1.5 diagnostika bakterijskih okužb

Question 1

dobra kužnina kriteriji

Answer 1

• ustrezna kužnina
• vzorec reprezentativen
• odvzem s sterilnim priborom in v aseptičnih pogojih
• hiter transport kužnine v laboratorij
• takojšnja obdelava kužnine
• odvzem preden zdravimo z antibiotiki

Question 2

neposredna diagnostika

Answer 2

osamitev bakterije iz kužnine

dokaz bakterije v mikroskopskem vzorcu

dokaz bakt. antigenov v kužnini

dokaz bakt. nukleinskih kislin v kužnini

Question 3

posredna diagnostika

Answer 3

dokaz spec. protiteles v serumu

Question 4

kužnina pri neposredni diagnostiki

Answer 4

tikvo ali tekočina

npr. ostužki epitelija, sputum, blato, kri, seč, likvor, gnoj, biopti, vzorci tkiva

Question 5

česa ne jemljemo kot kužnino pri neposredni diagnostiki in zakaj?

Answer 5

brisi, ker:

onemogočajo neposredni Gramski razmaz

hitra kontaminacija

omejen volumen - lahko zavirajo rast mikroorganizmov

Question 6

metode neposredne diagnostike

Answer 6

mikroskopiranje

dokaz bakterijskih antigenov v kužnini

molekularne metode

osamitev povzročitelja iz kužnine

Question 7

Posredna diagnostika testi

Answer 7

• test aglutinacije bakterij
• test aglutinacije trdnih delcev prekritih z antigenom
• hemaglutinacija
• reakcija vezave komplementa
• ELISA

Question 8

ELISA

Answer 8

• občutljiv in specifičen test
• za protitelesa in antigene

Question 9

Dokazovanje antigenov ELISA

Answer 9

1. SENDVIČ ELISA
   - nosilec: primarna protitelesa
   - antigen
   - nevezane speremo
   - nanos sekundarnih označenih protiteles
   - nevezana speremo, ostalo encimska reakcija
   - umeritvena krivulja naraščajoča
2. KOMPETITIVNA ELISA
   - nosilec: preiskovan antigen
   - mešanica vzorca+označena protitelesa
   - sprememo + encimska reakcija
   - umeritvena krivulja padajoča

Question 10

ELISA ZA PROTITELESA

Answer 10

1. NEKOMPETITIVNA
   - nosilec: antigen
   - gor se vežejo protitelesa
   - z encimom označena protitelesa
   - speremo
   - encimska reakcija
2. KOMPETITIVNA
   - nosilec: antigen
   - dodamo: vzorčna protitelesa in označena protitelesa
   - padajoča umeritvena krivulja

Question 11

Protitelesa z IFA

Answer 11

= posredna imunofluorescenca
- objektno steklce: antigen
- razredčina bolnikovega seruma
- spiranje + dodajanje označenih protiteles s fluorofori
- spiranje
- mikroskopiranje pod FM
- pozitiven rezultat=zelena fluorescenca v vidnem polju

Question 12

Titer protiteles

Answer 12

= največja razredčina, ki še da imunsko reakcijo
- lahko z ELISO in IFA