Trafic Flashcards
Sur quelle mb sont synthétisés TOUS les pospholipides ?
Les PL (tous) sont synthétisés sur la face CYTOSOLIQUE du RE. Pour attérir face cyotisolique de la MB PLASMIQUE too.. après exocytose. Ceux qui doivent être côté EXOplasmique s’y retrouvent après action des scramblases (non spé) ou flippases ATP-dpd (spé PS-PE)
SM et PC ++ exoplasmiques
PS PE et PI ++ cytoplasmique
(Si PS exposés face exoplasmique => mort cellulaire).
Sens du trafic antérograde ? Quel coatomer ?
Bloqué par qui ?
RE -> golgi (prot de manteau/coatomer: COP2)
BREFELDINE A bloque le transport Antérograde (les mb et le contenu de golgi retournent ds le RER)
Sens du trafic rétrograde ? Quel coatomer ?
Golgi —> RE et intra-golgi (prot de manteau/coatomer: COP1)
Que fait bréfeldine A ?
Empêche le trafic antérograde.
Mémo: transport bloqué = coincé ds RER (donc trafic antérograde bloqué)
⧧ entre RER/REG et REL
Le RE rugueux/granuleux = biosynt. prot, repliement ch. polypep, motifs précoces et contrôle Q.
RE lisse = synt. lipides, réserve Ca2+, détox/autophagie.
Résumé synt. prot ds RE ? (6 grandes étapes)
- Traduction ARNm débute ds cytosol par ribo libre
- si destiné à la mb, porte une séquence signal (peptide signal PS)
- PS reconnu par SRP (Signal Recognition Particule) qui le fixe et le conduit à la mb contre un SRP Receptor (et ribo se fixe à son Ribo Receptor)
- ouverture pore aqueux (translocon) et entrée de la ch. peptidique en cours de synthèse ds lumière RE.
- PS coupé par signal peptidase
- ajout de ch. glycanniques par OST (OligoSaccharyl-Transférase): mécanisme co-traductionnel = addition en bloc d’une structure Dolichol-P-oligosaccharide (14sucres) inhibée si TUNICAMICYNE.
(Cf N-glycosylation)
—> libération de prot soluble ou ancrée à la mb RE
Prot impliquées ds le repliement et contrôle Q ? (Citer 5 prot)
-> Chaperons moléculaires (catalysent auto-assemblage, stabilisent structures intermédiaires et facilitent le transport):
BiP replie, puis interactions avec CNX (Calnexine) & CRT (Calréticuline) (après déglucosylation partielle /glucosidases 1 et 2)
-> enzymes catalysent le repliement + maturation protéolytique: ERp57 et PDI (Prot Dissulfite Isomerase) forment des ∩SS.
—»> 3 possibilités:
1- prot mal repliée: reglucosylation partielle et nouveau cycle contrôle Q
2- prot non réparable: démannolysation et rétro-translocation vers le protéasome (voie ERAD ER Associated Degradation)
3- prot correctement repliée: déglucosylation complète, sortie vers golgi
Constitution et activité des s-u du protéasome ? Localisation ?
Huge (∼ 2,5MDa) structure protéique multimérique située dehors RE.
Regulatory Particle (RP) à activité ATPase. Reco et ubiquitine* Core Particle (CP) à activité protéase et fonction canal. Coupe en minis peptides*
Golgi: fonction de tri & maturation des prot. Quelles sont les 4 types possibles ? Et leur fonctions ?
1) GLYCOSYLATION (ajout de sucres simples ou complexes sur une asparagine* (N-glyc. >50% des cas) ou sur fonction OH d’une sérine/thréonine (O-glyc.)
—> fonctº protection, repliement, antigénicité, trafic…
2) PHOSPHORYLATION (addition d’un P /kinase* with ATP sur un OH*)
—> fonctº signalisation, dés/activation, enzymes
3) SULFATATION* (ajout Sulfate par PAPS translocase ou sulfo-transférase)
—> fonctº sécrétion, dés/activation, enzymes
4) ACYLATION (ajout ch. grasses: palmitoylation, myristoylation, isoprénylation ou glypiation)
—> fonctº ancrage mbr, signalisation/trafic, dés/activation
Cas de la N-glycosylation (>50% des prot)
1ère étape ds le RE ? (inhibée par qui?)
(Décrire 6 phases)
1) Précurseur oligosaccharidique (UDP) côté CYTOPLASMIQUE
2) UDP->UMP: ajoute un P et un N-acétyl-glucosamine (Nag) sur le dolichol-P (lipide d’ancrage)
/!/ ÉTAPE INHIBÉE par TUNICAMYCINE* /!/
3) + 2ème Nag (via UDP) + 5 mannoses (via GDP)
4) à ce stade, translocation face liminale RE
5) +4mannoses (via GDP tjs et transloqués one by one)
6) +3glucoses (via UDP et transloqués one by one)
=> c’est à ce mmt que l’ensemble* est PEC /OST qui le transfère sur N (asparagine)
(d’où tunicamycine X tte N-glycosylation et dc tu meurs la ⓒ!!)
Cas de la N-glycosylation (>50% des prot)
2ème étape (après transfert du dolichol-P2-Nag2-Man9-Glu3 par OST sur N) ?
(Décrire 4 phases et leurs inhibiteurs)
1) déglucosylation partielle /glucosidases 1 et 2 (cycle Q) et perte d’1 mannose (total 8 mannoses)
/!/ CASTANOSPERMINE Xglycoprot d’entrer ds le cycle qualité et la déglucosylation partielle -> sera dc dégradée protéasome
2) transfert ds le CIS-golgi et perte de 5 autres mannoses (arrivée ds median-golgi avec 3 mannoses only)
/!/ étape inhibée par DÉOXYmannoJIRIMICYNE (=accumulation ds RE)
3) arrivée ds le median-golgi (3mannoses) glycoprot n’est plus sensible à l’enz l’ENDOGLUCOSIDASE H (qui ne sait plus couper à partir de cette structure donc same PM) et perte des derniers mannoses peut être empêchée par /!/ SWAINSONINE
4) sinon arrivée finale ds le TRANS-golgi où plus personne ne vient l’embêter, puis ajout de glycanes complexes.
Cas particulier de la N-glycosylation pr les enzymes lysosomiales ?
Ces prot portent une séquence reconnue par l’ACETYL-GLUCOSAMINE PHOSPHO-TRANSFERASE lorsqu’elles arrivent ds le CIS-golgi (8mannoses), qui transfère un donc 2 N-acétyl-glucosamine-PHOSPHATE (with UDP->UMP) sur les 2 bouts de ch. de mannoses.
Puis une PHOSPHODIESTERASE coupe les Nag pr libérer un MANNOSE-6-P
Cette phosphorylation particulière est reconnu par le récepteur du M6P qui le conduira aux lysosomes
Citer les 3 fonctions de tri de la prot maturée (ou 3 destinations ailleurs)
- sécrétion constitutive
- sécrétion régulée
- tri polarisé (transcytose: explication fonctionnement du SIM)
