Хроматография ВиО Flashcards
Хроматография
Динамический метод разделения веществ, состоящий из многочисленных циклов сорбции/десорбции смеси веществ на неподвижной фазе в потоке подвижной фазы
Принципы разделения
- Аффинность (аффинная хроматография)
- Заряд (ионообменная)
- Гидрофобность
- Размер (эксклюзионная)
Режимы процесса
Режим связывания и элюции
Режим протока
Элюентная хроматография
Вымывание из колонки растворенных веществ
Этапы промышленной хроматографии
Расконсервация сорбента (отмывка от консерванта)
Санитизация (промывка раствором гидроксида натрия)
Уравновешивание колонки (для исключения «шока» белка)
Загрузка образца (связывание молекул образца с лигандом сорбента)
Промывка образца нанесенного на колонку (очистка белка от различных примесей и нецелевых белков)
Элюция (разрыв связей между лигандами сорбента и целевым белком, сбор целевых фракций)
Промывка колонки
Регенерация/санитизация сорбента
Заполнение колонки раствором для хранения
Разрешение
Выбор типа хроматографии
Типы сорбентов
Аффинная хроматография
