5. Spřažené techniky I+II Flashcards
typ gradientu eluce látek v GC a LC
GC = nastavení teplotního gradientu (pro látky s rozdílnou teplotou varu, kolona mění teplotu během analýzy) LC = řízení polaritou mobilní fáze
mobilní fáze v GC-MS
hélium, protože snižuje rozptyl v koloně a základní šum, aktivně se účastní ionizačního mechanismu, lze odčerpat vakuovými pumpami; neionizuje na zdroji
ionizační techniky v GC-MS
ionizace v plynné fázi;
elektroionizace EI = ztráta elektronu nárazem do jiných elektronů nebo uvolněním valenčních elektronů;
chemická ionizace CI = menší stupeň fragmentace, pseudomolekulární ionty M+1/M-1
ionizační techniky LC-MS
ionizace za atmosférického tlaku, malý průtok MF;
ESI = ionizace vysokým napětím;
APCI = ionizace vypařováním za vysoké teploty a el. výboje - ionizace rozpouštědla koronovým výbojem a přenos e-/náboje na analyt;
APPI = ionizace vypařováním za vysoké teploty a UV - ionizace fotony;
TSP = termosprej, ionizace prudkým vypařením za zmlžování do vakua;
rozhraní s nekonečným pásem X rozhraní s proudem částic
režimy sběru dat GC-MS a LC-MS
skenování = záznam spektra ve vybraném rozsahu m/z, chromatogram jako závislost celkového proudu X rekonstruovaný, lepší LOD;
sledování vybraného iontu = zvýšená selektivita, lepší LOD;
sledování vybrané reakce = doplnění MSn
hmotnostní kalibrace MS
standard k seřízení MS kalibračního rozsahu a relativní intenzity MS; nejčastěji pomocí FC-43
GC-IR s průtočnou celou
spojení realizováno vyhřívanou multireflexní průtočnou celou; umožňuje měření všech skupenství vzorku
ionizace plazmatem v ICP technice a mechanismy
ionizace elektrony, ionty Ar a Ar v metastabilním stavu; cílem je maximalizace množství monovalentních iontů a minimalizace množství iontů s vyšším nábojem;
pohyb iontů z prostředí s atm. tlakem a plazma hořákem do prostředí vysokého vakua
převedení iontů z ICP do MS
vzorkování iontů soustavou dvou clon (vzorkovací a odběrová), která zachovává složení proudu iontů a převádí ionty z oblasti vysokého tlaku do oblasti nízkého tlaku, omezuje se distribuce kinetické energie iontů a vznik polyatomických částic;
fokusace iontů před vstupem do MS iontovou optikou, aby nedocházelo k rozptylu iontů;
separace kvadrupólem do MS (aby se daly odlišit ionty analytu od matrixových)
spektrální interference v ICP-MS
isobarické ionty = ionty stejné nominální hodnoty, ale odlišné látky;
dvojnásobně nabité ionty; polyatomické ionty
kroky korekce spektrální interference
sběr dat a záznam - hodnoty u daného m/z použity pro korekci příspěvku interferentu - odečtení příspevku interferentu získáme signál analytu
kolizní cela v ICP-MS
eliminuje spektrální interference způsobených polyatomickými ionty, buď se v ní rozpadnou nebo je jejich kinetická energie snížena natolik, že nepřekonají iontový val
princip eliminace interferencí s kinetickou diskriminací
v kolizní cele; na vstupu má analyt i polyatomický ion stejnou kinetickou energii, v cele dojde ke srážkám s kolizními plyny (He, H2) a snížení energie polyatomických iontů
GD-MS
ionizace doutnavým výbojem na povrchu katody, kde je fixován vzorek, v prostředí inertního plynu při nízkém tlaku; vloží se vysoké napětí, vznikne Ar+ a začne bombardovat vzorek, dojde k odpaření vzorku a excitaci atomů vzorku po srážce s elektrony
technika pro analýzu metaloorganiky a proč?
LC, GC, HPLC-ICP-MS;
ideálně GC, nejvhodnější pro těkavé látky
technika pro analýzu metaloproteionů a proč?
SEC (permeační chromatografie) na izolaci frakcí metaloproteinů, snadná izolace a analýza; ICP-MS umožňuje sledovat vybrané atomy (Fe, Cu, Zn,… v proteinech); lze použít pro standardy o známých koncentracích; SEC-ICP-MS
