1. Oplození 👉👌 Flashcards
Kdy mluvíme o sexu
- Do té doby, než se začne vyvíjet embryo (splynutí samčí a samičí buňky)
4 fáze oplození
- Kontakt a vzájemné rozpoznávání spermie a vajíčka
- k samotnému vajíčku dojdou jen stovky spermií - Regulace vniku spermie do vajíčka
- Fúze genetického materiálu spermie a vajíčka
- Aktivace metabolismu vajíčka a počátek vývoje zárodku
Oocyt
= nezralá samičí pohlavní buňka
Vajíčko - definice
= Zralá samičí pohlavní buňka
Spermie - historie
- 1678 - Anton van Leeuwenhoek - spermatozoa (paraziti v seminální tekutině; ,,spermatická zvířátka’’)
- 1685 - Spermie -> semeno, samičí reprodukční trakt - pouze úrodná půda
- Homunculus - spermie je zmenšený člověk
- konec 18. stol. - Lazzaro Spallanzani - pokus s filtrací spermií ropuchy, filtrační rouška
- 1824 - J. L. Prevost + J. B. Dumas - spermie - důležité pro oplození
- 1840 - A. von Kolliker - spermie důležitá pro aktivaci těla
- 1876 - Oscar Hertwig a Herman Fol - pozorování průniku spermie do vajíčka a vzniku prvojader
Spermatogeneze - kdy
- probíhá celý život samce
Oogeneze - kdy;
- mitotická část se tvoří prenatálně, do porodu -> pak už jen zrají (primární ooccyty jsou zastavené v diploidním stádiu I. heterotypického dělení)
- v pubertě oocyty rostou, jdou dál; syntéza DNA a růst folikulu
Kumulární buňky
= Corona radiata
- regulují rychlost zrání (negativně), dávají oocytu čas, aby se připravil
- oocyty bez kumulárních buněk zrají rychleji (ale mohou být vývojově nekompetentní, předběhly by samy sebe)
Graafův folikul
- předurčený k ovulaci
- je jen jeden, který pak jde do ovulace
Spermie - morfogeneze, naspeedování, vazba
- Golgi se mění na akrozomálmí váček (umožní penetraci do vajíčka)
- mitochondrie v krčku (mid-piece)
- mikrotubuly se mění na bičík - alpha- a beta-tubulin + dyneiny
- pokud spermie není v pořádku, její krček láká leukocyty
- v děloze dojde k navázání SABP (Sialid Acid Binding Protein) -> zvýšení intracelulární hladiny vápníku (spermie jsou naspeedované vápníkem)
- spermie se vážou pouze v místech výskytu bindinových receptorů (ježovka)
Vajíčko-oocyt - zásobní látky, oplození, části (+ u koho)
- Zásobní látky v cytoplazmě:
- > Proteiny
- > ribozomy a tRNA
- > mRNA
- > morfogenní faktory
- > obranné látky (znechutí vajíčko predátorovi)
- Oplození:
- > většina savců + ryby a obojživelníci - Metafáze II. (primární oocyt + pólové tělísko)
- > u psů a lišek dochází k ovulaci ve stádiu primárního oocytu, oplození se odehrává v MII, stejně tak jako u ostatních savců
- > ježovky, žahavci - do kompletně dokončeného vajíčka s ukončenou meiózou
- VITELINNÍ MEMBRÁNA - u ježovky
- ZONA PELLUCIDA - u savců, blána, pellucida=světlovolná
- KUMULÁRNÍ BUŇKY:
- > další bariéra (první)
- > je tam proto, aby se k vajíčku dostalo už méně spermií
- > u ježovky roli kumulárních buněk nahrazuje GELOVÝ OBAL
- > více jich je v MI (nabobptnají - produkce kys. hyluronové, která přitahuje vodu)
Vajíčko-spermie - co se děje, 5 fází
= kontakt a vzájemné rozpoznávání
- Chemotaxe spermie k vajíčku, sekrece rozpustných molekul vajíčkem
- Exocytóza akrozomálního váčku a uvolnění lytických enzymů (u savců zpravidla nejprve vazba spermie k vajíčku)
- Zona pellucida je nadtrávená a spermie mohou k vajíčku - Vazba spermie k extracelulárnímu obalu vajíčka (vitelinní membrána nebo zona pellucida)
- Průchod spermie přes extracelulární obal
- Fúze plazmatických membrán spermie a vajíčka (spermie se nezavrtává, je v rovině s vajíčkem)
- buď gelový obal a vitelinní membrána nebo zona pellucida a kumulární buňky - většinou se akrozomální váček spermie vylívá až u zona pellucida
Vliv kumulárních buněk na akrozomální reakci u myši + RESACT
- protein NYP-SP8
- protein se váže na povrch kumulárních buněk -> spouští receptor Ca2+ -> zvýší se tvorba progesteronu v kumulárních buňkách (jeden z atraktantů pro spermie) -> váže se na spermii -> spouští akrozomální reakci
Kyselý peptid RESACT: - tvorba ATP a syntéza dyneinu
- atraktant pro spermii
Akrozomální reakce u ježovky
- Akrozomální váček je produktem GA, je na hlavičce spermie -> fúzí membrán spermie a akrozomálního váčku dojde k vylití obsahu akrozomálního váčku -> membrána na hlavičce se obnaží -> na ní je protein BINDIN (druhově specifický, umožňuje ježovce oplodnit jen svůj druh), oocyt na něj má receptor
Protein BINDIN
= protein na hlavičce spermie ježovky
- druhově specifický, umožňuje ježovce oplodnit jen svůj druh
Kapacitace - kde, co se děje
- dochází k ní v samičím reprodukčním traktu
- po ejakulaci spermie ve vaginálním prostředí (kyselé) -> do dělohy (jiné pH)
- klíčová pro maturaci spermie, aby byla schopna oplodnit vajíčko
- jeden z mechanismů - odstranění cholesterolu z membrány
Savci - zona pellucida
- zůstává u embrya až do blastocysty
- GLYKOPROTEINOVÝ OBAL vajíčka syntetizovaný a sekretovaný rostoucím oocytem
- někdy se může stát, že zona pellucida odejde dřív a vajíčko zahnízdí ve vejcovodech -> mimoděložní těhotenství
- váže spermie
- spouští akrozomální reakci
- skládá se ze tří glykoproteinů: ZP3, ZP2, ZP1
Savci - zona pellucida - druhé rozpoznání gamet
- akrozomální váček spermie obsahuje 26S PROTEÁZOMÁLNÍ KOMPLEX ´(běžně degraduje proteiny) -> rozloží proteiny s ubiquitinovou značkou
- vnější povrch ZP je UBIQUITINOVANÝ
- ubiquitinace je druhově specifická
- 26S PROTEÁZOMÁLNÍ KOMPLEX vylitý v rámci akrozomální reakce degraduje druhově specifické ubiquitinované proteiny na vnějším povrchu ZP
- zablokování proteázomálního komplexu (inhibitor MG132) BRÁNÍ FERTILIZACI u ZP intaktních oocytů (navážou se, ale toť vše)
Savci - zona pellucida - Ubiquitin a 26S proteázomální komplex
- Ubiquitin
- > 76 AMK
- > v rámci posttranslačních modifikací určitých proteinů (určených k degradaci) se pomocí UBA a UBC enzymů kovalentně váže na LYSINOVÉ ZBYTKY
- > sám obsahuje 7 LYSINOVÝCH ZBYTKŮ - možnost tvorby polymerů (di-, tri-, tetra-, poly-) -> klíč ke druhové specifitě
Klíč k fúzi membrán spermie a vajíčka - IZUMO1 a JUNO
- IZUMO1 - na spermii
- JUNO - na oocytu
Polyspermie - co to je, prevence
- dvojnásobek chromosomů -> dojde k roztrhnutí jader
- prevence:
RYCHLÝ BLOK:
-> změny v membránovém potenciálu
-> po proniknutí první spermie do vajíčka se otevřou sodné kanály -> dovnitř teče velké množství sodných iontů -> repolarizace membrány oocytu (na vnitřní straně je -) -> venku teď -, uvnitř + -> další spermie jsou odmrštěné od oocytu
POMALÝ BLOK:
-> kortikální reakce
-> řízený vápníkem (po navázání spermie se uvolní z ER) -> vyvolá vylití tzv. KORTIKÁLNÍCH GRANULÍ (pod povrchem membrány, obsahují enzymy, které u ježovky odstraní receptory -> ztvrdnutí membrány (další spermie se už nemohou navázat)
-> SERINOVÉ PROTEÁZY - ruší kontakty mezi vitelinní a plazmatickou membránou a odštěpují bindinové receptory
Mukopolysacharidy
- tvorba osmotického gradientu - expanze prostoru mezi vitelinní a plazmatickou membránou - fertilizační obal
Peroxidáza
- crosslink tyrosinových zbytků - ,,ztvrdnutí’’ fertilizačního obalu