Texto 2 Practica 1 Flashcards

1
Q

¿Qué es lo que permite que el microscopio de campo claro obtenga una imagen?

A

Obtiene una imagen mediante la simple transmisión de luz a través del preparado.

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2
Q

¿Qué objetivo tiene la fijación en el procedimiento para obtener preparados histológicos?

A

Conservar la estructura celular o tisular para que mantenga una estructura similar a la in vivo.

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3
Q

¿Qué tipo de fijadores se utilizan para preservar las muestras y cuáles son algunos ejemplos?

A

Se utilizan fijadores químicos como el formaldehído, alcohol y glutaraldehído.

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4
Q

¿Cuál es la función del proceso de inclusión en la microscopía histológica?

A

Permitir la realización de cortes finos al embebir la muestra en un medio de soporte que se convierte en un bloque rígido.

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5
Q

¿Cómo se realiza el corte de muestras para microscopía y qué equipo se utiliza?

A

Se utiliza un micrótomo para realizar cortes finos que se colocan sobre un portaobjetos para su posterior tinción.

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6
Q

¿Qué diferencias existen entre la hematoxilina y la eosina en términos de tinción?

A

La hematoxilina tiñe estructuras celulares aniónicas de violeta, mientras que la eosina tiñe estructuras catiónicas de rosado.

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7
Q

¿Cómo incrementa la microscopía de contraste de fases el contraste en especímenes biológicos?

A

Transformando diferencias en el retardo del pasaje de la luz a través de la muestra en diferencias de intensidad de luz captadas por el ojo o la cámara.

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8
Q

¿Qué mecanismo específico utiliza un microscopio de contraste de fases para generar contraste?

A

Utiliza un disco opaco con un anillo transparente en el condensador y un anillo complementario en la lente objetiva para separar los rayos de luz que atraviesan la muestra de los que no lo hacen.

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9
Q

¿Cómo se genera el contraste en la microscopía de contraste interferencial de Nomarski (DIC)?

A

Separando la luz directa de la difractada utilizando prismas y vías complejas, lo que minimiza artefactos ópticos y mejora la resolución.

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10
Q

¿Qué es la fluorescencia y cómo se utiliza en la microscopía de epifluorescencia?

A

Es el fenómeno donde moléculas absorbentes emiten luz al volver a su estado basal; se utiliza para marcar y visualizar estructuras celulares específicas mediante fluorocromos.

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11
Q

¿Cómo funciona el sistema de filtros en el microscopio de epifluorescencia?

A

El sistema de filtros selecciona la longitud de onda de excitación del fluorocromo y bloquea la luz de excitación reflejada, permitiendo la captura de la luz emitida por la muestra.

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12
Q

¿Qué ventaja principal ofrece la microscopía láser confocal en comparación con otros tipos de microscopía?

A

Elimina la señal fuera de foco y permite generar secciones ópticas de la muestra con alta precisión.

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13
Q

¿Cómo contribuye el pinhole en la microscopía láser confocal a la calidad de la imagen?

A

Evita el pasaje de fluorescencia de regiones fuera del plano focal, mejorando la claridad y el enfoque de la imagen.

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14
Q

¿Qué papel desempeña el láser en la microscopía láser confocal y cómo se procesa la imagen?

A

El láser ilumina la muestra en diferentes alturas, generando secciones ópticas que son captadas por un fotomultiplicador y digitalizadas para análisis y procesamiento en una computadora.

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15
Q

¿Qué desventajas puede tener la microscopía de contraste de fases y cómo las mitiga la microscopía de contraste interferencial de Nomarski?

A

La microscopía de contraste de fases puede presentar halos brillantes; la microscopía de contraste interferencial de Nomarski reduce estos artefactos ópticos y mejora la resolución.

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16
Q

¿Cómo permite la microscopía de epifluorescencia la identificación de moléculas específicas en una muestra?

A

Al utilizar fluorocromos que se acoplan a moléculas específicas, permitiendo su visualización y diferenciación en la muestra.

17
Q

¿Por qué las muestras en microscopía de campo claro deben ser extremadamente delgadas o bien preparadas?

A

Porque la luz debe atravesar la muestra para formar la imagen, por lo que las muestras deben ser lo suficientemente delgadas para permitir el paso de la luz.

18
Q

¿Qué características deben tener los fijadores químicos para ser efectivos en la preservación de muestras?

A

Deben penetrar rápidamente en la muestra, estabilizar las moléculas y evitar alteraciones o retracción del tejido.

19
Q

¿Qué problemas pueden surgir si la muestra no es adecuadamente fijada antes de la inclusión?

A

La muestra puede sufrir alteraciones estructurales, lo que afectará la calidad de los cortes y la precisión de la observación.

20
Q

¿Cómo afecta el grosor de los cortes en la microscopía al proceso de tinción y observación?

A

Los cortes deben ser suficientemente finos para permitir que los colorantes penetren y tiñan uniformemente, de modo que los detalles celulares sean claramente visibles.

21
Q

¿Qué diferencias en el procedimiento de tinción se observan entre la hematoxilina y la eosina en términos de tipos de estructuras celulares que tiñen?

A

La hematoxilina tiñe estructuras con alta afinidad por ácidos nucleicos y proteínas básicas, mientras que la eosina tiñe proteínas y otras estructuras con afinidad por el ácido.

22
Q

¿Cómo se logra el contraste en la microscopía de contraste de fases sin utilizar colorantes?

A

Transformando el retardo en la luz causado por la muestra en diferencias de intensidad de luz que pueden ser detectadas como contraste.

23
Q

¿Qué es un retardo de 1/4λ en la microscopía de contraste de fases y cómo se convierte en contraste visible?

A

Es la diferencia de fase entre la luz que atraviesa la muestra y la que no lo hace, que se convierte en contraste visible mediante interferencia destructiva y constructiva.

24
Q

¿Qué tipo de artefactos ópticos se minimizan con la microscopía de contraste interferencial de Nomarski (DIC) y cómo se logra esto?

A

Minimiza halos brillantes y artefactos ópticos mediante el uso de prismas para separar la luz directa de la difractada, aumentando la resolución y el contraste.

25
Q

¿Cómo se diferencia la microscopía de epifluorescencia de otros tipos de microscopía en cuanto a la fuente de luz y la captura de imagen?

A

Utiliza una fuente de luz que ilumina la muestra desde arriba y captura la luz emitida por la muestra con la misma lente, utilizando filtros específicos para distinguir la fluorescencia.

26
Q

¿Por qué es importante el uso de filtros en la microscopía de epifluorescencia y cómo afectan la calidad de la imagen?

A

Los filtros seleccionan la longitud de onda específica para la excitación y bloqueo de la luz de excitación reflejada, permitiendo una imagen clara y específica de la fluorescencia emitida.

27
Q

¿Cómo mejora la microscopía láser confocal la calidad de las imágenes en comparación con otras técnicas de fluorescencia?

A

Elimina la señal fuera de foco mediante el uso de un pinhole y escanea la muestra en diferentes planos ópticos, permitiendo la reconstrucción de imágenes tridimensionales precisas.

28
Q

¿Qué impacto tiene la regulación de la intensidad del láser en la microscopía láser confocal y cómo afecta la imagen obtenida?

A

Permite reducir la fotooxidación y el daño a la muestra, así como controlar la intensidad para obtener imágenes con alta calidad y contraste.

29
Q

¿En qué situaciones sería preferible utilizar microscopía de contraste de fases sobre otros tipos de microscopía?

A

Cuando se desea observar células vivas o procesos biológicos sin fijación ni tinción, manteniendo la muestra en su estado natural.

30
Q

¿Qué beneficios específicos ofrece la microscopía de contraste interferencial de Nomarski (DIC) en la visualización de muestras biológicas complejas?

A

Proporciona un mejor contraste y resolución al reducir los artefactos ópticos, lo que permite una visualización más detallada de estructuras internas y de superficie.

31
Q

¿Cómo afecta la elección del fluorocromo a los resultados en la microscopía de epifluorescencia?

A

Cada fluorocromo tiene una longitud de onda específica de excitación y emisión, por lo que la elección del fluorocromo determina qué estructuras celulares se destacan y cómo se visualizan.

32
Q

¿Qué papel desempeña el pinhole en la microscopía láser confocal y cómo afecta la calidad de la imagen obtenida?

A

El pinhole filtra la luz que no está en el plano focal, eliminando la fluorescencia de regiones fuera de foco y mejorando la claridad y precisión de la imagen.