Añade 20ml de agar nutritivo fundido a un T°=43°C
3-Homogeneizar bien el inóculo con el agar con movimientos circulares
4-Esperar a que solidifique
¿Cómo se debe homogeneizar bien el inóculo con el agar en la técnica de siembra de vertido de placa?
Se hace con movimientos circulares, 3 veces a favor de las manecillas del reloj y 3 veces en contra
4 Pasos de la técnica de siembra: Extensión en placa
1-Colocar 0.1ml de la dilución sobre la superficie de agar nutritivo sólido de una caja petri
2-Extender uniformemente con ayuda de un asa Digralsky o bastón de Hockey
¿Qué es el petrifilm?
Son películas que contienen medio de cultivo deshidratado
7 Pasos de la técnica de siembra: Petrifilm
1-Levantar la película superior
2-Poner 1ml de la muestra en el centro con la pipeta
3-Bajar la película superior sin formar burbujas
4-Poner el aplicador en la película superior sobre el inóculo
5-Presionar suavemente para distribuir el inóculo en el área circular
6-Levantar el aplicador, esperar 1 min e incubar por 24hr a 37°C
7-Interpretar resultados
¿En qué consiste el contaje directo al microscopio?
Se basa en contar el # de cells de una población bacteriana usando una cámara especial “de contaje”
Ejemplo de una cámara especial “de contaje”
La de Petroff Hauser
¿En qué consiste el método turbidimétrico?
Se estima el # de bacterias al medir la turbidez, por comparación visual o con ayuda de un espectrofotómetro
