κ4 Flashcards
Ποιες μεθόδους μετασχηματισμού φυτών γνωρίζεται ?
- Μετασχηματισμός με βομβαρδισμό σωματιδίων
- Μετασχηματισμός με ηλεκτροπόρωση
- Μετασχηματισμός με μικροένεση
- Μετασχηματισμός με τη χρήση του Agrobacterium tumefaciens
Τι γνωρίζεται για τον μετασχηματισμό με τη χρήση Agrobacterium tumefaciens και τι ρόλο παίζει το πλασμίδιο Ti σε αυτό?
Το Agrobacterium tumefaciens είναι ένα Gram αρνητικό, ραβδόμορφο βακτήριο του εδάφους της οικογένειας Rhizobiaceae
Προσβάλλει σχεδόν όλα τα δικοτυλήδονα φυτά και μερικά μονοκοτυλήδονα της οικογένειας Liliaceae και Amaryllideae. Το σύμπτωμα γίνεται αντιληπτό όταν μολυνθεί κάποιος πληγωμένος φυτικός ιστός από το βακτήριο. Δημιουργία μιας άμορφης, συμπαγούς και μη διαφοροποιημένης μάζας κυττάρων και τα φυτικά κύτταρα του ιστού χάνουν τη φυσιολογική τους δραστηριότητα.
Η παθογενετικότητα του αγρίου τύπου Agrobacterium tumefaciens εξαρτάται άμεσα από την ύπαρξη ενός μεγάλου πλασμιδίου, το Ti-πλασμίδιο. Η ικανότητα του να μολύνει οφείλεται σε δύο περιοχές του πλασμιδίου: Vir περιοχή & T-DNA περιοχή
T-DNA περιοχή: Περιέχει γονίδια υπεύθυνα για τη σύνθεση ή τροποποίηση βασικών φυτικών αυξητικών παραγόντων (αυξίνη, κυτοκινίνη) και την παραγωγή ειδικών αμινοξέων και σακχάρων (οπίνες). Η μεταφορά του ΤDNA εξαρτάται σε μεγάλο βαθμό από τις δύο συνοριακές ακολουθίες που βρίσκονται αριστερά και δεξιά του T-DNA:
* Αριστερό συνοριακό (Left border, LB)
* Δεξί συνοριακό (Right border, RB)
Είναι δύο πολύ όμοιες σε σειρά επαναλαμβανόμενες ακολουθίες μεγέθους 24 bp, οι οποίες αναγνωρίζονται από τις Vir πρωτεΐνες
Vir περιοχή: Περιέχει γονίδια που όταν επάγονται παράγουν τις Vir πρωτεΐνες οι οποίες μεταφέρουν και ενσωματώνουν ένα αντίγραφο DNA της T-DNA περιοχής στο γονιδίωμα του φυτού
