Week 4 (Réactifs aux acides aminés) Flashcards
Pourquoi est-ce qu’on cible les acides aminés ?
- Car il y a une composition relativement constante entre des individus
- ce sont des molécules très stable dans le temps
- elle pénetrent dans le support de quelques microns puis se stabilise
Quelle est la quantité moyenne d’acide aminés sur des traces connue ?
en moyenne 100ng - 250ng
Est-ce que les conditions in situ sont compatibles avec des réactions sur le support ?
Oui
Que sont des conditions qui peuvent faire varier les rendements et les réactions
- les réactifs (mécanismes, intermédiaire moléculaires, produits de réaction)
- pour un même réactif la variation selon l’acide aminé ou la formulation de la solution
Les réactifs aux acides aminés cibles toute les acide aminés ou spécifiquement certains ?
ciblage générique
Sur quel support peut-on appliquer les réactifs aux acides aminés ?
Sur des supports semi-poreux (les acides aminés ont une forte affinité pour la cellulose)
Les réactifs aux acides aminés vise quelle fraction ? Ou serait positioné ces réactifs dans une séquence de traitments ?
Elle vise la faction hydrosoluble. Puisque la fraction hydrosoluble est fragile elle serait en haut/ en premier
Quelle influence a les techniques à base aqueuse comme le révélateur physique ou déposition mono- et multi-métallique sur les acides aminés ?
une influence délétère
Est-ce que les techniques sans solvant on un impacte sur les traces AA ?
un impact négligeable
Que sont les facteurs influençant l’efficacité des techniques ciblant les AA ?
Contrôlés
- le choix du réactif
- la formulation / mode d’application (solvants, concentration)
- les conditions environnementales (labo, contexte)
- le processus de révélation (température, Humidité)
Non controlés
- le support
- la composition des sécrétions
- etc
Quand a été synthétisée la ninhydrine ?
en 1910
Avec quoi réagit la ninhydrine ?
l’ammoniac (NH3) et les amines (-NH2, groupe amine)
Pour quelle technique/méthode été utilisé la ninhydrine avant la science forensique ?
Pour la chromatographie
Quand a été utilisé la ninhydrine pour une application en science forensique ?
En 1954 par Oden & Van Hofsten. Ils ont vu que des traces digitales était visibles sur les membranes manipulées a mains nues et colorait les doigts
Comment fonction la réaction de la ninhydrine ?
Elle hydrolyse l’acide aminé et se lie avec, puis pour se lie avec une autre molécule de ninhydrine pour former le pourpre de Ruhemann
Est-ce que la ninhydrine réagit avec tous les acides aminés de manière optimale ?
Non, la proline, l’asparagine et le tryptophane ne produit pas ou peu de pourpre de Ruhemann.
La lysine et la cystéine produit une faible coloration
Qu’est la longueur d’onde de l’absorption sélective de la ninhydrine ?
550nm / Vert
Quelle couleur forme les acides aminés qui ont réagit avec la ninhydrine sous lumière blanche ?
Une couleur pourpre
Quelle couleur forme les acides aminés qui ont réagit avec la ninhydrine sous la longueur d’onde de l’absorption sélective ?
Noir
Peut-on observer le résultat de la ninhydrine en luminescence ?
Non car la structure du pourpre de Ruhemann n’est pas planaire
Que était les deux voies de recherche pour rendre la ninhydrine luminescente ?
- modifier le produit de réaction aka le pR
- modifier le réactif aka créer des analogues à la NIN
Quelle était la technique pour modifier le pourpre de Ruhemann ?
le post-traitement aux sels métallques
Que change le post-traitement aux sels métalliques ?
- Il change la couleur de la trace observable du pourpre à l’orange
- la luminescence est observable à 77k (environ -200C)
Quels sels sont utilisés pour le post-traitement aux sels métalliques ?
le Zinc, le Cadmium, le Mercure et le Copernicium
Comment fonctionne le système de post-traitement aux sels métalliques ?
Le support avec ninhydrine est mis sous azote
Que sont les deux types d’analogues
- les analogues structuels= composé ayant une structure chimique similaire à un autre composé, mais différant de celui-ci par un certain composant. Elles on pas forcément les mêmes propriétes physico-chimiques et biochimiques
- les analogue fonctionnels= composé qui présente des propriétés physiques, chimiques, biochimiques ou pharmacologiques similaires à un autre. Pas forcément une structure chimique similaire
Que sont les analogues structuraux à la ninhydrine
- 5-méthoxy-ninhydrine
- benzo-[f]-ninhydrine
- 5-méthylthio-ninhydrine
Qu’est le nom complet de la ninhydrine ?
2,2-dihydroxy-1,3-indanedione
Que sont les caractéristiques idéales des analogues fonctionnels et structurels ?
- la réaction avec les AA
- les propriétés optiques et/ou sensibilité améliorées (ex. luminescents à la température ambiante)
- peu chers
- solubles dans des solvants non-polaires
- peu toxiques
Pourquoi est-ce que les analogues de la ninhydrine on été abandonnés ?
Car ils étaient simplement trop chers
Qu’est le nom complet du DFO ?
1,8-diazafluorèn-9-one
Quand a été synthétisée le DFO ?
en 1950
Quand à été utilisé le DFO pour la première fois pour une utilisation forensique?
En 1989 in the UK
Comment réagit le DFO ?
Le produit de la réaction est luminescent à température ambiante sans la nécessité de former un complexe aux sels métalliques
Est-ce que des produits de réaction du DFO sont enregistrés photographiquement à la lumière blanche ?
Non, car il n’y a souvent peu ou pas de couleur
Comment observe-t-on les traces de DFO ?
Nous exposons les traces à la lumière verte puis on mets un filtre jaune sur la trace pour mieux la voir
Qu’est le nom complet de l’indanedione ?
1,2-indanedione
Quand a été synthésiser l’indanedione ?
en 1958 par Cava
Quand a été utilisé l’indanedione pour une utilisation forensique ?
en 1997 par US Secret Service et Joullié
Sous quelles conditions réagit l’indanedione ?
Les produit de réaction sont luminescent à température ambiante
Pourquoi est-ce que l’Indanedione n’a pas dépassé le DFO avant 2007 alors qu’il était déjà utilisé à des fins forensiques en 1997 ?
Car l’indanedione était extremement sensible au support et aux conditions environnementales (la temp et l’humidité). On pouvait pas l’utilisé dans beaucoup d’endroits
Quand et pourquoi l’indanedione est-elle devenu le meilleur réactif aux acides aminés au présent ?
En 2007. Une nouvelle formulation premix intégrant le ZnCl2 à optimisé les conditions de développement.
Importance sur le ion de Zn2+ dans le mécanisme réactionnel
Quelle influence a l’humidité relative du document traité avec IND sur la réaction ?
70% RH c’est bien
en dessous de 50% RH pas bien
Pourquoi utilise-t-on toujours la ninhydrine avec l’indanedione
Car la ninhydrine arrive toujours à détecter certaines traces que l’indanedione ne peut pas ou elle sont plus apparentes.
Aussi dans un cas ou deux traces sont superposées peut-être une traces réagit mieux avec un réactif que l’autre qui donne la possibilité de les distinguer
Que sont les modes d’application possibles pour les réactifs aux acides aminés ?
- par immersion brève
- par spray (ex: NIN Print)
- en sandwich
Dans quelles circonstances est l’application en sandwich utilisé ?
C’est réservé aux documents particulièrement fragiles ou présentant une quantité importante de texte manuscrit
Comment fonctionne l’application en sandwich ?
Deux papiers buvards qui sont imprégnés de réactif, sont placés en-dessous et au-dessous puis pressés pendant 24 à 48 heures. Il n’y a pas de contact avec une solution liquide.
Les formulations des réactifs pour cette application sont généralement plus concentrés que pour l’immersion et spray
Comment affect l’humidité pour les différent réactifs ?
- Ninhydrine: l’humidité est nécessaire pour la réaction
- DFO: l’humidité diminue le rendement quantique–> la luminescence max est juste après la sortie de l’étuve
- La indanedione: l’humidité nécessaire dans le mécanisme réactionnel–> l’humidité du support suffit généralement
De quoi sont composé les solutions réactifs aux AA ?
- Les réactifs
- solvants polaires (méthanol/éthanol/acide acétique)
- solvants porteurs apolaires
Pourquoi est-ce que les sovants polaires sont nécessaires dans la formulation de réactifs ?
Pour solubiliser les réactifs principaux (NIN, DFO, IND) car ils sont peu solubles dans les sovants apolaires ?
Pourquoi est-ce que certains réactifs font baver les encres ?
A cause des solvants polaires servants a solubiliser les réactifs.
Le bavage est surtout visible en luminescence
Que faut-il privilégier pour les support qui présentent bcp de texte manuscrit (encre)?
- privilégier la formulation IND/Zn-CAST
- opter pour l’application en sandwich “IND/Zn- Sandwich”
Est-il nécessaire de vérifier l’éfficacité d’une solution avant l’utilisation ?
OUI
Que sont les deux manières de vérifier une solution ?
- De manière traditionnelle: trace digitale sur un support usuel (ex:papier)
- De manière standardisée: avec in test strip
