Thème 2.5: Génétique - Génie génétique Flashcards
Autoradiographie
Technique qui permet de repérer un élément radioactif par mise en contact et impression d’un support photographique
Génie génétique
Ensemble des techniques utilisées pour isoler, transférer, modifier des gènes
Hybridation
Processus d’association de deux chaînes simples de nucléotides complémentaires
Sonde
En génétique, une sonde est une chaîne de nucléotides (souvent marquée) complémentaire d’un fragment d’ADN sur tout ou partie de sa longueur
OGM
Organismes génétiquement modifiés. Organismes dont l’information génétique a été modifiée par introduction d’un gène
Transgénèse
Introduction dans le génome d’une cellule d’un gène provenant d’un autre organisme, création d’OGM
- Transgenèse chez les végétaux: améliorer des plantes cultivées (résistance parasites/herbicides)
- Transgenèse chez les animaux: améliorer certaines productions animales (lait, laine, poisson)
Enzymes de restriction
- Découvertes chez les bactéries
- Reconnaissent une séquence spécifique de l’ADN de n’importe quelle espèce et la coupent en cet endroit (site de restriction)
- Ciseaux moléculaires, qui permettent d’obtenir des fragments plus petits d’ADN où il est facile de trouver un gène
Principe de l’électrophorèse
- Déposer un mélange de fragments d’ADN dans un puits sur gel d’agarose et le soumettre à un champ électrique
- ADN = molécule chargée négativement -> fragments d’ADN migrent vers le pôle positif plus ou mois vite, plus ou moins loin, selon leur taille
- Séparation des fragments d’ADN suivant leur taille
- Visualiser les fragments d’ADN ou “bandes” en utilisant un colorant spécifique (bromure d’éthidium)
- Déterminer la taille d’un fragment par comparaison à la migration de fragments “étalons” (de taille connue)
PCR - Objectif
Produire en quelques heures, environ 1 milliard de copies d’une séquence précise d’ADN
PCR - Principe
- Réplication répétée et in vitro de fragments d’ADN spécifiques par une enzyme, l’ADN polymérase
- Répétition de nombreux cycles de réplication à 3 étapes d’une séquence déterminée d’ADN
- Dénaturation de l’ADN à 95°C: séparation des 2 brins d’ADN
- Hybridation des amorces à l’ADN simple brin à 50-70°C
- Élongation des amorces par l’ADN-polymérase à 72°C: synthèse de 2 brins d’ADN complémentaires
A la fin du 3 cycle: Obtention de fragments d’ADN double brin, dont la longueur correspond exactement à la séquence recherchée = amplicons
PCR - Application
- Détection de microorganismes contaminants
- Prédiction de maladies génétiques
- Détection d’organismes pathogènes
- Test de paternité
- Identification de suspects en médicine légale