Week 6 (Traces Sanglantes)

Question 1

Où sont placer les réactif au sang dans une séquence poreux ? Et pourquoi ?

Question 2

Que sont des méthodes de détection optiques pour le sang ?

Answer 2

• En lumière blanche
• À 415 nm: Le sang frais diffuse la lumière, le sang âgé absorbe la lumière
• Dans l’infrarouge: absorption
• En luminescence(en 360nm): ém. IR, la photoluminescence n’est pas toujours observable

Faire attention que les UV dégradent l’ADN

Question 3

Est-ce que les traces de sang peuvent être latentes ?

Answer 3

OUI

Question 4

Que sont les deux méthodes principales de la détection du sang par méthodes chimiques ?

Answer 4

• Les colorants à protéine
• Les réactifs catalysé par l’hème

Question 5

Comment fonctionne le mécanisme des colorants à protéines ?

Answer 5

Il y a une attraction électrostatique entre les colorants(-) et les protéines (+) contenus dans le sang

Question 6

Qu’est le protocole des colorants à protéines ?

Answer 6

1. Le supprot est immergé dans l’acide 5-sulfosalicylique qui fixe les protéines du sang
2. Le support est immergé dans le bain de coloration
3. Le support est rincé plusieurs fois

Question 7

Qu’est la formulation des colorants ?

Answer 7

Ils ont une formulation à base aqueuse
Les colorations sont: WEAA = Water/Ethanol/Acide Acetic

Question 8

Qu’était l’ancienne formulation des colorants ?

Answer 8

Le méthanol (toxique)

Question 9

Où sont utilisables les colorants à protéines ?

Answer 9

En laboratoire et sur les lieux
Bien que l’application sur les lieux sont dur à mettre en oeuvre à cause du rinçage

Question 10

Que sont les principaux colorants à protéines utilisés ?

Answer 10

• Noir Amido
• Acid Violet 17
• Acid Yellow 7

Question 11

Sur quelle(s) support(s) est-ce que le Noir Amido peut être utilisé ?

Answer 11

Poreux, semi-poreux, non-poreux (préfèré)

Question 12

Sur quelle(s) support(s) est-ce que l’Acid Violet 17 peut être utilisé ?

Answer 12

poreux, semi-poreux, non-poreux

Question 13

Sur quelle(s) support(s) est-ce que l’Acid Yellow 7 peut être utilisé ?

Answer 13

non poreux (trop de bruit de fond sur les autres supports)

Question 14

Comment observe-t-on les traces au Noir Amido ?

Answer 14

bleu foncé (non luminescent)

Question 15

Comment observe-t-on les traces au Acid Violet 17 ?

Answer 15

mauve (légèrement luminescent)

Question 16

Comment observe-t-on les traces au Acid Yellow 7 ?

Answer 16

jaune + luminescent (exc:400-490nm / émi: 535nm)

Question 17

Que sont des informations complémentaires sur le Noir Amido ?

Answer 17

• Que les bruits de fond sont généralement observé sur des surfaces poreuses
• Efficace et très populaire

Question 18

Que sont des informations complémentaires sur l’Acid Violet 17 ?

Answer 18

• risque de bruit de fond important sur des surfaces poreuses
• légèrement luminescent

Question 19

Que sont des informations complémentaires sur l’Acid Yellow 7 ?

Answer 19

• risque de bruit de fond important sur surfaces poreuses en luminescence
• de plus en plus efficace le moins il y a de sang
• augmentation du contraste par prélèvement via gel lifter

Question 20

Comment fonctionne les réactions catalysées par l’hème ?

Answer 20

Les molécules oxydées par l’activité peroxydase de l’hémoglobine (hème), en présence d’eau oxygénée

Des faux positifs sont possibles

Question 21

Que sont les trois réactifs principaux dans la détection par des réactions catalysées par l’hème ?

Answer 21

• 3,3’-diaminobenzidine
• Leuco Crystal Violet
• Luminol/Bluestar

Question 22

Sur quelles supprots peut-on utilser le 3,3’-diaminobenzidine ?

Answer 22

poreux, semi-poreux, non-poreux

Question 23

Sur quelles supprots peut-on utilser le Leuco Crystal Violet ?

Answer 23

poreux, semi-poreux et non-poreux

Question 24

Est-ce que le Luminol/Bluestar est recommandé pour les traces papillaires ? Pourquoi ?

Answer 24

Non, car il ne permet pas l’observation des détails de crêtes

Question 25

A quoi ressemble les traces exposées au 3,3’-diaminobenzidine ?

Answer 25

marron foncé (non luminescent)

Question 26

A quoi ressemble les traces exposées au Leuco Crystal Violet ?

Answer 26

mauve (non luminescent)

Question 27

Que sont des infos complémentaires sur le DAB (3,3’-Diaminobenzidine) ?

Answer 27

• peu de bruit de fond
• efficace mais toxique à l’envirronement et potentiellement cancérogènes

Plus utilisé par l’ESC

Question 28

Qu’est l’impact du CA sur les colorants à protéines ?

Answer 28

le polymère réduirait l’accès des colorants à protéines au sang ce qui réduit le contraste et diminue leur efficacité

Question 29

Que faut-il faire pour réduire l’impact du CA sur les colorants à protéines ?

Answer 29

• Soit ne pas appliquer le CA si c’est important de détecter des traces sanglantes donc adopter une séquence VMD->poudre->Sang
  Cette séquence est peu commune et en plus le CA permet de voir les traces sur du non-poreux
• Soit remplacé la formulation de colorants au MeOH
  le MeOH est toxique et inflammable

L’ESC dit qu’il faut faire un compromis entre le CA et les colorants (appliquer moins de CA pour quand même utiliser les colorants)

Question 30

Pourquoi est-ce que les techniques de détection visant le sang sont après les techniques visant les AA / Cyano ?

Answer 30

Car les réactifs au sang sont à base d’eau et un support mouillé à des effets délétères sur les traces lors de l’utilisation du CA et font migrer/solubilise les acides aminés