Tuto 2- Gram + Flashcards

1
Q

Décris les étapes de la coloration de Gram.

A
  1. Bactéries fixées à la chaleur ou séchées
  2. Coloré au crystal violet
  3. Précipité à l’iode (mordant)
  4. Lavage à l’eau ou l’alcool (décoloration)
  5. ajout de safranine (rouge = recoloration)

Gram+ = garde la coloration du crystal violet par leur membrane épaisse de Peptido qui empêche le passage de l’acétone dans le cytoplasme

Gram- = rouges (perforation par l’acétone et recoloration)

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2
Q

De quoi dépend la couleur finale de la coloration de gram?

A

Capacité de la membrane à laisser passer ou non l’acétone (alcool)

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3
Q

Que comprend le cytoplasme des B?

A
Chromosome d'ADN
ARNm
Ribosomes
Métabolites
Protéines
Plasmides (pas tjrs)
peu d'organes
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4
Q

Décris l’ADN des B.

A
1 chromosome
Double brin
Haploïde 
pas de membrane nucléaire
Dans le nucléoïde
pas d'histones (donc pas de nucléosome)
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5
Q

Rôle des plasmides?

A

Conférer une grande résistance aux antibio.

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6
Q

Rôle du septum?

A

Filaments d’actine qui aident à la réplication.

Forme de la bactérie + site de division ¢

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7
Q

Quelles sont les caractéristiques des membranes cytoplasmiques?

A

Bicouche lipidique
Absence de cholestérol

Responsable de:

  • transports d’é
  • Production E
  • Régulation osmotique
  • implquée dans la division ¢

Elle est atttribuable aux mitochondries des eucaryotes!

contient:

  • transporteurs
  • pompes
  • enzymes
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8
Q

Décris la capsule.

A
  • Couche de polysaccarides ou protéines
  • Moins dense (couche mine)
  • Rôle Antiphagocytose
  • Barrière contre détergents
  • Favorise adhésion aux tissus de l’hôte.
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9
Q

Décris le biofilm.

A
  • Produit en présence d’un nombre suffisant de bactéries + conditions qui favorisent la croissance
  • Facilite la colonisation
  • Protection contre environnement, antimicrobies et réponses de l’hôte

B liées par des polysaccarides, permet de les fixer aux tissus

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10
Q

Comment sont aussi appelés la capsule et le biofilm (couche visqueuse)

A

Glycocalyx

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11
Q

Décris la flagelle.

A
  • Assure motilité + Chimiotaxie
  • Peuvent être plusieurs sur meme B
  • peut être un facteur de virulence
  • Déterminant antagonique majeur (antigène H)
  • Flagelle des Gram - Reconnue par les TLR
  • Composée de la protéine flagelline
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12
Q

Décris les Pili.

A
  • Comme petits poils
    • rigides et + fins que flagelle
  • Permettent Adhésion (facteur virulent)
  • Important dans la colonisation et l’infection

Pilis communs = Fixation des B
Pilis sexuels = codés par plasmides, transfert de chromosomes entre B en conjugaison.

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13
Q

Différences entre capsule et couche visqueuse.

A

Biofilm permet Adhésion +++ que Capsule

Leur densité est non-uniforme

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14
Q

Décris la paroi Bactérienne.

A

Enveloppe rigide qui protège et maintien la forme de la B

  • Protège de l’environnement
  • Maintien P osmotique intra¢ élevée
  • Confère la rigidité bactérienne
  • Constituée de Peptidoglycan

Grande chez Gram+
Petite mais présente chez Gram-

-Correspond au mur cellulaire.

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15
Q

Décris la membrane des Gram+

A
  • Membrane Cytoplasmique
  • Mur cellulaire Épais (peptido ++)
    • Poreux (permet diffusion)
    • Mur contient
        • Acides teichoïques (AG)
      • -Acides lipoteichoïques (AG)
        • Complexes de polysaccharides
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16
Q

Quelsont les rôles de l’acide teichoïque?

A
  • Renforcit la paroi
  • Permet d’attacher les peptidoglycans à la membrane des B.
  • Active la protection de l’hôte (antigène = favorise l’adhésion aux ¢ de l’hôte)
  • Séquestre le Ca2+

Présent seulement chez Gram+ (C,est pourquoi Gram- ont moins de Peptido)

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17
Q

Décris la membrane des Gram-.

A
Membrane cytoplasmique
Mur cellulaire (mince)
Espace périplasmique
Membrane externe (porines)
  - Feuillet interne (phospholipides)
  - Feuillet externe (LPS)
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18
Q

Quelles sont les fonctions de la membrane externe?

A

Délimite
Protection
Sélectivité = perméable

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19
Q

Que contient l’espace périplasmique?

A
  • Transport : fer, sucres, prot, métabolites
  • Dégradation: protéases, phosphatases, lipases, nucléases
  • Synthèse
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20
Q

Par quoi peut être brisée la membrane externe?

A

Antibiotiques (mais assez résistante)

Chanteurs de Mg + Ca

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21
Q

Quelle bactries (+ ou -) est résistante aux lysosymes?

A

Gram-

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22
Q

Quelle bacétries (+ ou -) est résistante aux antibio/pénicilline?

A

GRam -

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23
Q

Décris la structure des peptidoglycans.

A

Polymère de disaccharides

  • Acide N-acétylglucosamine
  • Acide N-acétylmuramique

+ tétrapeptides
+ ponts peptidiques (+ il y en a, + la paroi est rigide)

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24
Q

Par quoi peuvent être détruits les peptido? Quel est le monde d’action?

A

Lysozymes (retrouvées dans larmes et mucus des humains)

Dégradent le squelette glycane = paroi absente = Bactérie Protoplasme = doit -etre dans un milieu osmotiquement stable, sinon elle lyse ou rétrécit.

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25
Où retrouve-ton LPS et que font elles?
Sur membrane externe des Gram- Facteur de virulence (endotoxine) Libère cytokines: IL-1 et TNF via l'activation des macrophages et LB = fièvre Déterminant antigénique Effets néfastes lors de chocs septiques Lipides A = activité endotoxique des LPS + ancrent les LPS à la membrane.
26
Quelle est la classification des COCCI GRAM+ ?
- Forme Sphérique (cocci) - Absence d'endospores - Catalase + ou Catalase - Staph, Strep et Enterococcus.
27
Décris le test de la catalase?
Différencie les Gram+ EN AMAS - Cocci en amas = catalase + Enzyme qui catabolise le peroxyde d'H en eau + O2.
28
Quelles sont les caractéristiques des Staph?
- Gram + - Cocci (coccus) - En amas (staphylo) - Catalase + - Non-motiles - Anaérobes facultatifs - Croient entre T 18-40 degré Dans la flore humaine (muqueuses) Causent infections peau, tissus mous, os, tractus urinaire.
29
Quelles sont les caractéristiques des Strepto?
- Gram + - En chaines (strepto) - Anaérobe facultatifs ou nécessite apport en CO2 - Besoins nutritionnels complexes: sang -sérum - Catalase -
30
Comment peut-on différencier les streptocoques?
1. propriétés sérologiques: groupes de Lancefield (A-W) 2. Capacité hémolytique B- hémolyse complète a- Hémolyse incomplète gamma - Absence d'hémolyse 3. Propriétés biochimiques.
31
Comment sont classifiés les Strepto?
B-hémolytiques selon les groupes de Lancefield a et g-hémolytique selon les propriétés biochimiques.
32
Décris strepto B-hémo du groupe A.
antigène A: S. pyogenes - croit sur pétri enrichi de sang - inhibé en grande [glucose] - Protéine M antiphagocytose - Certaines souches ont une capsule d'acide hyaluronique - plurieurs infections - - purulentes: pharyngte, scarlatine, pyodermie, érysipèle, cellulite, fascite nécrosante, impétigo, Syndrome choc toxique - - non-purulente : fièvre, rhumatisme, glomérulonphrite aigue
33
Décris strepto B-hémo du groupe B
Antigène B: S. agalactiae ``` Capsule polysaccharide (Xphago) Méningite + Pneumonie néonatale ```
34
facteurs de virulence de S. aureus?
- Capsule (Xphago) - Couche visqueuse (Adhésion Xphago) - Peptidoglycans - - Stabilité - - produit Pyrogènes endogènes - - Attracteur de leucocytes (abcès) - - Xphagocytose - Protéine A - - Lie IgG = Inhibe clairance par AC - - Chimiotaxie des leucocytes - -Anticomplémentaire (lie C3) - toxines cytolytiques - toxines exfoliatives - entérotoxines - TSST-1 (Choc toxique) Coagulase: Couche de fibrine autour de l'Abcès qui empêche alors la phagocytose Catalase: Transforme produits de dégradation (peroxyde) = Xphago Hyaluronidase: Lyse de l'acide hyalu dans les tissus conjonctifs = propagation Staphylokinase: Empêche la coagulation (fibrinolyse) Pénicillinase : (hydrolyse l'Antibio)
35
Que fait cytotoxine alpha?
forme un pore | Pertube muscles lisses des vaisseaux
36
Que fait cytotoxine beta?
Sphingomyélinase C | Hydrolyse phospholipides membranaires
37
Que fait Cyto Delta?
Surfactant qui détruit les membranes
38
Que fait gamma cyto?
Travaille avec PV leuko, | Pores dans macro + neutrophiles = lysozymes dans l'extra¢ qui détruit les tissus
39
Que font les toxines exfo A et B?
Protéases qui clivent les desmosomes des couches granuleuses de l'épiderme = SSSS
40
Que font les entérotoxines?
A= alimentaire C + D = produits laitiers contaminés ``` Hydrolyse des enzymes gastriques Superantigènes Activent les LT non spécifiques - Cytokines - médiateurs inflammation - augmente péristaltisme - Vo ```
41
Que cause la TSST-1?
Cause choc hypovolémique par stimulation +++ des cytokines
42
Quel est le mode de contamination des staph?
Contact direct
43
Quels sont les risque d'Avoir un staph. aureus?
- Opération - Corps étranger - Antibio qui détruit la flore commensale PATHOGÈNE OPPORTUNISTE
44
Quel est le principal facteur de virulence des staph à coagulase -?
peu virulent Couche visqueuse ++ permet l'adhésion, Xphago + Résistance
45
Quel est le risque de contracter des staph à coagulase -?
CORPS ÉTRANGERS ! - Blessure infectée - Infection urinaire: cathéter ou femmes actives sexuellement - Injection des jointures avec prothèses. Staph à coagulase - produit une couche visqueuse qui lie les cathéter et shunt
46
Quelles maladies peuvent causer les S.aureus?
SSSS par toxines exfoliatives - liquide clair sans leucocytes ni bactéries - rougeur et inflammation Empoissonnement alimentaire par entérotoxines - Intoxication - toxine thermostable Syndrome du choc toxique par TSST-1 - Tampons ou blessure - libération de toxine dans le sang - Fièvre, hypotension, érythème Impetigo: vésicules de pus Folliculitis: infection des follicules des cheveux Furoncle: gros nodules de pus + douleur Carbuncles: furoncle profond = fièvre Blessures infectées: Car staph aureus = opportuniste Bactériémie: propagation de l'infection Endocardite Pneumonie + Empyème: Consolidation ou abcès dans les poumons OStéomyélite: Destruction osseuse + Douleur Arthrite septique : par injection.
47
Mécanismes de résistance des Staph aureus.
Penicillinase: hydrolyse l'anneau de B-lactame de la pénicilline. (dans les plasmides) Méthicilline (cloxacilline) est résistante à la penicilinase SARM: résistance à la méthycilliae aussi : gène MecA (dans le chromosome de la bactérie) qui code pour une PBP2a
48
Comment peut-on identifier le S.pyogenes?
Catalase - Test PYR + (seul S pyogènes) Test Bacitracine + (seul S. pyogènes) Antigène A ! Coloration de gram: bleu + en chaines
49
Quels sont les pathogènes des S. pyogenes?
Évite osponisation et phagocytose (Capsule + Protéines M) Adhésion (Protéines M, prot F, a. lipoteichoique) Invasion (Protéines M et F) Toxines et enzyme: Streptococcal pyrogenic enzymes (Spe A,B,C,F)
50
Quels sont les facteurs de virulence des S.pyogenes?
Capsule d'a. Hyaluronique: non reconnaissance par ¢ hôtes (car présente dans tissus conjonctifs !) Xphagocytose Protéine M: Bloque osponisation par C3b en liant le facteur H qui dégrade C3b. (voie alternative) Protéine M-like: bloque la voie alternative et réduit la quantité de C3b lié - lient les Fc des AC ou la fibronectine et bloque l'Activation du complément) Protéine F: Fixation (adhésion) A.lipoteichoique: Adhésion C5a peptidase: Détruit l'agent chimioattractif Enzymes Toxines
51
Quelle sont les enzymes des S. pyogenes?
Streptokinase; Fibrinolyse en clivant le plasminogène. Détruit les caillots et favorise la propagation DNase : Dépolymérise l'ADN libre du pus. = diminue la viscosité des abcès et aide la propagation.
52
Quelles sont les toxines des S. pyogenes?
Extoxines pyrogènes: Spe A,B,C,F - Superantigène - Active LT + macrophages pour libérer des cytokines pro-inflammatoires (IL-1,6 et TNF) - cause fièvre et éruptions scarlatiniformes Streptolysines S et O S: Stable à l'oxygène (Sérum). donne le caractère hémolyse aux S.pyogenes, non immunogène, fait la lyse des GR, GB et plaquettes. la lyse des phagocytes libèrent des enzymes lysosomales = dommages tissulaires O: labile à l'Oxygène. Immunogène (AC). Lyse des GR, GB, plaquettes, mais inhibée par Cholestérol de la peau. Personnes aux infections cutanées ne peuvent pas développé d'AC.
53
Particularité des Superantigènes?
Lier un grand nombre de LT , qui libèren t des cytokines (dont INF-g qui active macrophages) + IL-1, IL-6 et TNF Réaction inflammatoire = contraction des ¢ endothéiales = pénétration de la bactérie dans le sang. Produisent une réaction immunitaire excessive. Se lie sur la chaine B d'un récepteur TCR.
54
Quels sont les superantigènes des Strepto pyo?
Exotoxines pyrogènes
55
Quels sont les superantigènes des Staph aureus?
Entorotoxines | Toxine-1 (TSST-1)
56
Quelles maladies peuvent causer les S.pyogenes?
Fascite nécrosante par Exotoxine pyrogène - inflammation, exsuda, oedème, hypoperfusion) - Detruit muscles et graisses - Multiplication bactérienne - cytolyse par toxines et enzymes bactériennes + microthrombose vasculaire extensive - Érythème--> Cellulite --> Bulles --> Gangrène (nécrose pas obstruction du flux sanguin) - arrêt du fonctionnement de plusieurs organes. Syndrome du choc toxique par SpeA et SpeC - Cytokines par LT --> Inflammation --> Exsudat --> hypovolémie - fièvre, éruptions cutanées - Site infectieux devient douloureux +++ - Insuffisance des organes
57
Différence entre le syndrome du choc toxique par Strepto et Staph?
Strepto: souvent associée avec fascite nécrosante + bactériémie.
58
Décris la pathogènese des S. pneumonia
``` Gram + Catalase - CAPSULE Forme ovale a-hémo si milieu aérobique B-hémo si milieu anaérobe Croissance dans les milieux enrichis de sang et nutriments ne croit pas dans un milieu avec trop de glucose, car Acide lactique est toxique pour elle ``` Les manifestations cliniques sont causées par l'infection à la bactérie et non aux toxines Pneumonies, sinusite, otite, méningite, bactériémie.
59
Quels sont les facteurs de virulence de S.pneumoniae?
- Capsule de polysaccharides (Xphagocytose) - Protéines d'adhésion (colonisation de l'oro et nasopharynx) - Acide teichoique (induit réponse inflammatoire) - Peptidoglycans (induit réponse inf, voie alternative du complément) - Phosphorylcholine: Empêche l'opsonisation car B entre dans la ¢ de l'hôte ENZYMES - Pneumolysine : -- lie le cholestérol des ¢ ciliées et phagocytes et forme des pores (cytolyse) -- Induit une réponse inflammatoire (active complément (voie classique), Il-1 et TNF) - IgA protéase : Empêche les IgA du mucus de se lier à la bactérie
60
Que font les B-lactamine?
Se lient à l'enzyme PBP et inhibent la formation de ponts peptidiques entre les chaines de peptidoglycans. Cela active des autolysines qui dégradent la paroi cellulaire = mort de la B
61
Que font les Glycopeptides?
Interagissent avec les chaines latérales D-alanine-D-alanine (substrat) et empêchent la liaison des chaines peptidoglycanes Pas d'effet sur les Gram - car les glycopeptides sont trop gros pour entrer dans les pores. On l'utilise quand il y a résistance aux B-lactamines. Ne fonctionne pas pour les entérocoques, car n'ont pas de lien D-ala D-ala
62
Quels sont les mécanismes de résistance aux antibiotiques?
1. Prévenir l'interaction entre l'antibiotique et le PBP. - Seulement par les Gram - car possèdent une couche externe par laquelle le Rx ne peut pas toujours traverser. 2. Empêcher la liaison entre l'antibiotique et l'enzyme PBP - - En surproduisant le PBP (rare) - - En produisant une PBP2a (par le gène MecA) qui ne lie pas la pénicilline - - Mutations ou recombinaison de la PBP 3. En produisant des B-lactamases - - Inactivent les B-lactamines (penicillinases, etc.)
63
Comment fonctionne la gélose de McConkey?
Gélose avec Sels biliaires et cristal violet pour inhiber la croissance des Cocci Gram + et autres Bactéries que les entérobactéries. Grande quantité de Lactose + indicateur pH Bactéries Gram- qui fermentent le lactose rend la solution acide (acide lactique) donc fait virer la coloration des colonnes roses vif
64
Décris B-hémo avec antigènes CFG.
S.Dysgalactiae Pharyngite + Glomérulonéphrite aigue
65
Décris B-hémo avec antigènes ACFG.
S. Anginosus Cause les abcès
66
Décris entérobactéries.
``` Gram- Catalase + Oxydase - Besoins nutritionnels simples. capsule (antigène K) Fermenter glucose Ubiquitaires Anacrouse facultatifs RÉduisent nitrate LPS Flagelle (pas tous) Résistance aux sels biliaires (classifier les pathogènes strictes de opportunistes) ```
67
Quels sont les FV des entérobactéries?
Facteurs de Virulence MARK 3 (FVMARK3) F: Fer ou Facteurs de croissance (vole les nutriments de l'hôte) - - Sidérophores ou chélateurs de Fer: entérobactine ou aérobactine - - Hémolysine: libère le Fer des GR V: Variation antigénique -- Choiz entre AG O, K ou H M: Résistance au sérum Killing (MAC) par la capsule A: Lipide A des LPS: Endotoxine qui active complément, libère cytokines, leucocytose, thrombocytopénie, coagulation, Hypotension, choc, mort R: Résistance aux AB par plasmides K: Anitgène K hydrophiles des capsules repoussent les surfaces hydrophobes des Phagocytes 3: Système de sécrétion 3: comme une seringue qui injecte les facteurs de virulence dans l'hôte.
68
Quelles sont les maladies extra intestinales causées par E.coli? Explique leur effet.
UTI : Cystite, pléonéphrite, prostatite - Hémolysine : détruit globules rouges = cytokines = Réaction inflammatoire - Adhésines sur P pili Méningite Néonatale - FV: Antigène capsulaire K1. Septicémie: perforation de l'intestin - Infection de l'abdomen ou SNC
69
Explique le SHU.
Shiga toxine 2 (acquise par bactériophage lysogénique) - destruction des ¢ endothéliales des glomérules = activation des plaquettes = déposition de thombine = défaillance rénale (diminution de la filtration par glomérule. - Cytokines (TNF et IL-6) - Complication par EHEC ou Shigella. - résolution en 4 à 10 si non traités - mort chez 3-5% - séquelles chez 30% - Mois chauds, < 5 ans - Consommation de viande non cuite, eau, lait non pasteurisé et jus non cuits de légumes. - transmission de personnes en personne ``` Déficience rénale aigue Thrombocytopénie Anémie microanginopahique hémolytique Manifestations au SNC HTA. ```
70
Explique Sx du SHU.
Diarrhée + douleur après 3-4 j Incubation Diarrhée saignante après 2 j onset DOuleur abdo Vo
71
Décris Les Clostridium
GRAM + Endospores Anaérobiques (ils puent) Bactéries intestinales
72
Quels sont les FV des Clos?
1. Spores leur permet de survivre dans des environnements hostiles 2. Croissance rapide en milieux enrichis et sans O2. 3. Neurotoxines, Entérotoxines + Toxines histolytiques.
73
Explique en gros l'effet des différents clos .
VA VOIR TA FEUILLE ! :)
74
Explique l'effet, les toxines des bactéridies fragiligis)
``` VA VOIR TA FEUILLE ENCORE cause Diarrhée aqueuse infections (intra-abdominale pleuropneumon, glycogénique, peau, tissus mous) Bactériémie GAstroentérite. ```
75
Que contient un spore?
- 1 copie du chromosome - Enzymes, protéines, ribosomes - Calcium lié à l'acide dipicolinique - plusieurs couches: - - 1 membrane interne - - 2 couches de peptidoglycans - - 1 membrane externe keratin-like
76
Quels sont les mécanismes de trasnfère génétique des bactéries? Décris les.
1: TRANSFORMATION par ADN libre - incorporation d'un ADN libre au génome bactérien. - bactérie compétente= incorpore naturellement l'ADN exogène à la leur - autres bactéries = électroporation (pulsation haut voltage) ou méthodes chimiques 2: CONJUGAISON par pili sexuels - sécrétion de type IV - transfert d'une bactérie donneuse (mâle) à une receveuse (femelle) par les polis sexuels. - entre les memes espèces ou non - mâle: Plasmide de conjugaison F+ qui code pour le pili. - femme: absence du plasmide (F-) - après conjugaison, la femelle devient F+ 3: TRANSDUCTION par Virus (bactériophage) - virus prend un ADN - transmettent l'ADN lorsqu'ils infectent la bactérie receveuse. - transposons s'incorporent un peu partout. - activité lytique (transduction généralisée) :prend l'ADN de la bactérie qu'elle a tué: - Activité lysogénique (transduction spécialisée): intègre le génome bactérien. les phages transfèrent des gènes particuliers.