Week 6 (Traces Sanglantes) Flashcards
Où sont placer les réactif au sang dans une séquence poreux ? Et pourquoi ?
Que sont des méthodes de détection optiques pour le sang ?
- En lumière blanche
- À 415 nm: Le sang frais diffuse la lumière, le sang âgé absorbe la lumière
- Dans l’infrarouge: absorption
- En luminescence(en 360nm): ém. IR, la photoluminescence n’est pas toujours observable
Faire attention que les UV dégradent l’ADN
Est-ce que les traces de sang peuvent être latentes ?
OUI
Que sont les deux méthodes principales de la détection du sang par méthodes chimiques ?
- Les colorants à protéine
- Les réactifs catalysé par l’hème
Comment fonctionne le mécanisme des colorants à protéines ?
Il y a une attraction électrostatique entre les colorants(-) et les protéines (+) contenus dans le sang
Qu’est le protocole des colorants à protéines ?
- Le supprot est immergé dans l’acide 5-sulfosalicylique qui fixe les protéines du sang
- Le support est immergé dans le bain de coloration
- Le support est rincé plusieurs fois
Qu’est la formulation des colorants ?
Ils ont une formulation à base aqueuse
Les colorations sont: WEAA = Water/Ethanol/Acide Acetic
Qu’était l’ancienne formulation des colorants ?
Le méthanol (toxique)
Où sont utilisables les colorants à protéines ?
En laboratoire et sur les lieux
Bien que l’application sur les lieux sont dur à mettre en oeuvre à cause du rinçage
Que sont les principaux colorants à protéines utilisés ?
- Noir Amido
- Acid Violet 17
- Acid Yellow 7
Sur quelle(s) support(s) est-ce que le Noir Amido peut être utilisé ?
Poreux, semi-poreux, non-poreux (préfèré)
Sur quelle(s) support(s) est-ce que l’Acid Violet 17 peut être utilisé ?
poreux, semi-poreux, non-poreux
Sur quelle(s) support(s) est-ce que l’Acid Yellow 7 peut être utilisé ?
non poreux (trop de bruit de fond sur les autres supports)
Comment observe-t-on les traces au Noir Amido ?
bleu foncé (non luminescent)
Comment observe-t-on les traces au Acid Violet 17 ?
mauve (légèrement luminescent)
Comment observe-t-on les traces au Acid Yellow 7 ?
jaune + luminescent (exc:400-490nm / émi: 535nm)
Que sont des informations complémentaires sur le Noir Amido ?
- Que les bruits de fond sont généralement observé sur des surfaces poreuses
- Efficace et très populaire
Que sont des informations complémentaires sur l’Acid Violet 17 ?
- risque de bruit de fond important sur des surfaces poreuses
- légèrement luminescent
Que sont des informations complémentaires sur l’Acid Yellow 7 ?
- risque de bruit de fond important sur surfaces poreuses en luminescence
- de plus en plus efficace le moins il y a de sang
- augmentation du contraste par prélèvement via gel lifter
Comment fonctionne les réactions catalysées par l’hème ?
Les molécules oxydées par l’activité peroxydase de l’hémoglobine (hème), en présence d’eau oxygénée
Des faux positifs sont possibles
Que sont les trois réactifs principaux dans la détection par des réactions catalysées par l’hème ?
- 3,3’-diaminobenzidine
- Leuco Crystal Violet
- Luminol/Bluestar
Sur quelles supprots peut-on utilser le 3,3’-diaminobenzidine ?
poreux, semi-poreux, non-poreux
Sur quelles supprots peut-on utilser le Leuco Crystal Violet ?
poreux, semi-poreux et non-poreux
Est-ce que le Luminol/Bluestar est recommandé pour les traces papillaires ? Pourquoi ?
Non, car il ne permet pas l’observation des détails de crêtes
A quoi ressemble les traces exposées au 3,3’-diaminobenzidine ?
marron foncé (non luminescent)
A quoi ressemble les traces exposées au Leuco Crystal Violet ?
mauve (non luminescent)
Que sont des infos complémentaires sur le DAB (3,3’-Diaminobenzidine) ?
- peu de bruit de fond
- efficace mais toxique à l’envirronement et potentiellement cancérogènes
Plus utilisé par l’ESC
Qu’est l’impact du CA sur les colorants à protéines ?
le polymère réduirait l’accès des colorants à protéines au sang ce qui réduit le contraste et diminue leur efficacité
Que faut-il faire pour réduire l’impact du CA sur les colorants à protéines ?
- Soit ne pas appliquer le CA si c’est important de détecter des traces sanglantes donc adopter une séquence VMD->poudre->Sang
Cette séquence est peu commune et en plus le CA permet de voir les traces sur du non-poreux - Soit remplacé la formulation de colorants au MeOH
le MeOH est toxique et inflammable
L’ESC dit qu’il faut faire un compromis entre le CA et les colorants (appliquer moins de CA pour quand même utiliser les colorants)
Pourquoi est-ce que les techniques de détection visant le sang sont après les techniques visant les AA / Cyano ?
Car les réactifs au sang sont à base d’eau et un support mouillé à des effets délétères sur les traces lors de l’utilisation du CA et font migrer/solubilise les acides aminés
